楸葉泡桐種子的苯乙醇苷類化學成分研究

薛 景 ，王英愛 ，賈獻慧，杜成林，唐文照*

（1. 濟南大學 山東省醫學科學院 醫學與生命科學學院，山東 濟南 250200；2. 山東省醫學科學院 藥物研究所國家衛生部生物技術藥物重點實驗室 山東省罕少見病重點實驗室，山東 濟南 250062）

玄參科泡桐屬植物楸葉泡桐（P. catalpifolia Gong Tong）為多年生落葉喬木，廣泛分布于中國各地。其花、葉、樹皮與果實作為中草藥在民間用于治療腸炎、扁桃體炎、桃體炎、支氣管炎和痢疾等[1]。泡桐屬植物含苯丙素、黃酮類、萜類、苯乙醇苷類化合物，后者具有抗菌、抗炎、抗病毒、抗腫瘤、抗氧化等作用，尤以抗菌活性最為顯著[2]。目前，國內外對該屬植物中的白花泡桐、蘭考泡桐、毛泡桐有較多的研究，而學術界對楸葉泡桐的研究較少。我們實驗室前期對楸葉泡桐果皮的化學成分進行了研究，從中分離得到一些碳取代香葉基黃酮、三萜與生物堿類化合物[3-5]。經HPLC-DAD-MS/MS檢測，發現種子與果皮中的主要成分存在很大差異，在此基礎上，我們繼續對楸葉泡桐種子的化學成分進行研究，從其70 %乙醇提取物中分離純化得到7個苯乙醇苷類化合物，分別鑒定為ilicifolioside A 和isoilicifolioside A混合物（1），isoacteoside（2），plantalloside（3），orobsnchosid（4），darendoside B（5），acteoside（6），tomentoside（7）。其中, 化合物3，4，5為首次從泡桐屬中分離得到, 化合物1，2，6，7為首次從該植物中分離得到。

1 儀器與材料

1.1 儀器

Bruker AVANCE 600 MHz 核磁共振波譜儀（TMS為內標）；Agilent Trap VL 型質譜儀；U-3000型紫外光譜測定儀（日本 Hitachi 公司）；Agilent 1200 series 高效液相分析儀（美國安捷倫）；高效液相色譜儀（LC-20AB型泵，SPD-20A型紫外檢測器，LC Solution液相色譜數據工作站，日本島津公司）；制備色譜柱 ODS-A（250 mm×20 mm，5 μm，YMC）；分析色譜柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）； 柱層析硅膠，薄層色譜硅膠 GF254（青島海洋化工廠）；Sephadex LH-20（Amersham Biosciences 公司）；ODS 柱色譜填料（50～75 μm，YMC 公司）；制備HPLC所用甲醇（色譜純，美國TEDIA公司）；其他試劑均為分析純。

1.2 材料

實驗用楸葉泡桐種子采自臨沂市費縣山區，原植物經山東省醫學科學院藥物研究所孫敏耀副主任藥師鑒定為玄參科泡桐屬植物楸葉泡桐（P.catalpifoliaGong Tong），樣本（No. 20121018）保存在山東省醫學科學院藥物研究所標本室。

2 提取與分離

取干燥的楸葉泡桐種子4.0 kg，用70 %乙醇連續加熱回流提取3次，每次2 h，合并提取液后減壓濃縮得到乙醇提取物，經水混懸的乙醇提取物用乙酸乙酯與正丁醇萃取，得到萃取物。將正丁醇萃取物經硅膠柱層析，以二氯甲烷-甲醇溶劑系統梯度洗脫，薄層色譜檢測，合并Rf值相同組分。其中， 二氯甲烷-甲醇 （90:10） 洗脫部分經反復硅膠柱層析、ODS柱色譜、Sephadex LH-20柱、HPLC制備得7個苯乙醇苷類化合物ilicifolioside A和 isoilicifolioside A混合物（1），isoacteoside（2），plantalloside（3），orobsnchosid（4），darendoside B（5），acteoside（6），tomentoside（7）。

3 結果

3.1 結構鑒定

圖1 部分代表性化合物的結構式

分離得到的7個化合物都均為無定型粉末，用10 % HCl進行酸水解，薄層色譜顯示葡萄糖與鼠李糖的存在。它們具有相似的核磁共振圖譜，均含苯乙醇苷元、咖啡酰基（化合物5除外）、葡萄糖基與鼠李糖基，經結構解析，均為苯乙醇苷類化合物，部分代表性化合物的結構式見圖1。

化合物1：淡黃色無定形粉末，分子式為C31H40O16，mp124～128 ℃，該化合物的TLC用1%FeCl3乙醇溶液噴灑，顯黑綠色。ESI-MSm/z：691.0[M+Na]+, 相對分子質量為668；IR（KBr）vmax（cm-1）：3400, 1705, 1695, 1620, 1605 cm-1;UV λmax（MeOH）（nm）：220, 234, 290, 327；核磁數據（見表1與表2）與文獻[6]報道基本一致，故鑒定化合物1為isoilicifolioside A。

化合物2：黃色粉末，分子式為C29H36O15，mp 132～135 ℃，FeCl3檢測呈黑褐色。ESI-MSm/z：647.1[M+Na]+, 相對分子質量624；核磁數據（見表1與表2）與文獻[7]報道基本一致，故鑒定化合物2為isoacteoside。

化合物3：黃色粉末，分子式為C29H34O15，酸水解檢出葡萄糖和鼠李糖；ESI-MSm/z：645.1[M+Na]+，相對分子質量為622；核磁數據（見表1與表2）與文獻[8]報道基本一致，故鑒定化合物3為plantalloside。

化合物4：黃色粉末，分子式為C29H34O15。ESI-MSm/z：645.0[M+Na]+, 相對分子質量為622；核磁數據（見表1與表2）與文獻[8]報道基本一致，故鑒定化合物4為orobanchoside。

表1 化合物1～7的1H-NMR 數據（600 MHz，氘代甲醇）

表2 化合物1-7的13C-NMR 數據（150 MHz，氘代甲醇）

化合物5：白色粉末，分子式為C21H32O12。ESI-MS：m/z477.1[M+H]+；相對分子質量為476。核磁數據（見表1與表2）與文獻[9]報道基本一致，故鑒定化合物5為darendoside B.

化合物6：黃色粉末，分子式為C29H36O15，mp 135～138 ℃。ESI-MS：m/z625.0 [M+H]+，647.1[M+Na]+，相對分子質量為624。UV（MeOH）：λmax326, 289 nm。IR（KBr）vmax（cm-1）：3384, 2855, 2925, 1717, 1635, 1521, 1385;核磁數據（見表1與表2）與文獻[7]報道基本一致，故鑒定化合物6為acteoside.

化合物7：黃色粉末，分子式為C30H38O16，mp 144-148℃。ESI-MSm/z: 655.2 [M+H]+, 相對分子質量為654；UV λmax: 208, 220, 290, 330 nm；IRvmaxcm-1: 3400, 1700,1610, 1520, 1450, 1280, 1160,1040; 核磁數據（見表1與表2）與文獻[10]報道對照基本一致, 故鑒定化合物7為tomentoside。

4 討論

泡桐屬植物所含的化學成分包括三萜類、苯乙醇苷類、碳取代香葉基二氫黃酮類化合物等，課題組前期研究發現楸葉泡桐果中含有大量的黃酮類化合物，繼續研究得到了前兩種成分，但種類較少，遠低于黃酮類化合物。楸葉泡桐的種子包含在果皮中，其所含有的化學成分未見研究報道。文獻報道苯乙醇苷類化合物在泡桐屬植物中多存在于木材與樹皮中，本項研究豐富了該類化合物的植物來源，也為該植物資源的開發利用提供了科研依據。