1440例女性生殖道支原體的培養(yǎng)及藥敏分析

楊靖嫻，吳富煒

航天中心醫(yī)院檢驗科，北京 100049

支原體是目前導致非淋菌性尿道炎的主要病原體，其中以解脲支原體（Ureaplasma urealyticum，Uu）和人型支原體（Mycoplasma hominis，Mh）最為常見。這兩種支原體可黏附細胞、釋放毒性產物，使靶細胞發(fā)生變態(tài)反應和自身免疫反應。女性感染支原體后可引起陰道炎、宮頸炎、盆腔炎、輸卵管炎、子宮內膜炎和不孕癥等。孕婦感染后可引起絨毛膜炎，導致嬰兒流產、胎膜早破，胎兒發(fā)育遲緩等[1-2]。為了解該院女性就診者支原體的感染情況和抗生素的藥敏情況，現(xiàn)將2015年7—12月該院1 440例婦產科標本進行分析，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取在該院婦產科就診的1 440例作為研究對象，包括懷孕建檔者，人流、節(jié)育等手術者及一些疑似非淋菌性陰道炎患者，平均年齡（29.7±5.2）歲；該研究經該院倫理委員會批準；所有患者及家屬軍均該研究知情同意并自愿參與。

1.2 取材

常規(guī)消毒外陰后，用無菌拭子在宮頸管內1～2 cm處取分泌物，取材時需在宮頸內旋轉并停留15～20 s，取出后立即送檢。

1.3 試劑

采用眾愛生河北生物科技有限公司的解脲支原體、人型支原體的選擇分離固體培養(yǎng)基和解脲支原體、人型支原體選擇分離培養(yǎng)、鑒定、藥敏試劑盒，內含12種抗生素，分別為二代四環(huán)素類的強力霉素、美滿霉素，大環(huán)內酯類的阿奇霉素、克拉霉素、羅紅霉素、交沙霉素和喹諾酮類的環(huán)丙沙星、左氧氟沙星、諾氟沙星、氧氟沙星、司帕沙星以及氨基糖苷類的壯觀霉素。

1.4 方法

將標本同時進行固體培養(yǎng)和液體培養(yǎng)，24-48-72 h后，固體培養(yǎng)基在低倍鏡下鏡檢，可見人型支原體菌落較大，呈油煎蛋狀，解脲支原體菌落較小，呈棕褐色圓形狀。培養(yǎng)結果以固體培養(yǎng)鏡檢菌落后為準，藥敏結果參照液體培養(yǎng)上的結果。

2 結果

2.1 1440例標本基本情況

共檢出支原體434例，總檢出率為30.14%，其中解脲支原體347例，占比例最高，為24.10%，Uu和人型支原體（Mh）混合感染53例，Mh感染34例。見表1。

表1 1 440例支原體培養(yǎng)檢出情況分析

2.2 434株支原體對12種抗生素藥敏結果分析

434株支原體對強力霉素、美滿霉素和交沙霉素敏感性較高。3組支原體對5種喹諾酮類的藥物都具有高耐藥性，尤其是諾氟沙星。不同類型支原體之間對大環(huán)內酯類的藥敏情況稍有不同見表2。總敏感率%=對該種藥物敏感的總株數/支原體檢出總株數（%）。

表2 436株支原體對12種抗生素藥敏結果分析(%)

3 討論

近年來，泌尿生殖道支原體感染日益增長，且其傳播速度快，容易反復，易造成不同程度的并發(fā)癥和后遺癥，所以控制支原體的發(fā)生和發(fā)展尤為重要[3]。

該研究1440例標本中共檢出支原體434例，總陽性率為30.14%，較各文獻資料相比都偏低[4-5]。其中Uu單純感染陽性率24.10%，Uu＋Mh混合感染陽性率3.68%，Mh單純感染陽性率2.36%，與其他報道基本相符[5]。該研究中支原體總陽性率偏低，除了地域差異，可能與該實驗室采用了固體培養(yǎng)＋液體培養(yǎng)的雙重培養(yǎng)方法有關。該實驗室用的固體培養(yǎng)基是在營養(yǎng)豐富的基礎培養(yǎng)基中添加抑菌劑，并提供配套的二氧化碳發(fā)生片與一個密閉的微環(huán)境，能有效的保證Uu和Mh產生出能在低倍顯微鏡下直接觀察到的支原體特有的典型 （Uu深褐色海膽狀，Mh油煎蛋樣）菌落。液體培養(yǎng)基是通過添加抑菌劑和不同底物進行生化反應來判斷陰陽性結果，因此，如果標本中菌型復雜，或雜菌過多，超出培養(yǎng)基的抑菌能力，就容易造成假陽性結果。該實驗室主要以固體培養(yǎng)結果為依據，可能減少了部分假陽性結果。眾愛生河北生物科技有限公司通過驗證，其固液組合培養(yǎng)與PCR符合率100.00%。相關文獻報導純液體培養(yǎng)法存在較高的假陽性，固液組合培養(yǎng)，觀察培養(yǎng)基上生長的菌落特征，可以提高支原體檢測的特異性和敏感性，降低假陽性率和假陰性率，更好地為臨床診治提供客觀的依據[6]。

支原體是一種沒有細胞壁的最小病原微生物，所有作用于細胞壁的抗生素如青霉素類、頭孢菌素類對其不敏感[7]。臨床治療支原體感染常用藥物大都選用干擾蛋白質合成的藥物如大環(huán)內酯類，及干擾DNA復制的藥物如喹諾酮類，和阻斷氨酰基與核糖核酸合成的藥物如四環(huán)素類[8]。該組藥敏試驗數據中，支原體對四環(huán)素類的強力霉素、美滿霉素的總敏感率較高，分別為96.10%、96.33%。對喹諾酮類的藥物均表現(xiàn)為高度耐藥，尤其是諾氟沙星，總耐藥率高達95%以上，與國內各文獻報導基本一致[9]，這可能與支原體DNA基因位點發(fā)生突變有關。單純Uu感染對克拉霉素、交沙霉素、羅紅霉素和阿奇霉素的敏感率相對較好，依次為 91.67%、86.49%、77.30%、68.68%，而 Uu＋Mh混合感染和單純Mh感染對大環(huán)內酯類的藥物敏感性相對較差，與李鳳增、武曉敏等[4,9]報道的Uu對大環(huán)內酯類的藥物敏感性相差不大。

由于支原體感染與常見的婦科感染的臨床癥狀相似，常被醫(yī)生和患者忽略而未能及時進行有效治療[10]。另一方面，由于支原體為女性正常寄生菌，所以支原體培養(yǎng)陽性有可能只是帶菌狀態(tài)，醫(yī)師應根據患者的臨床癥狀來綜合分析評價。抗生素的濫用等問題造成耐藥菌株增多，人體菌群失調，且臨床治療支原體常用的各種藥物耐藥性存在個體差異，因此建議治療前應進行支原體培養(yǎng)和藥敏分析，根據藥敏結果選用抗生素，盡量合理用藥，以及時控制患者病情，并減少耐藥株的產生。