地氯雷他定原料藥中元素雜質的測定

李 龍，于軍強，于秀麗，顏顯輝，張麗娜，解春文*

（1. 山東達因海洋生物制藥有限公司，山東 威海 264300；2. 榮成出入境檢驗檢疫局，山東 威海 264300）

重金屬雜質可誘導藥物降解，并有潛在毒性，因此重金屬雜質控制一直是藥物研發過程中的重要問題。鑒于上述原因ICH（國際人用藥品注冊技術協調會）指導委員會于2009年批準Q3D元素雜質指導原則，并規定應在不晚于2017年12月ICH主要成員國在審評與申報中提供相應的元素雜質研究資料。我國作為新加入的ICH成員國，也應在2022年前實行上述指導原則。一般藥品中元素雜質的潛在來源包括：合成過程中人為加入；或以雜質形式存在，如與生產設備相互作用或存在于藥品組分中，且最終能被檢測到[1-2]。

地氯雷他定是由先靈葆雅研制的三環長效型的第三代組胺拮抗劑，選擇性作用于H1接受體。本品在2001年經歐洲藥典管理局批準上市。本品為氯雷他定的活性代謝物，可通過選擇性地拮抗外周H1受體，快速緩解季節性過敏性鼻炎的相關癥狀；還用于緩解慢性特發性蕁麻疹相關癥狀如瘙癢，并可減少蕁麻疹的數量及大小[3-6]。

本實驗按照ICH Q3D元素雜質指導原則要求，建立了使用ICP-MS（電感耦合等離子體質譜）測定地氯雷他定中多元素雜質的方法，并探討了對各元素雜質的控制方法。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

7700型電感耦合等離子體質譜儀（安捷倫）；分析天平（梅特勒）；MARS 20微波消解儀（CEM公司）。

1.2 試藥

地氯雷他定原料（批號：170801、170802、170803）（山東達因海洋生物制藥股份有限公司）；多元素標準溶液（鋁，砷，硼，鋇，鈹，鉍，鎘，鈷，鉻，銅，鐵，鈣，鋰，鎂，錳，鎳，鉛，銻，錫，鍶，鈦，鉈，釩，鋅）（唯一標識：175056，國家有色金屬及電子材料分析測試中心）；汞單元素標準溶液（唯一標識：158022-1，國家有色金屬及電子材料分析測試中心）；硝酸為色譜級別；水為去離子水。

2 法與結果

2.1 儀器參數與樣品測定

儀器參數見表1。

表1 金屬離子含量測定ICP-MS實驗參數

2.2 溶液制備

2.2.1 對照品儲備溶液 精密量取混合標準溶液與汞元素標準溶液適量，加入2 %鹽酸水溶液溶解并稀釋制成濃度為1 μg/ml混合溶液，作為元素雜質混合對照品母液。

2.2.2 對照品溶液 分別精密量取對照品母液10，100，200，500，1000 μl，置入100 ml量瓶，加入2 %鹽酸水溶液稀釋至刻度即為對照品溶液。

2.2.3 鉛元素對照品溶液 分別精密量取對照品母液100，400，600，1200，2500 μl，置入50 ml量瓶，加入2 %鹽酸水溶液稀釋至刻度即為鉛元素對照品溶液。

2.2.4 鉛元素供試品溶液制備 精密稱取樣品0.5 g，置消解罐中，加入濃硝酸8 ml，進行消解，趕酸至近干，加2 %鹽酸水溶液稀釋制成50 mg/ml溶液，即為鉛元素供試品溶液。

2.2.5 供試品溶液 精密量取鉛元素供試品溶液1 ml，置10 ml量瓶，加2 %鹽酸搖勻并稀釋至刻度，即得。

2.3 方法學驗證

參考美國藥典<233＞[7]驗證地氯雷他定元素雜質測定方法，驗證結果如下。

2.3.1 線性與定量限 按“2.1”項下方法制備各濃度對照品標準溶液，以濃度為橫坐標，以校正數值為縱坐標進行線性回歸。結果表明標準曲線相關系數R2均大于0.99，鈀、汞、鎘、砷、鈷、釩和鎳在0～10 ppb范圍內線性關系良好，鉛在0～50 ppb范圍內線性關系良好。取空白溶劑平行測定11次，計算定量限，均低于各元素相應限度。結果見表2。

表2 線性實驗與定量限結果

2.3.2 回收率 取待測樣品，加入濃度為50 μg/ml鉛元素標準溶液0.25，0.5，0.75 ml，置入100 ml量瓶，加入2 %鹽酸溶液定容至刻度，搖勻，作為鉛元素供試品溶液；加入濃度為5 μg/ml多元素標準品溶液0.25，0.5，12 ml，置入100 ml量瓶，加入2 %鹽酸溶液定容至刻度，搖勻，作為多元素供試品溶液。每個濃度各制備3份，按“2.1”項下方法處理，分別進樣測定，計算各元素回收率。結果見表3。

表3 回收率試驗結果

2.3.3 精密度 取待測樣品，按“2.1”項下方法處理，平行制備6份，分別進樣測定，計算各元素的精密度。結果見表4。

表4 精密度實驗結果

2.4 測定結果

取3批廠家自制樣品，按“2.1”項下方法處理，分別進樣測定，計算待測樣品中各元素的含量。結果見表5。

表5 待測品測定結果

3 分析與討論

3.1 樣品處理方法的選擇

本品作為有機物，如未經處理進樣，不僅會導致有機成分離子干擾元素雜質分子離子峰檢出，嚴重會導致噴霧裝置出口處堵塞，故對樣品進行消解，以保證儀器正常運行，測定結果可靠。樣品的消解方法主要包括敞口容器消解法、密閉容器消解法和微波消解法。微波消解法具有消耗溶劑少，消解速度快，且可有效減少易揮發金屬的損失[8-9]，故選擇微波消解法對樣品進行消解。

3.2 供試品濃度的確定

ICP-MS推薦測試濃度為1～10 ppb[10-11]，但是鉛元素在此范圍內并線性較差，在提高供試品濃度后，鉛元素線性關系得到改善。由于高濃度汞元素在ICP-MS中具有記憶效應對測定結果影響較大[12-13]且其他元素在高濃度范圍內線性關系并不理想，因此選擇使用低濃度測定其他元素含量，最后確定分別使用兩種濃度測定樣品中鉛與其他元素含量。

3.3 元素雜質的確定

按照ICH Q3D元素雜質指導原則，對于常用的口服固體制劑需要對1類元素雜質鉛、鎘、砷；2A類元素雜質鈷、釩、鎳進行風險評估。同時地氯雷他定在合成過程中使用鈀碳進行催化加氫[14-16]，而鈀元素屬于2B類元素雜質，按照ICH Q3D指導原則，應定量檢測，并制定合理限度，因此在元素雜質研究中對鉛、鎘、砷、鈷、釩、鎳、鈀進行了研究，并建立了合理的控制方法。