侵襲性真菌感染的常規(guī)微生物學(xué)檢測

河南省長垣縣人民醫(yī)院（453400）押世凱

侵襲性真菌感染（IFI）在臨床中的發(fā)病率越來越高，特別是在血液病患者群體中。臨床中，針對真菌引起的侵襲性感染，以往都是采用實驗室診斷技術(shù)[1]，一般的檢測方法就是通過采用直接染色鏡檢和培養(yǎng)的方式進(jìn)行鑒定。這種方式雖然臨床上應(yīng)用較多，但是其中的不足也比較明顯。而微生物學(xué)檢測展現(xiàn)出良好的檢測效果[2]，本次研究共納入106例研究對象進(jìn)行分析，現(xiàn)具體報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集2016年9月～2017年9月進(jìn)入我院的懷疑侵襲性真菌感染患者106例作為研究對象，其中男性59例，女性47例，年齡最大71歲，最小19歲，中位年齡47.05歲。

（1）納入標(biāo)準(zhǔn)：①需接受真菌鑒定患者[3]；②經(jīng)醫(yī)學(xué)倫理委員會同意，患者或患者家屬簽署知情同意書。

（2）排除標(biāo)準(zhǔn)：①腫瘤、血液病患者；②精神障礙患者；③不能配合臨床鑒定的患者。

1.2 方法 106例疑似患者采用常規(guī)微生物學(xué)檢測，直接顯微鏡檢查可采用浮載液直接鏡檢法、氫氧化鉀浮載液、生理鹽水浮載液、墨汁浮載液、乳酸酚棉藍(lán)浮載液、涂片染色直接鏡檢法、革蘭染色、姬姆薩染色、六胺銀染色、過碘酸-雪夫染色、Calcofluor white（CFW）染色。如果需要培養(yǎng)檢查的疑似患者，可以考慮采用改良沙氏瓊脂、腦心浸膏瓊脂、馬鈴薯葡萄糖瓊脂、柯瑪嘉念珠顯色瓊脂，針對真菌培養(yǎng)物的檢查可采用分離針挑取法、透明膠帶法、小培養(yǎng)。

1.3 觀察指標(biāo) ①分析106例的臨床資料；②分析106例患者的感染情況。

1.4 統(tǒng)計學(xué)分析 使用SPSS19.0統(tǒng)計學(xué)軟件完成數(shù)據(jù)的處理與對比，計數(shù)資料以（n，%）形式表示，通過卡方對其予以檢驗，計量資料則以（±s）的形式來表示，通過t對其予以檢驗，只有滿足P＜0.05時，才可認(rèn)為差異在統(tǒng)計學(xué)當(dāng)中存在意義。

2 結(jié)果

2.1 106例研究對象臨床資料 106例研究對象的臨床資料見附表1。

2.2 分析106例研究對象感染情況 106例研究對象感染患者共43例感染，其中念珠菌血癥感染最多共19例（44.19%），其次為侵襲性肺曲感染、肺孢子菌病、隱球菌肺炎、毛霉感染，詳見附表2。

3 討論

因真菌感染的侵襲性感染的發(fā)生率逐漸上升，針對這類感染的診斷技術(shù)也在不斷發(fā)展。想要提高對真菌侵襲性感染的認(rèn)識以及提高檢測能力是非常重要的[4]。真菌侵襲性感染其中比較常見的真菌包括致病性酵母菌、絲狀真菌、雙相真菌、卡氏肺孢子菌。目前臨床中常規(guī)微生物學(xué)檢測方法包括直接顯微鏡檢查、培養(yǎng)檢查以及組織病理學(xué)方法。

在常規(guī)微生物學(xué)檢測的方法中，直接顯微鏡檢查是檢驗真菌存在與否的最有效的診斷方法，通過顯微鏡可以看到芽孢、菌絲和假菌絲的形態(tài)學(xué)特征，在本次研究中，可供選擇的直接顯微鏡檢查方法主要是利用各種浮載液或者采取直接鏡檢法，但是這種直接顯微鏡方法不一定能夠找到真菌的特征性形態(tài)結(jié)構(gòu)，對大部分的真菌其特征性形態(tài)結(jié)構(gòu)也不一定能夠準(zhǔn)確鑒定，最終結(jié)果的說服性存疑。而培養(yǎng)檢查特別是對念珠菌屬的培養(yǎng)，可以通過血培養(yǎng)的方式檢測出來，這對于臨床診斷以及治療非常重要。但是有一個問題就是真菌的培養(yǎng)普遍需要28天，其中雖然念珠菌只要7天。但是臨床中有研究結(jié)果顯示真菌培養(yǎng)的30%～50%的陽性率，這對于臨床而言并不能滿足臨床要求。雖然陽性率一般，但是血培養(yǎng)中的分離鑒定和藥敏試驗真實性更高，對臨床開展真菌感染的治療有積極作用。通過利用真菌培養(yǎng)，可以有效提高真菌的檢出率，還能夠?qū)φ婢M(jìn)行鑒定，有助于診斷與治療。在培養(yǎng)過程中需要注意培養(yǎng)基的選擇、培養(yǎng)溫度、培養(yǎng)時間和形態(tài)鑒定，一般接種瓊脂表面的標(biāo)本最少0.5ml，值得注意的是接種瓊脂管應(yīng)該先放平24h之后再考慮直立放置。只有在培養(yǎng)檢查的過程中注意方式方法，才能夠最大限度的發(fā)揮其效果。以腦心浸膏瓊脂為例，其一般培養(yǎng)營養(yǎng)要求較高的真菌，例如夾饃組織胞漿菌等，還可以加入抗生素抑制細(xì)菌的生長。又或者是柯瑪嘉念珠菌顯色瓊脂，在培養(yǎng)基中也需要加一些產(chǎn)色素的底物，這種培養(yǎng)基能夠在分離的同時對白念珠菌、熱帶念珠菌、克柔念珠菌進(jìn)行鑒定，但是無法鑒定其他念珠菌。而針對真菌培養(yǎng)物的檢查，一般通過光鏡觀察真菌培養(yǎng)物的菌絲、分生孢子或孢子可對鑒定有非常大的作用。在檢查的過程中，要注意觀察與記錄菌落的紋理和正反兩面觀察到的顏色，以其中的小培養(yǎng)進(jìn)行分析，小培養(yǎng)是對真菌結(jié)構(gòu)觀察的最好方法，但是針對部分傳染性非常強(qiáng)的真菌，例如芽生菌屬這類卻不適合采用小培養(yǎng)法。

附表1 106例研究對象臨床資料

附表2 分析106例研究對象感染情況

在常規(guī)微生物學(xué)檢測中，組織病理學(xué)方法能夠檢測真菌成分，其作為診斷基礎(chǔ)對確認(rèn)多種真菌感染很重要。但是組織病理學(xué)方法是一種侵入性檢查，如果是血液病患者其出現(xiàn)血小板減少或者其他危重狀態(tài)可能降低組織病理學(xué)方法的可行性。

在本次研究中，106例研究對象感染患者共43例感染，其中念珠菌血癥感染最多共19例（44.19%），其次為侵襲性肺曲感染10例（23.26%）、肺孢子菌病7例（16.28%）、隱球菌肺炎4例（9.30%）、毛霉感染3例（6.98%）。

綜上所述，針對侵襲性真菌感染采用常規(guī)生物學(xué)法檢測具有顯著臨床價值，可用于對侵襲性真菌感染的臨床輔助診斷。