大柴胡顆粒質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究

關(guān)玲

摘 要：本實驗對大柴胡顆粒的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進行研究。含量測定方法：采用奧泰公司C18色譜柱（220mm×4.6mm，5μm），甲醇-0.01%磷酸溶液（60：40）（用三乙胺調(diào)PH為3.0）為流動相，檢測波長為280nm，流速為1.0ml/min，柱溫為30℃；鑒別方法：點于同一羧甲基纖維素鈉為粘合劑的硅膠G板，以氯仿-甲醇-水（80：25：2）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以2%對二甲氨基苯甲醛的40%硫酸溶液，在60℃加熱至斑點顯色清晰，置日光及紫外光燈（365nm）下檢視。結(jié)論：本法簡便、準(zhǔn)確，可用于大柴胡顆粒的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究。

關(guān)鍵詞：大柴胡顆粒；質(zhì)量；標(biāo)準(zhǔn)

大柴胡顆粒是中藥類型的顆粒劑，由柴胡、黃芩、大黃、枳實（炒）、白芍、生姜、姜半夏和大棗組成。大柴胡顆粒用于因少陽不和、肝膽濕熱所致的右上腹隱痛或脹滿不適、口苦、舌紅苔黃膩、脈弦數(shù)或弦滑，膽囊炎見上述證候者。大柴胡顆粒對小鼠經(jīng)熱板法和醋酸致扭體引起的疼痛反應(yīng)有對抗作用，還可以增加正常大鼠膽汁流量、增加膽管阻塞模型大鼠膽汁流量。柴胡始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，列為上品，用于感冒發(fā)熱、寒熱往來、瘧疾、肝郁氣滯、胸肋脹痛、脫肛、子宮脫落、月經(jīng)不調(diào)。柴胡具疏肝利膽、疏氣解郁、散火之功效。《日華子本草》記載：“補五勞七傷，除煩止驚，益氣力，消痰止嗽，潤心肺，添精補髓，天行溫疾熱狂乏絕，胸脅氣滿，健忘?！辈窈胁窈碥眨╯aikosapoins a、b、c、d）、柴胡酮醇、檸檬烯（Limonene）、月桂烯（Myrcene）、長葉烯（Longi-folene）、己酸（Caproic acid）、庚酸（Heptylic acid）、辛酸（Caprylic acid）、壬酸（Pelargonic acid）、2-壬烯酸（2-Nonenic acid）、苯酚（Phenol）、γ-辛酸內(nèi)酯（γ-Decalac-tone）、瑪索依內(nèi)酯（Messoia lactone）等。本實驗對大柴胡顆粒的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進行研究。

1 儀器與試藥

1.1 儀器：半自動點樣儀LINOMAT Ⅳ（瑞士CAMAG）；ZXTA-20雙極反滲透實驗室超純水機（北京卓信博澳儀器有限公司）；WC-52B1精密恒溫槽（上海思爾達(dá)科學(xué)儀器有限公司）；YL9100液相色譜儀（汕頭市科毅儀器設(shè)備有限公司）；賽默飛Spectronic 200可見分光光度計（百道亨儀器設(shè)備（北京）有限公司）；JA&D;艾安得HR-250A經(jīng)濟型分析天平（廣州市艾安得儀器有限公司）；DTA-27多功能靜音型臺式超聲波清洗機（鼎泰（湖北）生化科技設(shè)備制造公司）；MPC-K6s 加熱制冷型恒溫水浴油?。ū本┵惷浪純x器設(shè)備有限公司）。

1.2 色譜柱：奧泰公司C18色譜柱（220mm×4.6mm，5μm）。

1.3 對照品：黃芩苷

1.4 試劑：甲醇（杭州蕭山創(chuàng)益化工儀器有限公司）、磷酸（北京索萊寶科技有限公司）、三乙胺（北京索萊寶科技有限公司）、冰醋酸（北京索萊寶科技有限公司）、正丁醇（北京索萊寶科技有限公司）、氯仿（北京索萊寶科技有限公司）。

1.5 試藥：大柴胡顆粒

2 質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

2.1 性狀：本品為棕黃色顆粒，氣香，味酸，微苦。

2.2 含量測定

2.2.1 色譜條件

依據(jù)查閱文獻及考查的結(jié)果，確定色譜條件如下[1-6]。流動相：甲醇-0.01%磷酸溶液（60：40）（用三乙胺調(diào)PH為3.0）為流動相，檢測波長：280nm，流速：1.0ml·min-1。柱溫：30℃。理論板數(shù)按黃芩苷峰計算應(yīng)不得低于2000。

2.2.2 對照品溶液的制備

精密稱取黃芩苷對照品適量，置容量瓶中，加流動相制成每1mL含20μg的溶液，即得。

2.2.3 供試品溶液的制備

取大柴胡顆粒適量，加20毫升水超聲提取5分鐘，過濾，蒸干濾液，殘渣加甲醇溶解轉(zhuǎn)移至5ml量瓶中，并稀釋至刻度，搖勻，用微孔濾膜濾過，即得。

2.2.4 專屬性試驗

取柴胡、大黃、枳實（炒）、白芍、生姜、姜半夏和大棗等藥材按樣品制備工藝制成陰性對照樣品，按上述實驗方法檢測，結(jié)果陰性試驗沒有干擾，表明本方法專屬性良好。

2.2.5 精密度試驗

取對照品溶液按上述色譜條件，精密吸取20μl，連續(xù)進樣6次，記錄峰面積。結(jié)果，RSD=0.89%，表明本方法精密度良好。

2.2.6 對照品的線性考察

精密稱取適量黃芩苷對照品，加入流動相溶液使溶解分別配制成每毫升含10微克、20微克、30微克、40微克、50微克、60微克、120微克的溶液。分別精密上述溶 液吸取20μL，注人液相色譜儀，依照2.1項下的色譜條件測定，記錄色譜峰。以峰面積（Y）為縱坐標(biāo)，對照品進樣量（X）為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。結(jié)果表明，黃芩苷在10～120μg·mL-1范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。

3 鑒別

取大柴胡顆粒適量，加水20毫升，超聲處理5分鐘，濾過，用水飽和過的正丁醇萃取3次，每次20毫升，合并正丁醇，水浴蒸干后的殘渣，再溶于甲醇2ml中，作為供試品溶液。取柴胡對照藥材2g，加20毫升正丁醇回流提取1小時，水浴蒸干正丁醇，殘渣再溶于甲醇2ml中，作為對照藥材溶液。取大黃、枳實（炒）、白芍、生姜、姜半夏和大棗等藥材按樣品制備工藝制成陰性對照樣品，按上述方法制成陰性對照樣品。吸取上述溶液，分別點于同一羧甲基纖維素鈉為粘合劑的硅膠G板，以氯仿-甲醇-水（80：25：2）為展開劑，置用展開劑預(yù)飽和15分鐘的展開缸內(nèi)，展開，取出，晾干，噴以2%對二甲氨基苯甲醛的40%硫酸溶液，在60℃加熱至斑點顯色清晰，置日光及紫外光燈（365nm）下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材及對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點或熒光斑點，而陰性對照無干擾。

4 結(jié)論

本實驗分離效果好、方法簡便、快捷、準(zhǔn)確、專屬性好，可用于大柴胡顆粒中黃芩苷的含量測定。該鑒別方法專屬性強，操作簡單，可用于大柴胡顆粒中柴胡的鑒別。

參考文獻

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