丙泊酚對肝部分切除術治療的原發性肝癌患者外周血淋巴細胞亞群和血清腫瘤相關標志物水平的影響

伍家彬，謝曉海

原發性肝癌（primary liver cancer，PLC）是起源于肝臟上皮或間葉組織的惡性腫瘤，每年PLC死亡人數約有60萬，僅次于肺癌[1]。發病原因可能與病毒感染、酒精中毒、微量元素缺乏和肝硬化等因素相關。PLC患者早期無明顯癥狀，中晚期出現肝區疼痛、消瘦、乏力、腹脹、低熱等現象[2，3]。手術切除是治療PLC的有效方法，但在疾病發展過程中，PLC患者機體免疫力普遍受到影響，不同麻醉藥物也會對免疫功能造成不同程度的影響。所以，在施行肝部分切除術時，選擇合適的麻醉藥顯得十分重要[4]。丙泊酚是一種外科常用手術麻醉藥，麻醉起效快且平穩，恢復也快[5]。研究顯示，丙泊酚不僅可調節機體免疫功能，同時具有抗癌作用，其在體外能抑制乳腺癌細胞、PLC細胞、食管癌和肺癌細胞生長和遷徙能力[6-9]。本研究旨在探討丙泊酚對行肝部分切除術治療的PLC患者外周血淋巴細胞亞群和血清腫瘤相關標志物水平的影響，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2010年2月～2014年4月我院收治的PLC患者92例，男49例，女43例；年齡41～62歲，平均年齡（50.4±6.8）歲。按照原發性肝癌規范化診治標準診斷，體質量48～73kg，平均（59.3±11.3）kg。按照美國麻醉醫師協會（ASA）分級：I級 50例，II級42例。納入患者無嚴重的心腎肺功能障礙，未接受過化療和放療治療，近期未使用過免疫抑制劑治療。排除有飲酒史、近期感染、存在免疫缺陷、精神障礙患者。采用隨機數字表法將患者分成兩組，兩組性別、年齡、體質量等一般資料比較無顯著性差異（P＞0.05），具有可比性。本研究經本院醫學倫理委員會批準，患者給出知情同意書。

1.2 麻醉與手術方法 術前8 h，常規禁食禁飲，開放靜脈通道，監測心率、體溫、血氧飽和度、腦電雙頻指數和心電圖等。在異氟醚組，行氣管插管，采用呼吸機輔助呼吸，給予3%異氟醚 2 μg·kg-1、芬太尼 0.1mg·kg-1、咪唑安定 0.1mg·kg-1和維庫溴銨0.1mg·kg-1誘導麻醉，接著給予4%異氟醚維持麻醉；在丙泊酚組，給予丙泊酚2mg·kg-1、芬太尼2 μg·kg-1、咪唑安定 0.1mg·kg-1、維庫溴銨 0.1mg·kg-1誘導麻醉，再給予丙泊酚5～6mg·kg-1·h-1靜脈泵入，維持麻醉。在麻醉滿意后，兩組均行肝葉切除術。

1.3 觀察指標 使用貝克曼庫爾特Vi-CELL XR流式細胞儀檢測外周血CD3+、CD4+、CD8+細胞百分比和CD4+/CD8+細胞比值；采用酶聯免疫吸附法檢測E-鈣蛋白（e-cadherin，EC）、血管內皮生長因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）、基質金屬蛋白酶（matrix metalloproteinase，MMP）水平（上海吉泰依科賽生物科技有限公司）；觀察兩組患者不良反應以及3 a生存率。

1.4 統計學分析 應用SPSS20.0統計軟件分析數據，計數資料以百分數（%）表示，行x2檢驗，計量資料以（±s）表示，行t檢驗。P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組外周血T淋巴細胞亞群的變化比較 在手術麻醉前，兩組外周血CD3+、CD4+、CD8+細胞百分比和CD4+/CD8+細胞比值無顯著性差異（P＞0.05）；術后1 d，丙泊酚組血CD3+和CD4+細胞百分比均顯著高于異氟醚組（P<0.05，表1）。

2.2 兩組患者血清腫瘤相關標志物比較 在麻醉前，兩組血清EC、VEGF和MMP水平無顯著性差異（P＞0.05）；術后 14 d，丙泊酚組血清 EC、VEGF 和MMP水平均顯著低于異氟醚組（P＜0.05，表2）。

表1 兩組外周血T淋巴細胞亞群（±s）的變化

表1 兩組外周血T淋巴細胞亞群（±s）的變化

與異氟醚組比，①P<0.05

例數CD3+（%）CD4+（%）CD8+（%）CD4+/CD8+細胞比值丙泊酚組 麻醉前 46 60.7±5.0 39.8±4.6 25.6±3.4 1.6±0.4術后1 d 46 56.3±4.8① 36.8±5.7① 24.3±2.7 1.4±0.3異氟醚組 麻醉前 46 60.9±5.1 39.7±4.4 25.6±3.4 1.6±0.3術后 1 d 46 52.5±4.5 34.2±4.2 24.4±2.7 1.4±0.3

表2 兩組血清腫瘤相關標志物（±s）比較

表2 兩組血清腫瘤相關標志物（±s）比較

與異氟醚組比，①P<0.05

例數 EC（ng/ml） VEGF（pg/ml） MMP（ng/L）丙泊酚組 麻醉前 46 2628.4±184.6 411.8±71.3 128.7±12.7術后14 d 46 1763.3±112.7① 201.9±36.9① 32.4±4.2①異氟醚組 麻醉前 46 2632.5±188.5 408.2±70.6 129.0±12.9術后14 d 46 2318.1±153.9 369.9±56.8 72.5±7.2

表3 兩組不良反應[n，(%)]比較

2.3 兩組患者不良反應比較 丙泊酚組白細胞下降發生率顯著低于異氟醚組（P＜0.05，表3）。

2.4 兩組預后情況比較 兩組術后3 a生存率無顯著性差異（P>0.05，表4）。

表4 兩組生存 [n，(%)]情況比較

3 討論

PLC作為我國發病率和死亡率較高的惡性腫瘤，常伴有免疫促進因子表達水平降低，免疫功能下降等現象[10]。手術為根治PLC患者最為有效的方法，但手術介入以及麻醉藥物的應用會進一步抑制機體免疫功能，增加術后并發癥和腫瘤復發的可能性。因此，選擇合適的麻醉藥物用于手術，能最大限度地減輕對免疫功能的不良影響，可有效改善患者術后預后。丙泊酚是一種外科手術常用的麻醉藥，具有起效快、蘇醒迅速、鎮靜效果好、作用時間短等優點。除此之外，它還有抗氧化、抗焦慮、止吐和神經保護等非麻醉作用[11-14]。近些年，有文獻報道丙泊酚在體外對食管癌、宮頸癌、肺癌等細胞具有直接的抑制作用[15]。在PLC細胞體外實驗，發現丙泊酚通過誘導HepG2細胞凋亡，下調MMP9蛋白表達水平，抑制PLC細胞生長和侵襲能力[16]。

免疫功能是機體發揮抵抗疾病能力的重要防線，T淋巴細胞亞群作為免疫系統最重要的細胞群，能維持機體正常的免疫功能[17]。根據細胞表面標志不同，將T細胞分為CD4+T細胞亞群和CD8+T細胞亞群。CD3+細胞參與T細胞激活的早期過程，可反映T淋巴細胞成熟情況。CD4+細胞參與細胞因子分泌和表面分子表達，可調節免疫反應的強弱和免疫啟動過程。CD8+細胞是細胞毒性T淋巴細胞，其比例過多可抑制機體的免疫反應，CD4+和CD8+細胞在正常機體內保持一定的平衡。當CD4+/CD8+比值下降時，表示免疫功能降低[18-20]。本研究在給PLC患者進行手術時采用丙泊酚和異氟醚麻醉，結果兩組外周血CD3+、CD4+細胞百分比和CD4+/CD8+比值變化略有不同，丙泊酚麻醉對患者的免疫功能的影響相對較低，提示手術和麻藥對機體免疫系統有一定的影響，但丙泊酚較異氟醚影響小，與有關研究結果一致[21]。

EC是鈣依賴性跨膜蛋白，參與細胞形態的維持、細胞運動以及細胞粘附性調節，大多數研究表明，EC水平與惡性腫瘤細胞的侵襲、轉移和分化程度成正相關。VEGF是血管生成和發生的調控因子，通過作用于糖基化的內皮細胞有絲分裂，增強血管通透性、促進細胞轉移，是評價腫瘤細胞轉移的重要指標。MMP包括MMP1-26，是一類鋅、鈣離子依賴性肽鏈內切酶家族，參與細胞外基質蛋白的降解過程，使受到腫瘤細胞侵襲的組織屏障受到損害，促進腫瘤細胞的轉移[22，23]。可見，EC、VEGF 和 MMP均與腫瘤細胞的轉移密切相關，是惡性腫瘤細胞轉移能力的血清標志物。本研究在丙泊酚組患者術后14d，血清EC、VEGF和MMP水平顯著低于麻醉前和異氟醚組，說明丙泊酚可有效抑制EC、VEGF和MMP等腫瘤相關標志物表達。研究指出，丙泊酚可抑制食管癌細胞增殖和遷移，其作用機制為下調ERK-VEFG/MMP-9信號通路[24-27]，支持本文的觀察結果。另外，丙泊酚組患者白細胞下降22例（47.8%），顯著低于異氟醚組的32例（69.6%），差異具有統計學意義，提示丙泊酚對免疫功能的影響相對較小，或許丙泊酚能保護機體的免疫功能，抑腫瘤細胞的侵襲和轉移[28-32]。

綜上所述，丙泊酚可通過減輕對外周血CD3+、CD4+細胞百分比和CD4+/CD8+比值的影響，降低手術對患者免疫功能的抑制作用，并通過下調血清EC、VEGF和MMP水平，抑制腫瘤細胞轉移的可能，從而達到即治療了肝癌患者，又最大限度地不影響患者的抗病能力，改善患者預后。尤其對于術前外周血白細胞減少的PLC患者，使用丙泊酚麻醉較異氟醚可能更安全可靠。