正常認知功能老年人群載脂蛋白E基因多態性分布特征分析

王景濤 李 凌 袁 晶

1)鄭州大學第一附屬醫院神經內科，河南 鄭州 450052 2)北京協和醫院神經科，北京 100760

許多研究已經證實，載脂蛋白E(apolipoprotien E，ApoE)基因多態性與人類多種疾病，如冠心病(coronary heart disease，CHD)、高脂血癥、缺血性腦血管病、阿爾茨海默病(Alzheimer’s disease，AD)等有密切的關系[1-2]。研究顯示，ApoE ε4等位基因顯著增加了AD患病風險[3]，同時也降低了遲發性AD的發病年齡[4]。薈萃分析顯示，ApoE ε4等位基因也與血管性癡呆密切相關，增加了其患病風險[5]。以上提示該基因在人體正常代謝和疾病狀態下擔負著重要使命。國外研究顯示，不同人群和種族該基因的分布存在較大差異。本研究選取一個正常認知功能老人群，以探討我國正常認知功能老人群中ApoE基因的分布特征。

1 對象與方法

1.1樣本樣本來源于1921—1941年、1948—1954年在北京協和醫院婦產科病房出生的人群[6]。從中選取認知功能正常的、資料齊全的500例作為樣本。

所有研究對象在認知障礙門診須完成詳細的臨床資料評估和認知功能測評，完成頭顱CT或頭顱海馬像檢查。臨床資料包括癡呆患者的人口學資料(包括姓名、性別、年齡、民族、出生地、目前居住地、教育程度和年限、職業等一般情況)、現病史、既往史、吸煙飲酒史、家族史，系統體格檢查和神經系統專科檢查。認知功能測試量表包括簡易精神狀態評分(MMSE)、物體記憶測驗(FOM)、語言流暢性測驗(RVR)，WISC積木測驗、WAIS數字廣度測驗、Hachinski缺血量表(Hachinski Ischemic Score，HIS)評分、漢密爾頓抑郁量表評分、日常生活能力量表(ADL)等。

1.2 DNA提取抽取研究對象晨空腹血4～5 mL，加入EDTA抗凝管內，應用飽和鹽沉淀-氯仿抽提法提取DNA，并應用分光光度計測定DNA濃度。

1.3 ApoE基因型測定應用聚合酶鏈反應-限制性片段長度多態性分析法測定ApoE基因型。本課題所用試劑和儀器的廠家、測定詳細步驟和ApoE的電泳圖見課題組相關論文[7]。

1.4統計學處理計量資料采取均數±標準差表示，等位基因頻率和基因型頻率采用基因計數法，應用擬合優度χ2檢驗探討ApoE基因型是否符合Hardy-Weinberg平衡。不同地區ApoE基因頻率比較應用χ2檢驗。P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1一般情況500例研究對象，男256例(51.2%)，年齡(66.5±6.3)歲，其中<60歲75例(15%)，60～69歲254例(50.8%)，≥70歲171例(34.2%)；受教育程度<7 a 17例(3.4%)，7～12 a 140例(28.0%)，>12 a 343例(68.6%)；有癡呆家族史38例(7.6%)。認知功能：MMSE評分(26.2±3.4)分，MoCA評分 (23.5±3.8)分。

2.2 ApoE基因分布ε2、ε3、ε4等位基因頻率分別為7.20%、86.00%、6.80%；基因型頻率分別為ε2/2(0.80%)、ε2/3(12.20%)、ε2/4(0.60%)、ε3/3(73.60%)、ε3/4(12.60%)、ε4/4(0.20%)。χ2檢驗顯示其基因分布符合Hardy-Weinberg平衡。

表1顯示，挪威、澳大利亞、智利和英國人群ε3頻率低于比本研究(分別為χ2=44.71、10.49、28.30、10.388，P<0.05)，ε4頻率高于本研究(分別為χ2=32.10、22.44、46.12、10.403，P<0.05)。伊朗和日本人群ε3頻率與本研究差異無統計學意義(分別為χ2=2.74、1.26，P>0.05)，ε4頻率差異也無統計學意義(分別為χ2=0.118、3.174，P>0.05)。

表1 不同國家和地區正常老年人ApoE基因分布比較

注：與本研究相比，*P<0.05；與本研究比較，#P>0.05

3 討論

多個研究顯示，不同種族的ApoE基因型分布不同。高加索人群的ApoE等位基因和基因表型分布基本一致，而芬蘭人群較高的ε4頻率是顯著例外[8]。冰島人群的ε4頻率也較其他高加索人群略高[9]。來自挪威和荷蘭人群的研究顯示，其ε4頻率也低于芬蘭[10]。總的來說，亞洲人群ε4頻率較歐洲低[11-26]。北歐的ε4頻率高于南歐，而亞洲則未觀察到南北方的這種ε4頻率變化趨勢[27-45]。

本研究顯示，500例認知功能正常的老年人群中，ε2、ε3、ε4等位基因頻率、基因型頻率與此前報道的北京老年人群的等位基因頻率無顯著差異。挪威、澳大利亞、英國、智利等[11-13]國家的正常老年人群ε3頻率在74.0%～78.0%，顯著低于本研究；而其ε4頻率在14.0%～19.0%，則顯著高于本研究。日本[14]和伊朗[15]正常老年人ε3 頻率在80.8%～91.2%，ε4頻率在6.1%～12.9%，與本研究差異均無統計學意義(P>0.05)。提示挪威、英國、智利、澳大利亞等歐美大洋洲國家正常老年人群的ε4等位基因頻率明顯高于我國漢族老年人群，而日本、伊朗和等亞洲國家正常老年人群ε3、ε4等位基因頻率則無顯著差異。

就全球水平而言，非洲和大洋洲的ε2等位基因頻率較高(分別為0.099±0.083 和 0.111±0.052)；同樣，大洋洲和非洲的ε4等位基因均數也較高(分別為0.221±0.149和0.221±0.149)，而印度和亞洲人群則顯示了最高的ε3等位基因頻率。盡管大洋洲和非洲的基因多樣性最高(分別為48.7%、46.3%)，但南美洲的基因變異系數最高(9.6%)。就人種而言，黑皮膚人群ε4等位基因明顯高于含黑色素少的人群；高度半島化地區，如地中海、東亞和中北美洲南部等地的輕中度膚色人群的ε4頻率最低(5%～10%)[16]。有研究顯示，南部伊朗健康人群中ε3和ε4頻率分別為0.886、0.051，其ε4頻率是世界最低的[17，46-52]。

本研究再次證實不同種族之間ApoE基因分布存在較大差異，亞洲人群ε4頻率低于歐美人群，ε3頻率則高于歐美人群。