不同播種期對穿心蓮產量及質量的影響研究*

★ 王振 周 鵬 王章偉 張功俊 呂武清 楊小玲 謝寧 *（1.江西青峰藥業有限公司 江西 贛州 341000；.創新天然藥物與中藥注射劑國家重點實驗室 江西 贛州 341000）

藥材穿心蓮藥材為爵床科植物穿心蓮Andrographis paniculata（Burm.f.）Nees 的地上干燥部分。穿心蓮藥材藥用有效成分為穿心蓮內酯、脫水穿心蓮內酯和新穿心蓮內酯等二萜類內酯化合物，具有清熱解毒，涼血，消腫功效。用于感冒發熱，咽喉腫痛，口舌生瘡，頓咳勞嗽，泄瀉痢疾，熱淋澀痛，癰腫瘡瘍，蛇蟲咬傷等疾病的治療［1］。穿心蓮原產于印度，自引種至我國后，在長江以南的廣西、廣東、福建等省廣泛種植，筆者通過實地考察，發現各產地穿心蓮種植技術粗放，田間管理較為簡單，未對播種期進行有效控制，造成產品質量不均一、波動較大。通過文獻調研，報道的穿心蓮播種期有4月上旬［2-3］、4 月中上旬［4］、5 月中上旬［5］等，時間跨度長，對穿心蓮規范化種植指導意義不大，且未對不同播種期對穿心蓮的產量及質量影響做深入研究。作為國家中醫藥管理局中藥標準化項目“喜炎平注射液標準化建設”研究內容之一，筆者在廣東湛江穿心蓮種植實驗基地開展不同播種期對穿心蓮產量及質量影響的實驗研究工作，通過考察不同播種期的穿心蓮生長量、內酯含量及畝產量等指標變化情況，確定穿心蓮最佳播種期，為粵西穿心蓮規范化種植提供理論依據。現將研究結果整理報道如下。

1 材料與儀器

穿心蓮內酯對照品（中國食品藥品檢定研究院，批號：110797-201609）；脫水穿心蓮內酯對照品（中國食品藥品檢定研究院，批號：110854-201509）；甲醇為色譜純，水為純化水，其余試劑均為分析純。穿心蓮樣本采集于廣東湛江實驗基地，經江西中醫藥大學葛菲教授鑒定為爵床科植物穿心蓮Andrographis paniculata（Burm.f.）Nees的干燥地上部分。

Waters e2695 高效液相色譜系統，XS105DU/ML204T 電子天平（梅特勒-托利多科技有限公司），KQ-300DE 數控超聲清洗器（昆山市超聲儀器有限公司，250W，33KHz）。

2 方法與結果

2.1 試驗設計方法 文中試驗用穿心蓮種植在廣東湛江實驗基地，實驗基地前茬作物為土豆，土質為磚紅色土壤，有機質為7.8mg/kg（檢測單位：廣東省綠色產品認證檢測中心），肥力中等以上。根據文獻報道并結合湛江地區在清明前后開展穿心蓮種植的歷史背景情況，試驗設計考察3月底、4月初、4月中旬、4月底4個不同播種期，試驗區按照要求完成整地備耕后，定量施用生物有機肥，施用量為0.75 kg/m2。播種方式為機械播種（參數設置如下：行距25 cm，畦距40 cm，每畦地播種4行，畦寬120 cm），播種量0.59 g/m2，每個試驗組播種面積666.7 m2，各試驗組中耕除草、排灌、施肥、病蟲害防治等田間管理措施同當地大田種植技術。

2.2 測產取樣方法 為保證測定的準確性必須科學的使用取點方法，因此，取點要力求做到合理，具有足夠的代表性、真實性，不應有任何主觀偏見。為了確保田間取點不出現人為錯誤，本次采取交叉法（梅花點）取點，地頭、周邊保護行、缺苗斷壟的地方因植株生長特殊，不具有代表性，應避免取點。每個試驗組取5個點，每個取樣點1m2左右，在播種后穿心蓮進入開花期（140天左右）開展測產取樣工作，記錄相關株高、分支數、鮮重、干重等參數，換算畝產量（畝產量=取樣點樣本干重平均值（kg）/樣本采集面積（m2）×666.7m2），計算每個試驗組平均值。

2.3 含量測定方法 穿心蓮藥材中穿心蓮內酯及脫水穿心蓮內酯含量測定，按2015版《中華人民共和國藥典》（一部）［1］“穿心蓮”項下“含量測定”方法進行測定，具體方法如下：

2.3.1 對照品溶液的制備 取穿心蓮內酯對照品與脫水穿心蓮內酯對照品各10mg，精密稱定，置同一100mL棕色瓶中，加甲醇使溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得混合對照品溶液。

2.3.2 供試品溶液的制備 取2.2項下測產樣品，粉碎，取本品粉末（過四號篩）0.5 g，精密稱定重量，精密加入40%甲醇25mL，稱定重量，浸泡1h，超聲處理（功率250W，33 KHz）30min，放冷，再稱定重量，用40%甲醇補足減失重量，搖勻，濾過。精密量取續濾液10mL，置中性氧化鋁柱（200～300目，5g，內徑1.5cm）上，用甲醇15mL洗脫，收集全部洗脫液，置50mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，過濾，續濾液作為供試品溶液。

2.3.3 色 譜 條 件 色 譜 柱：Ultimate?XB- C18（4.6mm×250mm，5μm）；流 動 相：甲 醇∶水（52∶48）；檢測波長：穿心蓮內酯為225nm，脫水穿心蓮內酯為254nm；流速0.8mL/min；柱溫30℃；進樣量5μL。理論板數按穿心蓮內酯峰計算均應不低于6000，相鄰色譜峰分離度應大于1.5，對照品及供試品色譜圖見圖1。

圖1 HPLC色譜圖

表1 不同播種期對穿心蓮生長和產量的影響（n=5）

2.4 結果與分析

2.4.1 不同播種期對穿心蓮生長和產量的影響 通過表1數據可知，在相同田間管理條件下，不同播種期對穿心蓮生長及產量均有較大的影響。在平均株高方面，由高到低依次為：4月底實驗組、4月中旬實驗組、3月底/4月初實驗組；在分支數方面，由高到低依次為：4月初實驗組、4月中旬實驗組、4月底實驗組、3月底實驗組；在畝產量方面，由高到低依次為：4月中旬實驗組、4月底實驗組、4月初實驗組、3月底實驗組，其中4月中旬實驗組相對最低組3月底實驗組增產73.21 kg，增產率為18.80%，4月底實驗組相對最低組3月底實驗組增產61.38 kg，增產率為15.76%，四月初實驗組相對最低組3月底實驗組增產56.91kg，增產率為14.62%。結合田間觀察及播種后土壤溫度情況，3月底、4月初實驗組播種后穿心蓮種子在7天左右才能發芽，而4月中旬及4月底實驗組播種后穿心蓮種子在4天左右就開始發芽，時間較短，提示在播種時應同步考慮溫度對穿心蓮種子發芽的影響。根據不同播種期穿心蓮生長情況和產量實驗結果來看，播種時期在4月中旬最佳，4月底及4月初次之。

2.4.2 不同播種期對穿心蓮有效成分含量的影響 根據含量測定結果，計算穿心蓮藥材有效成分含量的平均值，詳細數據見表2，通過數據可知，在相同田間管理條件下，不同播種期穿心蓮藥效成份穿心蓮內酯、脫水穿心蓮內酯及內酯總量均有所變化。隨著播種期的延后，穿心蓮內酯含量呈現降低趨勢，脫水穿心蓮內酯含量波動不明顯。穿心蓮內酯含量以播種期3月底實驗組最好，高達4.74%、4月初實驗組稍次，為4.73%，兩者無明顯差異；其次為4月中旬實驗組，為4.44%，4月底實驗組穿心蓮內酯含量最低，僅為3.73%；脫水穿心蓮內酯含量以播種期4月初實驗組較高，為0.71%，3月底及4月底實驗組稍低，為0.51%，4月中旬實驗組最低，僅為0.43%；穿心蓮內酯總量以播種期4月初實驗組最高，為5.44%，3月底實驗組稍低，為5.27%，4月底內酯總量最低，僅為4.26%；通過表2數據可知，不同播種期的穿心蓮藥材，穿心蓮內酯和脫水穿心蓮內酯的總量均遠遠超過“中國藥典”該品種項下的含量標準（不得少于0.80%）。因此，從穿心蓮有效成分含量指標來看，播種期以4月初實驗組最佳。

表2 不同播種時期對穿心蓮質量的影響（n=5）

3 討論與結論

上述結果分析可知，在相同播種量、相同田間管理條件下，不同播種期對穿心蓮產量及質量均有一定的影響。穿心蓮喜溫暖濕潤氣候，怕干旱，故4月初及4月中旬播種，穿心蓮藥材的產量和含量均相對較高；3月底播種，由于環境溫度較低，前期生長受到抑制，植株偏矮，造成其畝產量較低；而4月底播種時，穿心蓮發芽后在幼苗期至快速生長階段，隨著環境溫度的升高，穿心蓮植株生長未能及時封行，水分蒸發較快，增加田間管理難度。

穿心蓮畝產量與穿心蓮內酯含量、脫水穿心蓮內酯含量、內酯總量間部分呈現負相關，說明穿心蓮的產量性狀與質量性狀是一對矛盾體。為達到效益的最大化，追求最大的經濟產量，參考本研究結果并結合 “喜炎平注射液” 產品對原材料的要求，筆者以穿心蓮內酯含量及畝產量為指標，計算畝產穿心蓮內酯量（畝產穿心蓮內酯量=穿心蓮內酯含量×畝產量），以畝產穿心蓮內酯量為主要評判指標確定穿心蓮最佳播種期。結果表明，畝產穿心蓮內酯量以4月初播種實驗組最高，為21.11kg，4月中旬播種實驗組稍低，畝產穿心蓮內酯量為20.54kg，3月底播種實驗組畝產穿心蓮內酯量為18.46kg，4月底播種實驗組最低，畝產穿心蓮內酯量僅為16.81kg。

綜上所述，本研究初步確定粵西地區穿心蓮最佳播種期為4月初，研究結果與廣東湛江種植歷史背景基本吻合，為實現穿心蓮藥用植物資源的可持續利用及發展提供技術支持，同時為后續在粵西地區開展穿心蓮規范化種植提供理論依據。