杜仲提取物對寧鄉豬胴體性狀和肉品質的影響

李旺東，陳 輝，張 彬

（湖南農業大學動物科學技術學院，湖南 長沙 410128）

現在隨著社會的發展和人民的生活水平不斷提高，對豬肉的消費觀念也發生了巨大變化，對優質綠色安全的豬肉需求大幅增加，生豬的育種目標已從傳統的提高瘦肉率轉變為生產性能優越、肉品質優良的育種目標。植物提取物作為一種來源廣泛、成本低廉、功效全面的綠色飼料添加劑被廣泛應用于畜禽生產中。杜仲可以作為中草藥[1]，其葉不但含有多種維生素、蛋白質和礦物質等營養成分，且含有綠原酸、松脂醇二葡萄糖甙和桃葉珊瑚甙等藥用成分，是一種具有開發潛力的綠色添加劑。大量的研究表明杜仲提取物具有提高畜禽生產性能、改善機體抗氧化性、免疫調節等諸多生物學功能[2-4]。關于杜仲提取物改善胴體品質和豬肉品質的研究較多，但主要集中在三元肥育豬中，鮮見在地方品種上的研究。寧鄉花豬作為中國四大名豬品種之一，是湖南著名的地方品種，具有耐粗飼、肉質鮮嫩、抗逆性強、性成熟期早等優良特性[5]。因此，本研究以寧鄉豬為研究對象，通過在寧鄉豬飼糧中添加杜仲提取物，探討其對寧鄉豬胴體品質及肉品質相關指標的影響，以期為杜仲提取物在寧鄉豬生產中的利用提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

杜仲提取物購自張家界恒興生物科技有限公司。主要成分為綠原酸3.5%、黃酮類化合物20%、桃葉珊瑚甙等。

1.2 試驗設計與飼養管理

本試驗采用單因素試驗設計。選擇相同欄舍、相同批次、體重都相近的健康寧鄉閹母豬24頭（體重均在43 kg左右），將其隨機分為兩組，一組為對照組（飼喂基礎飼糧），另一組是試驗組（飼喂基礎飼糧+杜仲提取物1 500 mg/kg），每組4個重復，每個重復3頭。基礎飼糧配方參照NRC（2012）豬營養需求和《寧鄉豬飼養技術規程》（2009）進行配制，其飼糧組成及營養水平見表1。

試驗在湖南省流沙河花豬生態牧業有限公司寧鄉花豬生態養殖基地進行。于2018年2月20日至4月30日進行試驗，飼養試驗期為60 d，每天對豬只飼喂3次（時間分別為上午8：30，中午12：30和下午 18：30）。

表1 基礎飼糧組成及營養水平

豬舍內要放有高低溫度計，溫度控制在18～22℃，濕度控制在50%～75%，并且有溫度記錄表。定期檢查風機是否正常工作。每天清掃1次舍內豬糞，在飼喂豬時要進行刮糞。豬舍所有的消毒和免疫流程要嚴格按照養殖基地管理程序進行。

1.3 樣品采集及指標測定

1.3.1 組織樣品采集 飼養試驗結束時，將豬禁食24 h，使其自由飲水。從每個重復中隨機選擇1頭寧鄉豬進行宰殺取樣，分別取豬倒數第1至第2胸椎段背最長肌、肝臟和背脂，放置于-20℃冰箱中待測。

1.3.2 胴體性狀和肉質測定 胴體性狀和肉品質測定辦法參照《豬生產學》[6]。屠宰前稱重，屠宰依照常規辦法去頭、蹄、尾內臟（留下板油和腎臟），而后測定胴體重、屠宰率、胴體斜長、胴體直長、眼肌面積、胸腰椎結合處和腰薦椎聯合處的背膘厚及皮厚。

（1）屠宰率：指胴體重占宰前空腹重（空腹24 h，單位為kg）的比率。前蹄的去蹄部位在腕掌關節，后蹄在跗關節。去尾部位在尾根緊貼肛門處。

（2）平均背膘厚：肩部最厚處、最后肋骨處、腰薦結合處3點膘厚的平均值。

（3）pH測定部位：背最長肌胸腰椎結合處以及半膜肌中心部位（采用酸度計將電極直接插入測定部位測量）。

（4）肉色評定部位：胸腰椎結合處背最長肌橫斷面（目測評定法和儀器測定法）。

（5）肌肉大理石紋測定意義：大理石紋指一塊肌肉內可見的肌內脂肪，其狀如大理石的紋路一般。大理石紋多，說明肌內脂肪含量較高，肉質和口感較好。

1.3.3 水解氨基酸含量測定 將冷凍干燥后的肌肉和肝臟樣品磨碎后，稱取0.100 0 g左右，加入10 mL 6 mol/L的鹽酸，110℃消化24 h，定容至100 mL后取1 mL用雙蒸水稀釋10倍，0.22 m濾膜過濾后取1 mL用L-8800型全自動氨基酸分析儀（分析儀由日立公司所產）測定所有樣品中水解氨基酸的含量。

1.3.4 長鏈脂肪酸含量測定 將肌肉和肝臟樣品冷凍干燥后磨碎作為待測樣品，稱取待測樣品0.5 g左右，測定指標。長鏈脂肪酸的測定參照喻文娟等（2012）外標氣相-色譜-質譜法進行測定[7]。

1.3.5 肝臟中脂肪代謝相關基因表達量測定 采用Trizol（Invitrogen公司，美國）法提取肝臟組織中總RNA，取1 000 ng進行反轉錄（試劑盒購自TaKaRa公司），詳細方法按說明書進行。再利用實時定量（Real-time）PCR方法檢測mRNA的表達量，引物由上海生工生物工程有限公司合成。以豬β-actin為內參基因，以過氧化酶活化增生受體（PPAR）、脂肪甘油三酯脂肪酶（ATGL）、乙酰輔酶A羧化酶（ACC）、肝X受體（LXR）、脂肪酸合成酶（FAS）為目的基因進行相對定量分析其表達量（表2）。

表2 引物序列

1.4 數據統計分析

經Excel 2010初步整理后，用SPSS 21.0統計軟件中的獨立樣本t檢驗進行各處理組間差異顯著性比較，結果以平均值±標準誤表示，P＜0.05表示差異顯著。

2 結果與分析

2.1 杜仲提取物對寧鄉豬胴體性狀的影響

杜仲提取物對寧鄉豬胴體性狀的影響見表3，試驗組的屠宰率比對照組顯著提高1.53個百分點（P＜0.05），且試驗組有降低平均背膘厚的趨勢（0.05＜P＜0.10）。

表3 杜仲提取物對寧鄉豬胴體性狀的影響

2.2 杜仲提取物對寧鄉豬肉品質的影響

如表4所示，試驗組比對照組豬肌內脂肪提高2.41個百分點（P＜0.05），表明杜仲提取物對豬肌內脂肪有顯著升高的影響，而對于剪切力有降低的趨勢（0.05＜P＜0.10），試驗組與對照組相比，其余肉質指標間沒有顯著差異（P＞0.05）。

表4 杜仲提取物對寧鄉豬肉品質的影響

2.3 杜仲提取物對寧鄉豬肝臟氨基酸含量的影響

杜仲提取物對肌肉氨基酸的影響見表5，試驗組比對照組賴氨酸含量降低0.14個百分點，杜仲提取物對寧鄉豬肝臟氨基酸中賴氨酸的含量有降低的趨勢（P=0.084），試驗組比對照組精氨酸含量降低0.10個百分點，對精氨酸含量有降低的趨勢（0.05＜P＜0.10），而對其他氨基酸含量無顯著差異的影響（P＞0.05）。

表5 杜仲提取物對寧鄉豬肝臟氨基酸含量的影響

2.4 杜仲提取物對寧鄉豬背最長肌脂肪酸的影響

杜仲提取物對背最長肌脂肪酸的影響見表6。與對照組相比，試驗組寧鄉豬背最長肌亞油酸（18∶2n6）、花生四烯酸（20∶4n6）和多不飽和脂肪酸（PUFA）的含量分別顯著降低1.82、0.7和2.37個百分點。而試驗組單不飽和脂肪酸（MUFA）的含量比對照組提高1.62個百分點。杜仲提取物對寧鄉豬背最長肌脂肪酸中單不飽和脂肪酸的含量有增加的趨勢（P=0.076），而對亞油酸、花生四烯酸和多不飽和脂肪酸的含量有顯著降低的影響（P＜0.05）。

表6 杜仲提取物對寧鄉豬背最長肌脂肪酸的影響

2.5 杜仲提取物對寧鄉豬肝臟中脂肪代謝基因表達量的影響

如表7，試驗組中脂肪甘油三酯脂肪酶、乙酰輔酶A羧化酶、肝X受體、脂肪酸合成酶為目的基因的表達量分別比對照組下調62.00%、76.00%、77.00%和82.00%。杜仲提取物對寧鄉豬肝臟中脂肪甘油三酯脂肪酶、乙酰輔酶A羧化酶、肝X受體、脂肪酸合成酶為目的基因有顯著下調其表達量的影響（P＜0.05）。而對以過氧化酶活化增生受體為目的基因的表達量沒有顯著差異的影響（P＞0.05）。

表7 杜仲提取物對寧鄉豬肝臟中脂肪代謝基因表達量的影響

3 討論

3.1 杜仲提取物對寧鄉豬胴體性狀的影響

豬的生產價值取決于豬的胴體性狀的各項指標的高低，極大程度地影響著養殖場的經濟效益。而豬的胴體性狀一般受營養水平、飼養管理、品種等各種因素影響。杜仲提取物是一種無污染的飼料添加劑，有藥理作用和生理功能。可以提高飼糧養分的利用率[8]和吸收率，同時對豬腸道保持良好的狀態也有重要作用[9]。李金寶等[10]研究發現，在飼糧中加入杜仲葉提取物250 mg/kg，仔豬料重比降低，平均日增重提高。王介慶等[11]研究表明，以杜仲提取液飼喂斷奶仔豬，仔豬增重率提高，耗料量降低。Wang等[12]也得到相似的研討成果。在本試驗中，用添加杜仲提取物的試驗料飼喂寧鄉豬，使豬的屠宰率顯著提高，這與李金寶、王慶介等的試驗結果是一致的。可能是因為杜仲提取物中的有效成分如綠原酸有腎上腺素類作用，環烯醚萜類中甙元（如京尼平）能夠促成膽汁分泌，進而促進動物機體消化器官成熟及消化液分泌，從而影響豬的生長性能，提高屠宰率[13]。

3.2 杜仲提取物對寧鄉豬肉品質的影響

豬肉品質是一個涉及多方面指標的性狀[14]。現在人們生活環境條件極大程度的改變，使人們越來越看重豬肉產品的感官品質、質量安全，消費者對豬肉產品的追求已經轉變為對品質的追求。劉孟洲等[15]用杜仲葉粉3%和4%替代飼糧中同等量的小麥次粉飼喂長大二元肥育豬。結果顯示，在飼糧中加入杜仲葉粉會降低滴水損失、增大眼肌面積，同時可以提高肌肉嫩度，增加干物質和肌內脂肪含量。Lee等報道，肥育豬飼料中分別加入3%和5%的杜仲提取物，可以改善肉色、滴水損失和大理石花紋。與對照組比較，試驗組豬肌內脂肪含量提高[16]。而在本試驗中，以添加杜仲提取物為試驗組與對照組相比，添加杜仲提取物顯著提高試驗豬肌內脂肪含量，這與劉孟洲等的試驗結果一致。這可能是由于杜仲葉中含有大量的維生素及微量元素，能夠刺激中樞神經系統興奮，進而影響豬的生長性能，使肉品質的各項指標升高。此外，杜仲葉中的桃葉珊瑚甙起減緩脂質的過氧化作用，抑制亞鐵離子誘導MDA（丙二醛）的形成和阻止肌肉過快的氧化作用，對保持良好的肉品質有一定的影響。

3.3 杜仲提取物對寧鄉豬背最長肌脂肪酸的影響

豬肌肉內脂肪含有磷脂，磷脂是可以改變肉類風味成分優劣的重要物質，單不飽和脂肪酸和脂肪酸（硬脂酸除外）對肉的質量有正面的影響。可以在一定程度上提高肉的嫩度，同時也可提高其他肉品質的相關指標。但是飽和脂肪酸在血清中會轉化為膽固醇，而膽固醇過高會發生動脈硬化，使動脈將血液輸送到身體各器官和組織的能力減弱，因此肌內飽和脂肪酸達到一定數值會導致人體產生疾病。肝臟是身體內以代謝功能為主的一個重要的器官，飼糧中吸收的氨基酸進入肝臟參與分解代謝、蛋白質合成等重要過程。氨基酸是構成動物營養所需蛋白質的基本物質，在動物營養中起很大的作用，同時參與肝臟內眾多代謝通路的調控過程[17]。本試驗中杜仲提取物對寧鄉豬肝臟氨基酸中賴氨酸的含量有明顯降低的趨勢。可能是由于杜仲提取物含有的環烯醚萜如京尼平甙在腸道內可以轉變為一種高效的利膽劑（京尼平），京尼平以非膽汁酸依賴的方式途徑表現出利膽作用，并且調節肝臟谷胱甘肽（GSH）的含量[18]。谷胱甘肽的主要生理功能是消除自由基、阻止氧化、抵制衰老。谷胱甘肽含量的變化導致了部分肝臟氨基酸含量的變化。多不飽和脂肪酸含量過高則肌肉易被氧化、酸敗，使肉質量下降[19]。Fredriksen等研究表明，胴體脂肪中多不飽和脂肪酸的含量高則對人的健康有益處，但對肉質性狀有負相關的作用，使脂肪變得柔軟，容易氧化[20]。本試驗中試驗組多不飽和脂肪酸的含量降低2.37個百分點，而單不飽和脂肪酸的含量比對照組提高1.62個百分點。添加杜仲提取物的試驗組飼糧，可以使豬背最長肌中單不飽和脂肪酸有明顯增加的趨勢，可能是因為杜仲提取物中的綠原酸、黃酮類化合物等抗氧化物質，可以延緩豬肉中不飽和脂肪酸的氧化損失，因此提高了肌肉中部分不飽和脂肪酸的趨勢。李文娜等研究發現，杜仲中所含有的綠原酸能以劑量依賴性抵制離體膽固醇微膠粒形成，表明其對腸道膽固醇的吸收有抵制作用，從而減少肝臟膽固醇的合成[21]。總之，添加杜仲提取物不僅可以改善肉的品質，而且具有一定的保健功能。

3.4 杜仲提取物對寧鄉豬肝臟中脂肪代謝基因表達量的影響

PPAR屬于PPAR超家族成員，通過線粒體及過氧化物酶體的氧化作用調控游離脂肪酸（FFA）的氧化和吸收，參與調控脂肪代謝。本試驗中試驗組以脂肪甘油三酯脂肪酶、乙酰輔酶A羧化酶、肝X受體、脂肪酸合成酶為目的基因的表達量分別比對照組下調62.00%、76.00%、77.00%、82.00%。所以杜仲提取物對寧鄉豬肝臟中脂肪甘油三酯脂肪酶、乙酰輔酶A羧化酶、肝X受體、脂肪酸合成酶為目的基因有顯著下調其表達量的作用。可能是因為杜仲中的綠原酸促進機體氨基酸代謝和谷胱甘肽代謝途徑，改善機體脂質代謝水平，從而下調了乙酰輔酶A羧化酶、脂肪酸合成酶為目的基因的表達量。進而降低脂肪酸的合成，減少脂肪在動物體中的沉積[22]。

4 結論

綜上表明，飼糧中添加杜仲提取物1 500 mg/kg可以顯著提高寧鄉豬的屠宰率、肌內脂肪，顯著降低肌肉中亞油酸、花生四烯酸、多不飽和脂肪酸的含量，對脂肪代謝相關基因的表達具有顯著的抑制作用，綜合考察表明在寧鄉豬飼糧中添加杜仲提取物可以改善其胴體品質及肉品質。