不同產(chǎn)地黃芩對(duì)小鼠急性肝損傷保護(hù)作用的實(shí)驗(yàn)研究

劉巖　計(jì)小清　趙印濤　辛思源　杜英杰　孔令娟　高占華

摘要：本文通過(guò)四氯化碳（CCl4）對(duì)實(shí)驗(yàn)小鼠造成急性肝損傷，觀察不同產(chǎn)地、不同用量的黃芩保護(hù)小鼠實(shí)驗(yàn)性肝損傷作用的區(qū)別，結(jié)果證明黃芩對(duì)CCl4所致小鼠的肝損傷，可能通過(guò)增加了小鼠肝細(xì)胞的抗損傷能力起到相應(yīng)的保護(hù)作用。

關(guān)鍵詞：黃芩；CCl4；急性肝損傷；小鼠

中圖分類(lèi)號(hào)：G642.423 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A 文章編號(hào)：1674-9324（2018）27-0264-02

黃芩[1]是唇形科Labiatae植物黃芩的干燥根，最早收載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，味苦性寒，具有清熱燥濕、瀉火解毒、止血、安胎等功效。現(xiàn)代藥理學(xué)研究證明，其具有抗氧化、抗菌、抗病毒、抗腫瘤、保肝、利膽等功效。肝臟是有毒物質(zhì)或藥物在人體內(nèi)代謝、轉(zhuǎn)化的重要場(chǎng)所，是人體重要的代謝器官，因此外源性物質(zhì)很容易攻擊肝臟，從而引發(fā)慢性或急性的肝損傷。人肝臟損傷的特點(diǎn)，與CCl4所導(dǎo)致的肝損傷動(dòng)物模型十分相近，因?yàn)镃Cl4引起的急性肝損傷，與人類(lèi)肝臟受損的實(shí)際情況非常相似，在實(shí)驗(yàn)中應(yīng)用較為廣泛。因此，本研究通過(guò)CCl4對(duì)實(shí)驗(yàn)小鼠造成急性肝損傷，觀察不同產(chǎn)地、不同用量的黃芩保護(hù)小鼠實(shí)驗(yàn)性肝損傷作用的區(qū)別。

一、材料與方法

（一）藥品及試劑

黃芩分別取自河北省承德市、山西省運(yùn)城市、山東省臨沂市、甘肅省定西市。取各產(chǎn)地黃芩均為15g，分別制成100ml藥液作為高劑量組（150mg﹒ml-1）；取高劑量藥液50ml稀釋至100ml作為中劑量組（75mg﹒ml-1）；取中劑量藥液50ml稀釋至100ml作為低劑量組（37.5mg﹒ml-1）。橄欖油化學(xué)純（成都市鑫龍?jiān)噭S，生產(chǎn)批號(hào)20140615）；CCl4分析純（成都市鑫龍?jiān)噭S，生產(chǎn)批號(hào)20140809）。SOD（生產(chǎn)批號(hào)20141021）、MDA（生產(chǎn)批號(hào)20141019）試劑盒由南京建成生物工程研究所提供，ALT（生產(chǎn)批號(hào)211448G）、AST（生產(chǎn)批號(hào)211106G）試劑盒由北京利德曼生化股份有限公司提供。

（二）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

健康昆明種小鼠共112只，雌雄各半，體重為（25±3）g，[許可證號(hào)：SCXK（京）2012-0001]，由北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司提供。小鼠常溫飼養(yǎng)，常規(guī)飲食、飲水，適應(yīng)性飼養(yǎng)1周。

（三）主要儀器設(shè)備

日立7600-020全自動(dòng)生化分析儀；722分光光度劑（上海欣茂儀器有限公司）；LDZ5-2低速自動(dòng)平衡離心機(jī)（北京醫(yī)用離心機(jī)廠）。

（四）方法

取實(shí)驗(yàn)小鼠隨機(jī)分為14組，每組8只，分別為實(shí)驗(yàn)對(duì)照組、模型組、山西運(yùn)城（低、中、高）、河北承德（低、中、高）、山東臨沂（低、中、高）和甘肅定西（低、中、高）劑量組。實(shí)驗(yàn)對(duì)照組和模型組小鼠用生理鹽水灌胃，各給藥組按照0.2ml﹒10g-1灌胃，各組小鼠均給藥1周。末次給藥后2h，實(shí)驗(yàn)對(duì)照組按10ml﹒kg-1給予橄欖油腹腔注射，模型組和各給藥組小鼠腹腔注射0.1%的CCl4橄欖油溶液，造模后實(shí)驗(yàn)小鼠禁食不禁水24小時(shí)。各組實(shí)驗(yàn)小鼠禁食不禁水24小時(shí)后斷頭取血，常規(guī)制備血清。然后按照各試劑盒說(shuō)明書(shū)方法，分別檢測(cè)各組小鼠血清ALT、AST活性和SOD、MDA含量。

（五）數(shù)據(jù)處理

數(shù)據(jù)以X±S表示，應(yīng)用SPSS—17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行方差分析。

二、結(jié)果

模型組小鼠血清ALT、AST含量顯著高于實(shí)驗(yàn)對(duì)照組（P<0.01）。各給藥組小鼠血清ALT、AST含量均低于與模型組，其中山西運(yùn)城（中、高）、承德（低、中、高）、山東臨沂（高）、甘肅定西（高）劑量組小鼠血清ALT含量與模型組比較均顯著下降（P<0.01），山西運(yùn)城（中、高）、承德（中、高）、山東臨沂（高）、甘肅定西（高）劑量組小鼠血清AST含量與模型組比較均有顯著性差異（P<0.01）。模型組小鼠血清SOD含量明顯低于實(shí)驗(yàn)對(duì)照組（P<0.05），各給藥組小鼠血清SOD含量均高于模型組，其中山西運(yùn)城（高）、河北承德（中、高）、甘肅定西（高）劑量組小鼠血清SOD含量明顯高于模型組（P<0.05）。模型組小鼠血清MDA含量與實(shí)驗(yàn)對(duì)照組比較明顯升高（P<0.01），各給藥組小鼠血清MDA含量與模型組比較均有所降低，其中山西運(yùn)城（高）、河北承德（中、高）、山東臨沂（高）、甘肅定西（高）劑量組小鼠血清MDA含量與模型組比較均存在顯著性差異（P<0.01）。

三、討論與結(jié)論

肝臟的主要功能是以代謝為主，在人體內(nèi)，以儲(chǔ)存肝糖、分泌性蛋白質(zhì)的合成、去氧化等為主要作用，肝臟一旦出現(xiàn)損傷，人體的物質(zhì)代謝等功能將發(fā)生紊亂，甚至?xí)＜吧黐2]。因此，肝臟對(duì)人體至關(guān)重要。

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，模型組與實(shí)驗(yàn)對(duì)照組小鼠比較，血清ALT、AST含量均明顯升高，說(shuō)明CCl4對(duì)肝細(xì)胞造成了明顯的損傷作用。不同產(chǎn)地、不同劑量給藥組小鼠血清ALT、AST含量均低于模型組，且產(chǎn)自河北承德的黃芩效果尤為明顯，并呈劑量相關(guān)性。因此，表明黃芩能增加小鼠肝細(xì)胞的抗損傷能力，在一定程度上對(duì)肝臟具有保護(hù)作用。

肝損害的程度及治療后肝功能恢復(fù)的情況，可由肝組織內(nèi)MDA含量的變化來(lái)反映。自由基是人體正常生化過(guò)程的中間產(chǎn)物，同時(shí)機(jī)人體還含有一些清除氧自由基的酶，如SOD，疾病的發(fā)生可能是由自由基產(chǎn)生過(guò)多或者機(jī)體內(nèi)的酶含量過(guò)少導(dǎo)致，SOD能抑制自由基啟動(dòng)的脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)，并能清除自由基，但是當(dāng)抗氧化酶活力不足時(shí)，清除機(jī)體自由基時(shí)就會(huì)產(chǎn)生障礙，最終自由基含量升高，從而引起細(xì)胞膜破裂和細(xì)胞功能的喪失，因此SOD的變化可以間接地反應(yīng)疾病情況下自由基的變化。本研究結(jié)果表明，各給藥組SOD含量較模型組均有所升高，而MDA含量均有所下降，而產(chǎn)自河北承德的黃芩效果更為明顯，且呈劑量相關(guān)性。表明黃芩的保肝作用與其能抑制自由基脂質(zhì)過(guò)氧化存在一定相關(guān)性。

綜上所述，黃芩對(duì)CCl4所致小鼠的肝損傷，可能通過(guò)增加了小鼠肝細(xì)胞的抗損傷能力起到相應(yīng)的保護(hù)作用。在不同產(chǎn)地的黃芩中，山西運(yùn)城和河北承德中、高劑量組的黃芩保肝作用比低劑量組效果更好，說(shuō)明黃芩對(duì)肝損傷小鼠的保護(hù)作用與其產(chǎn)地及劑量均呈一定相關(guān)性。同時(shí)，黃芩對(duì)小鼠肝損傷的保護(hù)作用與其能夠提高肝臟的抗氧化能力也具有一定關(guān)系。

參考文獻(xiàn)：

[1]黨珍，張艷萍，王西芳，等.陜西子洲地產(chǎn)黃芩資源調(diào)查研究[J].現(xiàn)代中醫(yī)藥，2017，5（37）：79-81.

[2]夏娜，陳義磊，陶海燕，等.藥桑多糖對(duì)四氯化碳所致大鼠肝損傷的保護(hù)作用[J].食品科學(xué)，2015，36（13）：247-251.