淺談高效液相色譜技術在食品檢測中的應用

顧靜靜

摘要：食品行業發展以及人類健康提升中，食品檢測發揮著至關重要的作用，隨著食品安全檢測標準的逐步提升，高效液相色譜技術呈現出無法比擬的優勢。未來高效液相色譜技術將會實現更好地發展并為人們生活、健康等做出更大的貢獻。作為食品檢測人員需要在日常工作中積極總結經驗教訓，完善檢測技術方法，更好地促進食品行業的安全、健康發展。

關鍵詞：高效液相色譜技術；食品檢測；應用

一、高效液相色譜設備結構及原理

1、高效液相色譜設備結構

高效液相色譜設備涉及到幾個部分，主要包括高壓泵、進樣器、色譜柱、檢測器以及收集處理數據設備等。高壓泵要有一定的耐腐蝕性，使得流動相和樣品通過色譜分離柱和檢測系統時有足夠的動力。色譜柱能夠對物質進行有效的分離，流出液中濃度變化可以通過檢測器轉變為光學或電學信號。數據收集處理設備能夠將檢測器中檢測到的信號呈現在屏幕上。

2、原理分析

對于食品中的合成著色劑，在提取時可以使用液———液分配法等進行，制作成水溶液，利用高效液相色譜儀器實現多頻率的分離，通過標準化的溶液實現標準化曲線的建設，利用外標法，通過保留時間的長短進行準確地定性，定量一般是通過峰面積進行的。利用高壓泵將要檢測的液體吸入到儀器中，對壓力和流量計算后，進入到進樣器中，與流動相一起進入到色譜柱中，對比溶劑兩相間樣品分配系數的不同，在色譜柱中進行分離，檢測器對于不同時間流入的信號進行收集，通過數據處理設備獲得色譜圖，然后再次分析。

二、高效液相色譜技術在食品添加劑中的運用

2.1食品甜味劑的檢測

根據有無營養價值，甜味劑可分為營養型與非營養型甜味劑，一般所說的甜味劑是人工合成的非營養型甜味劑。糖精鈉是使用時間最長的人工合成甜味劑之一，WHO制訂的ADI（亞德諾半導體）為0～2.5 mg/kg。單獨測定食物中的糖精鈉方法相對簡單，應用反相色譜柱，以甲酸0.02 mol/L、乙酸銨（5∶95）為流動相，紫外檢測器，波長選擇230 nm，能很容易地獲得結果，這是國家規范檢驗方法。使用反相離子對分配型HPLC法能同時測定食品中甘草苷和糖精鈉，簡單、快速的操作。其條件為Chrosorb RP-18（5μm）柱，流動相為乙醇0.05 M磷酸二氫鈉（2∶3）溶液中含0.02 MCTA，用磷酸調pH為3.0，紫外檢測器，波長選擇245 nm。和高效液相色譜-紫外檢測法（HPLC-UV）比較，重現性好的HPLC-FLD法，準確度更高。

2.2食品防腐劑的檢測

防腐劑在食品中十分常用，主要有苯甲酸與山梨酸和其鈉鹽，其應用范圍與限量要根據GB2760-2011食品安全國家規范食品添加劑應用規范中的規定實施。食品中苯甲酸、山梨酸與糖精鈉的含量運用高效液相色譜法測定，使用C 18色譜柱，以甲醇-乙酸銨混合溶液為流動相，紫外檢測波長230 nm處，對不同的樣品使用不同的前處理方法，定容后用高效液相色譜儀實施分析定量，可獲得良好的分離效果，苯甲酸、山梨酸、糖精鈉的檢出限分別為1.8、1.2、3.0 mg/kg。用乙酸鋅溶液與亞鐵氰化鉀溶液作為沉淀劑實施樣品的預處理，為流動相的甲醇-乙酸銨混合溶液，C 18色譜柱，于波長290 nm處紫外檢驗，簡化了樣品前處理過程，分離度高，有相對好的回收率。

2.3食品色素的檢測

對2015年食品安全的檢驗規范分析，食用色素屬于被國家嚴格管控食品安全范圍的人工合成的。但因價格低且效果好，許多超國家規范的人工合成食用色素大量產生，所以需要注重對這類色素的檢驗。HPLC法可測定食品中含有違禁或過量的人工合成色素，使用樣本的合理粉碎方式和層次清洗方式。聚酰胺吸附純化LichrospherC 18柱，結果與含量的大小并沒有直接的對應影響。甲醇-乙酸銨為流動相梯度洗脫，依照對照品的相應出峰時間和積分面積得出樣品中是否含有相應色素或含量的多少。

三、高效液相色譜技術在食品營養成分中的運用

3.1糖類的檢測

食品中糖類是最廣泛的組成成分，通常情況下，糖的測定過程會影響其提取、測定結果的準確性，而高效液相色譜法的高靈敏度能彌補這一缺陷。樣本中水溶性單糖與寡糖組分的類型與含量通過高效液相色譜-蒸發光散射進行測定，使用hypersilnh柱，選擇流動性的發散光放射方式的檢驗。該方式對與糖類的檢驗有直接的判定表現。分離鑒定其碳水化合物中的焦糖等糖分所處在的變化系數區域。并對色譜中顯示的波動范圍進行堆成線性的直接視覺表現，得到檢驗樣本參照的安全規范系數。

3.2氨基酸的檢測

生物體生存與發展的關鍵基礎性物質是氨基酸，它是酶和蛋白質的主要組成成分，這2種物質自身的易變性能需要在檢驗的過程中使用新技術、新方法進行判斷。高效液相色譜法因其自身具有高度靈敏性、流動相色譜范圍大的特征，對這些物質有著可靠的提取效果，受到人們的高度注重。

3.3維生素的檢測

維生素是一類保持人體生命活動必要的有機物質，也是維持人體健康的關鍵活性物質，假如一直缺少某種維生素，就會出現生理機能障礙而產生某種疾病。用高效液相色譜法同時測定維生素B 1與維生素B 2，使用uBondpak C 18柱，色譜條件：甲醇∶水=40∶60（V/V）為流動相，0.8 mL/min的流速，使用熒光檢驗器，結果顯示平均回收率分別為95.50%和95.82%。該方法簡單、省時、干擾小并有相對較高的靈敏度、準確性及較寬的應用范圍。

四、高效液相色譜技術在有毒有害物質中的應用

作為食品安全重要課題的殘留監測，需要應用各類樣品實施解決和分析。近年來，HPLC和液質聯用技術通過不斷的發展，使其在不同種類的農藥、獸藥和毒素等有害物質的檢驗中更加廣泛地運用。在動物性食品中，殘留獸藥指的是在喂養動物的過程中服用藥物的殘留和其代謝物；殘留農藥指的是在種植植物的過程中噴灑的農藥殘留和降解產物的殘留。食品中農藥殘留問題至關重要，尤其是蔬菜水果中的農藥殘留含量分析最為重點，它不僅和人民生活息息有關，而且直接威脅到人民的健康。HPLC是分離分析熱不穩定和難揮發性化合物的最為直接有效的方法。HPLC對于分析易揮發、吸附力強不易清除的物質十分有效。

五、結語

在經濟文化繁榮發展的信息時代下，科學技術得到了快速的更新，高效液相色譜技術逐漸應用于各領域中。近年來，為了提高食品安全的質量，該技術被充分應用于食品檢測中，并取得了顯著的成果。本文主要以該技術的應用為主，分析其在食品營養成分、食品添加劑和有毒物質中的檢測情況。希望通過本文關于高效液相色譜技術相關應用的研究，為日后促進高效液相色譜技術在食品檢測中的發展提供寶貴的建議。

參考文獻：

[1]孫貝貝，房文紅.高效液相色譜技術在食品檢測中的應用[J].安徽農業科學，2010，38（35）：20454-20456，20490.

[2]單羽.高效液相色譜技術在食品檢測中的應用[J].科技創新與應用，2014，6（8）：82.

（作者單位：濱海縣綜合檢驗檢測中心）