暈可平糖漿的質量標準研究

江蘇省鹽城市食品藥品監督檢驗中心（224002）丁愛華 倪萍 支榮榮

暈可平糖漿由赭石、夏枯草、車前草、法半夏4味藥組成，具有潛陽鎮肝的作用，用于內耳眩暈癥，頭暈目眩癥。現行標準收載于《中華人民共和國衛生部藥品標準》中藥成方制劑第2冊，質量標準較為簡單。為了進一步完善該品種質量標準，本研究采用薄層色譜（TLC）法對制劑中的夏枯草和車前草進行了定性鑒別，同時采用高效液相色譜（HPLC）法測定了夏枯草中迷迭香酸的含量。

1 儀器與試劑

美國Agilent1260高效液相色譜儀，瑞士CAMAG薄層成像系統，XS205電子天平（梅特勒托利多公司），B3200-T超聲波清洗器（上海必能信超聲有限公司），電熱恒溫水浴鍋（上海蘇達實驗儀器有限公司），硅膠G薄層板（50mm×200mm，青島海洋化工廠分廠）。

附圖 暈可平糖漿HPLC色譜圖。A：對照品；B：供試品；C：陰性對照；1：迷迭香酸

夏枯草對照藥材（批號120993-2 0 1 1 0 5），車前草對照藥材（批號121543-200501），迷迭香酸對照品（含量：98.8%，批號111871-201203）均購自中國藥品生物制品檢驗所。暈可平糖漿為市售A、B兩個廠家，產品批號分別為1409121，61140401。所用試劑甲醇為色譜純，水為超純水，其他試劑均為分析純。

2 方法與結果

2.1 薄層鑒別[1][2]

2.1.1 夏枯草的TLC鑒別 取本品10mL，加水10mL，用鹽酸調節pH值至2～3，轉移至分液漏斗中，乙醚振搖提取3次，每次20mL，合并乙醚提取液，揮去乙醚，殘渣加無水乙醇1mL使溶解，作為供試品溶液。另取夏枯草對照藥材2g，加水煎煮1h，濾過，濾液濃縮至20mL，自“用鹽酸調節pH值”起，同法制成對照藥材溶液。按暈可平糖漿生產工藝及上述樣品處理方法制備缺夏枯草陰性對照溶液。照薄層色譜法（《中國藥典》2010版一部附錄ⅥB）試驗，吸取供試品溶液2μL，對照藥材溶液及陰性對照溶液各6μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以氯仿-甲醇-冰醋酸-水（7∶2∶0.5∶0.3）為展開劑，展開后，取出，晾干，噴以2%三氯化鐵溶液，加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與夏枯草對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點，缺夏枯草陰性對照沒有斑點。

附表 加樣回收試驗(n=6)

2.1.2 車前草的TLC鑒別 取夏枯草鑒別項下供試品溶液作為供試品溶液。取車前草對照藥材2g，加水煎煮1h，濾過，濾液濃縮至20mL，自“用鹽酸調節pH值”起，同法制成對照藥材溶液。按暈可平生產工藝及上述樣品處理方法制備缺車前草陰性對照溶液。照薄層色譜法（附錄VIB）試驗，吸取供試品溶液、車前草對照藥材溶液及缺車前草陰性對照溶液各5～10μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以氯仿-甲醇-甲酸（10∶1∶0.5）為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈（365nm）下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點，缺車前草陰性對照沒有斑點。

2.2 含量測定[2]

2.2.1 對照品溶液的制備 精密稱取迷迭香酸對照品適量，加流動相制成每1mL含10μg的溶液，作為對照品溶液。

2.2.2 供試品溶液的制備 精密量取本品2mL，置25mL量瓶中，加流動相20mL，超聲20min，用流動相定容至刻度，搖勻，濾過，取續濾液，即得。

2.2.3 色譜條件 色譜柱為CAPCEll PAK C18柱（250mm×4.6mm,5μm）；流動相為甲醇-0.5%甲酸（39∶61）；流速為1.0mL·min-1；柱溫為30℃；檢測波長為330nm，進樣量為20μL。理論板數按迷迭香酸峰計算，應不少于3000，見附圖。

2.2.4 空白試驗 空白溶液的制備是除夏枯草以外，按照處方比例稱取其他藥材，按其制備工藝制成空白制劑，再按供試品溶液的制備方法制備并測定，結果空白溶液在與迷迭香酸對照品相同保留時間處未出現色譜峰，故認為無干擾。

2.2.5 線性關系考察 分別精密吸取9.920μg·mL-1的迷迭香酸對照品溶液5，10，15，20，25，30μL進樣，照上述色譜條件測定，以峰面積Y為縱坐標，以迷迭香酸進樣量X為橫坐標，得回歸方程Y=3225.46X+4.79（r=0.9999），表明迷迭香酸在0.050～0.298μg線性關系良好。

2.2.6 精密度試驗 精密吸取同一對照品溶液20μL，重復進樣6次，結果峰面積的RSD0.07%，表明儀器精密度良好。

2.2.7 穩定性試驗 精密吸取同一供試品溶液20μL（批號1409121），按上述色譜條件分別在0、3.5、7、12、18、24h時測定迷迭香酸的峰面積。結果RSD0.70%，表明供試品溶液在24h內穩定。

2.2.8 重復性試驗 精密稱取同一批樣品（批號1409121），分別制備6份供試品溶液進行測定，結果迷迭香酸平均含量為92.33μg·mL-1，RSD為1.00%，表明重復性良好。

2.2.9 加樣回收率試驗 取同一批次的暈可平糖漿（批號1409121，含迷迭香酸92.52μg·mL-1）6份，精密量取1.0mL，置于25mL容量瓶中，分別精密加入迷迭香酸對照品溶液（濃度為9.920μg·mL-1）10.0mL，按2.2.2項下方法制備加樣回收供試品溶液，按2.2.3項下色譜條件分析測定，計算回收率，結果見附表。

2.2.10 樣品測定 取兩個廠家的樣品，按2.2.2項下方法制備供試品溶液，按2.2.3色譜條件進行測定，結果迷迭香酸的含量分別為92.52，28.83μg·mL-1。

3 討論

3.1 在車前草鑒別試驗中，選用展開劑時，采用了氯仿-甲醇（20∶1）、氯仿-甲醇-甲酸（20∶1∶0.5）、氯仿-甲醇-甲酸（15∶1∶0.5）和氯仿-甲醇-甲酸（10∶1∶0.5）作為展開劑，結果以氯仿-甲醇-甲酸（10∶1∶0.5）為展開劑，分離效果好，斑點清晰。

3.2 在含量測定試驗中，分別選用甲醇、乙醇、水、50%甲醇和流動相對供試品進行提取，結果表明甲醇和乙醇的提取效果不佳，水、50%甲醇、流動相的提取率差異不大，考慮到流動相配制樣品能避免基線不穩造成無法判斷雜質峰，因此提取溶劑選擇流動相。

3.3 夏枯草和車前草藥材中均含有齊墩果酸和熊果酸，前期采用HPLC法測定了市售糖漿劑中齊墩果酸和熊果酸的含量，分別為0.16，1.66μg·mL-1，含量較低，故未以齊墩果酸和熊果酸作為含量測定項，與林萍等[3]研究報道一致。夏枯草主要水溶性成分為迷迭香酸[4]，故作為本制劑的一項定量指標。不同廠家樣品的迷迭香酸含量存在較大差異，含量限定范圍還有待進一步研究。