生川烏與半夏配伍降低小鼠肝臟毒性的實驗探究

王漪

（上海市普陀區利群醫院中藥房藥劑科 上海 200333）

中藥配伍禁忌中烏頭與半夏不能配伍最早記載于《神農本草經》，因其會產生劇烈的毒副作用[1]。但是眾多醫書收載了兩者配伍使用之方，如《金匱要略》中赤丸方以川烏逐寒通陽，半夏燥濕化痰治療寒氣厥逆，《太平惠民和劑局方》中小青龍湯，以附子（烏頭的子根）溫通陽氣，半夏降肺溫肺治咽中阻噎，而《中醫方劑大辭典》共收載兩者配伍使用方劑405首[2,3]。因此，臨床上對于兩者能否配伍使用一直存有爭議，本研究探討不同劑量生川烏與半夏配伍對小鼠肝臟毒性的影響，旨在為其臨床配伍使用提供依據，現報道如下。

1.材料與方法

1.1 試劑及儀器

羅氏2010電化學發光儀及其配套試劑；日立7600全自動生化分析儀；生川烏提取液、半夏提取液。

表1 不同劑量生川烏與半夏配伍組肝臟系數及肝功能指標比較（±s）

表1 不同劑量生川烏與半夏配伍組肝臟系數及肝功能指標比較（±s）

注：與正常對照組比較，△P＜0.05；與A組比較，aP＜0.05；與B組比較，bP＜0.05；與C組比較，cP＜0.05；與D組比較，dP＜0.05。

肝功能指標谷丙轉氨酶（U/g prot） 谷草轉氨酶（U/g prot） 堿性磷酸酶（U/g prot）正常對照組 101.96±0.1717.43±2.6550.2±4.8779.6±7.82 A組 104.98±0.32△ 39.18±4.15△ 120.3±10.6△ 158.4±15.3△B 組 101.98±0.14a 18.36±2.39a 51.8±4.90a 80.4±8.03a C組 103.67±0.20△ab 32.45±3.98△ab 101.9±8.74△ab 140.2±14.6△ab D組 102.35±0.19△abc 21.67±2.78△abc 61.3±5.57△abc 92.3±10.4△abc E組 102.91±0.72△abcd 26.53±4.01△abcd 80.4±6.29△abcd 115.9±11.7△abcd分組 例數 肝臟系數（%）

表2 不同劑量生川烏與半夏配伍組氧化應激指標比較（±s）

表2 不同劑量生川烏與半夏配伍組氧化應激指標比較（±s）

注：與正常對照組比較，△P＜0.05；與A組比較，aP＜0.05；與B組比較，bP＜0.05；與C組比較，cP＜0.05；與D組比較，dP＜0.05。

分組 例數 血漿總抗氧化能力（U/ml） 活性氧（U/ml） 超氧化物歧化酶（nmol/L） 丙二醛（U/ml）正常對照組 1011.78±1.1490.48±11.2772.7±52.14.33±1.15 A組 106.20±1.25△ 123.7±14.5△ 558.9±43.6△ 6.98±1.12△B 組 1010.42±1.47a 92.36±10.7a 771.2±43.8a 4.51±0.98a C組 105.78±1.12△ab 117.4±14.8△ab 601.2±34.4△ab 6.07±1.16△ab D組 108.96±0.98△abc 96.45±10.4△abc 713.8±39.6△abc 4.98±1.04△abc E組 107.12±0.97△abcd 104.5±12.3△abcd 650.3±40.2△abcd 5.56±1.02△abcd

1.2 動物分組及給藥

SPF級昆明種小鼠60只，雌雄各半，體重（20±2）g，由實驗中心提供。實驗前至少飼養一周以適應環境。隨機分為 6組，每組10只，雌雄各半，6組小鼠一般資料無明顯統計學差異，可進行分組比對。

A組灌胃給予生川烏提取液，1.6g/kg，B組給予半夏提取液1.0g/kg，C組給予生川烏-半夏（1:0.5）提取液，D組給予生川烏-半夏（1:1）提取液，E組給予生川烏-半夏（0.5:1）提取液，正常對照組給予等體積生理鹽水。2次/天，連續4周。

1.3 觀察指標

于給藥前及給藥4周后，由小鼠眼從靜脈取血，3000r·min-1離心15min后采集血漿樣品，-80℃冷凍保存，待用。剖腹切除肝臟，生理鹽水清洗，將其置于吸水紙上，稱重，計算肝臟系數。采用羅氏2010電化學發光儀及其配套試劑及日立7600全自動生化分析儀測定肝功能指標。氧化應激指標，包括血漿總抗氧化能力、活性氧、超氧化物歧化酶、丙二醛，分別采用Fe3+還原法、Fenton反應及Gress顯色法、黃嘌呤氧化酶法、硫代巴比妥酸法（thiobarbituric acid，TBA）予以測定。

1.4 統計學方法

本次研究中所有數據均采用SPSS17.0統計軟件進行處理，計量資料采用均數±標準差（±s）表示，以F檢驗，P＜0.05表示差異具有統計學意義。

2.結果

2.1 不同劑量生川烏與半夏配伍對肝臟系數及肝功能指標影響

不同劑量生川烏與半夏配伍組肝臟系數及肝功能指標比較，差異均具有統計學意義（P＜0.05），其中給予不同劑量的生川烏與半夏配伍組均顯著低于B組（P＜0.05），D組顯著低于C組與E組（P＜0.05），結果見表1。

2.2 不同劑量生川烏與半夏配伍對氧化應激指標影響

不同劑量生川烏與半夏配伍組氧化應激指標比較，差異均具有統計學意義（P＜0.05），其中給予不同劑量的生川烏組血漿總抗氧化能力、超氧化物歧化酶活性顯著低于正常對照組（P＜0.05），D組顯著低于C組與E組（P＜0.05）；活性氧、丙二醛水平顯著高于正常對照組（P＜0.05），D組顯著高于C組與E組（P＜0.05），結果見表2。

3.討論

烏頭（Aconitum carmichaeli Debx.）為毛茛科植物烏頭的塊根，為散寒止痛要藥，半夏（Pinellia ternata（Thunb.）Breit.）為天南星科多年生草本植物，具有燥濕化痰，降逆止嘔，為治療痰濕之要藥。烏頭與半夏均為有毒中藥，其中烏頭有大毒，現代藥理實驗證實[4]，烏頭主要有效成分為生物堿，對肝腎功能毒性較大，中藥配伍“十八反”認為兩者不能配伍使用，但是部分醫家認為兩者配伍使用在寒氣厥逆、寒痰喘嗽等病癥具有良好效果，且兩者合煎未檢測到新的毒性成分產生[5-7]。

本研究對不同劑量生川烏與半夏配伍對小鼠肝臟毒性的影響進行分析，結果顯示不同劑量的生川烏與半夏配伍組肝功能指標及氧化應激指標均顯著優于單純給予生川烏組，提示生川烏與半夏臨床用量范圍內配伍通過提高小鼠肝臟抗氧化能力，拮抗生川烏肝臟毒性。但是，本實驗樣本量較少，只能為其配伍使用提供初步依據，且長期結果以及不同配伍劑量對肝臟的影響等諸多問題有待進一步探討。