藥品微生物限度檢驗誤差的影響因素及應對策略

佘凡 許占鴿

藥品檢驗是我國為了防止有害藥品流入國內、流入市場，對藥品含量、純度等進行檢查的措施，藥品質量檢驗是確保藥品質量的重要步驟，藥品微生物限度檢驗是藥品質量檢驗的一個方面，是國家為了保障藥品安全進行有效的保障制定的規范，是藥品生產企業和檢測部門必須遵守的生產標準，藥品微生物限度檢驗主要是檢驗藥品中需氧菌，霉菌數以及酵母菌的數量及相應的控制菌是否符合規定，在檢驗的過程中由于各方面的原因結果有時會出現誤差，在本次研究中我中心工作人員對以往藥品微生物限度檢驗資料進行分析總結，并對如何應對誤差進行探討，現將研究過程以及分析結果報道如下。

1 研究資料和分析方法

1.1 研究資料

隨機選取2016—2017年我藥品檢驗中心微生物限度檢驗120批次，其中包括片劑、顆粒劑、膠囊劑、丸劑、合劑五種劑型，涵蓋了固體、液體兩種類型。

1.2 分析方法

對我藥檢中心以往進行檢驗的藥品資料進行分析總結，并對我市藥品生產企業檢驗室檢驗結果進行統計分析，分析影響藥品微生物限度檢驗誤差的原因，并討論應對策略[1]。

1.3 觀察指標

對我藥檢中心選取藥品資料進行統計，觀察發生誤差的種數、發生率、影響因素等，并進行統計學分析，分析我市藥品生產企業檢驗室微生物限度檢驗結果，并進行總結。

2 結果

2.1 我藥檢中心藥品微生物限度檢驗誤差影響分析

統計我藥檢中心檢驗結果可以發現，在我藥檢所檢驗的藥品中，出現誤差率29.17%（35/120），其中既有單一因素影響，又有多因素影響，影響藥品微生物限度檢驗誤差的因素包括：操縱環境、設備以及用具影響、培養基的影響、供應液制備流程出現誤差、菌落計數出現誤差、菌種的制備以及保存不當等。影響因素以及種數見表1。

2.2 我市藥品生產企業檢驗室檢驗結果分析

對我市藥品生產企業檢驗室檢驗結果資料進行統計分析，發現整體影響藥品微生物限度檢驗誤差的因素相同，比例差別不大，詳見表2。

3 討論

藥品微生物限度檢驗是控制藥品質量的一個方面，微生物限度包括微生物種類、數量，涉及需氧菌、霉菌、酵母菌總數測定，以及相應的控制菌檢查。在藥品微生物限度檢驗過程中由于操作環境、操作技術等各方面不到位而造成藥品微生物限度檢驗結果出現誤差[2]。在本次研究中，我藥檢中心工作人員通過分析以往檢驗資料，統計出影響藥品微生物限度檢驗結果誤差的因素，主要包括操縱環境、設備以及用具影響、培養基的影響、供應液制備流程出現誤差、菌落計數出現誤差、菌種的制備以及保存不當的影響，針對上述影響提出了針對性的應對措施，主要為以下幾個方面：

3.1 操作環境影響應對分析

藥品微生物限度檢查受操作環境的影響，因此2015年版藥典對操作環境有明確的規定[3]，藥品潔凈實驗室應定期進行微生物監測，檢驗環境級別要求不低于生產環境。無菌操作室內需要有無菌操作臺，檢查所需要的酒精燈、火柴、鑷子、酒精棉等操作工具放置于無菌操作臺內，在操作之前先打開紫外燈進行殺菌（20～30 min）；定期對無菌操作臺進行檢查維修；檢驗員需要穿無菌服進入無菌操作室，禁止在無菌操作室內頻繁走動，檢驗過程中盡量減少外出[4]。

3.2 設備以及用具影響應對策略

無菌操作臺上的工具在使用前需要高溫高壓進行滅菌，然后在無菌操作臺上再次通過紫外線殺菌，高溫高壓滅菌前先洗滌干凈，然后用牛皮紙包扎后放入滅菌鍋滅菌，高溫滅菌后直接放入無菌操作臺靜置冷卻，禁止極速冷卻；定期對各種滅菌設備進行檢查維修[5]。

3.3 應對培養基影響的策略

培養基的配制是檢查過程中極為重要的一步，培養基的質量直接影響檢驗結果。培養基適用性檢查應符合藥典要求，配制時溶解要充分，滅菌要徹底，滅菌后放入無菌操作臺冷卻凝固；培養基具有使用期限，需在有效期內使用，使用時最好現用現配。培養基滅菌后只能進行一次溶解。如果保存的固體培養基需要溶解時可以使用微波爐，溫度不宜過高，培養基禁止反復凝固融化[6]。

3.4 供試液制備注意事項

藥品進行微生物限度檢驗時應保證藥物不具有殺菌或抑菌活性；采取的檢驗方法應該適合所選擇的藥品。吸取供試液之前需要將其震蕩，以保證液體分散均勻，避免吸取上清液或沉淀物而造成結果偏離。供試液如需要水浴加熱時需要注意溫度和時間，不要超過40℃，溫度過高或時間過長造成細菌死亡。供試液制備好需要在一定時間內完成檢驗，從供試液配置到傾注培養基最好在1小時之內完成，避免時間過程過長對檢驗結果造成影響[7]。

3.5 降低菌落計數誤差的注意事項

菌落計數主要是查菌落數量，一般通過肉眼觀察，計數時需要在平板的背面進行觀察，應注意觀察仔細，切勿漏掉平板邊緣菌落，同時需要注意區分菌落和顆粒物、沉淀物，可以通過配制空白培養基平板作對照，從而避免結果誤差，肉眼難以觀察時可以適當延長培養時間或借助放大鏡等儀器[8-9]進行辨識。

3.6 菌種制備、保存過程中避免誤差的措施

微生物限度控制菌檢查時需要陽性對照菌株，菌株需要定期進行傳代、避免微生物變異，檢驗時的微生物傳代次數應小于 5 代[10]。

作為檢驗科室工作人員，應該具有強烈的無菌意識，在日常工作中將無菌概念貫徹落實，工作需要細心、仔細，認真對待每一步操作，嚴格遵守操作規程，這樣才能保證檢驗結果的可靠性。

表1 我藥檢中心微生物限度檢驗誤差影響分析

表2 我市藥品生產企業檢驗室檢驗結果分析