參黃養陰膠囊質量標準研究

陳奇 姜英子 徐雅娟 解生旭 劉悅 寶艷儒

【摘 要】 目的：建立參黃養陰膠囊的質量控制方法。方法：采用高效液相色譜-蒸發光散射檢測（HPLC-ELSD） 法，色譜柱為島津VP-ODS色譜柱（4.6 mm×150 mm，5μm），流動相為乙腈-水（32∶68），流速為1 mL/min，柱溫為30 ℃；ELSD檢測器參數為漂移管溫度105 ℃，氣體流量2.8 L/min。結果：黃芪甲苷的線性范圍為0.4024～12.8768 μg（r = 0.999），平均加樣回收率為98.67%（RSD=0.87%），精密度實驗RSD為2.20%，穩定性實驗RSD為1.65%，重現性實驗RSD為3.90%。結論：該測定方法簡便、快速、重現性好，可用于參黃養陰膠囊中黃芪甲苷含量的測定。

【關鍵詞】 參黃養陰膠囊；質量控制；黃芪甲苷；HPLC-ELSD 法；含量測定

【中圖分類號】R284.1 【文獻標志碼】 A【文章編號】1007-8517（2018）13-0025-03

Abstract：Objective To establish the quality standard of Shenhuangyangyin capsule. Methods The HPLC - ELSD method was used for the detection of hplc-elsd， and the column of chromatographic column was the iso-jp-ods column （4.6 mm×150 mm，5 μm）， and the flow phase was acetonitrile-water （32∶68）. The flow rate was 1 mL/min， and the column temperature was 30. The ELSD detector parameter is the drift tube temperature 105， and the gas flow rate is 2.8 L/min.Result The linear range of astragaloside iv was 0.4024～12.8768 μ g （r= 0.999）. the average recovery of astragaloside iv was 98.67 % （RSD= 0.87 %）， RSD of precision experiment was 2.20 %， RSD of stability experiment was 1.65 %， RSD of reproducibility experiment was 3.90 %.Conclusion this method has the characteristics of simple and rapid reproducibility， and can be used to determine the content of astragaloside in shenhuang yangyin capsule and the method can effectively control the quality of shenhuang yangyin capsule.

Keywords：Shenhuangyangyin Capsule； Quality Control； Astragaloside iv； HPLC - ELSD Method； Content Determination

參黃養陰膠囊主要由人參、黃芪、黃精、麥冬、丹參、苦參、甘草等7味中藥組成，具有益氣養陰，活血化瘀的功效，用于氣陰兩虛兼血瘀證冠心病的輔助治療[1-6]。其制法為人參、丹參粉碎成粗粉，其余黃芪等五味加水煎煮三次即得。黃芪為方中君藥之一，具有補氣升陽，行滯通痹之功效[7]，黃芪甲苷為其主要成分。研究采用HPLC - ELSD 法測定參黃養陰膠囊中黃芪甲苷的含量，為參黃養陰膠囊的質量控制提供參考。

1 儀器與材料

1.1 儀器 島津2010C高效液相色譜儀（Alltech ELSD 2000ES檢測器）；METTLER AG245 十萬分之一天平。

1.2 材料 對照品丹參酮ⅡA、黃芪甲苷、苦參堿、人參皂苷Rb1、人參皂苷Re、人參皂苷Rf人參皂苷Rg1、甘草酸單銨鹽購自中國藥品生物制品檢定所；對照藥材麥冬、黃精購自中國食品藥品檢定研究院；試驗中所用乙腈、甲醇均為色譜純，水為雙蒸水自制，其它試劑均為分析純；參黃養陰膠囊由吉林吉爾吉藥業有限公司提供。

2 方法與結果

2.1 色譜條件 采用島津VP-ODS色譜柱（4.6×150 mm，5 μm）；流動相：乙腈-水（32∶68）；流速：1 mL/min；柱溫：30 ℃；ELSD參數：漂移管溫度105 ℃，氣體流量2.8 L/min。

2.2 對照品溶液制備 取黃芪甲苷對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1 mL含黃芪甲苷0.2 mg的對照品溶液。

2.3 供試品溶液制備 取本品5 g，精密稱定，加甲醇50 mL，加熱回流2 h，提取液回收溶劑并濃縮至干，殘渣加水50 mL，微熱使溶解，用水飽和正丁醇振搖提取5次，每次50 mL，合并正丁醇液，用氨試液充分洗滌3次，每次50 mL，棄去氨液，正丁醇液蒸干，殘渣加甲醇溶解，轉移至10 mL容量瓶，加甲醇至刻度，搖勻即得。

2.4 線性及范圍 精密吸取對照品溶液2、4、8、16、32、64 μL，按“2.1項”的方法進樣分析，測定其峰面積。以黃芪甲苷進樣量和峰面積的Log值為橫、縱坐標，繪制標準曲線，并進行線性回歸計算。經計算，回歸方程為y=1.880x+4.974，相關系數r=0.999，線性范圍為0.4024～12.8768 μg。結果顯示，在線性范圍內，其對數值和峰面積對數值呈良好線性關系。

2.5 精密度考察 精密吸取上述同一對照品溶液，連續進樣6次，記錄黃芪甲苷峰面積，計算其RSD值為2.20%，說明儀器精密度良好。

2.6 穩定性考察 取根據“2.3項”下方法制得的同一供試品溶液，于0、2、4、6、8h下測定，記錄黃芪甲苷峰面積，計算RSD值為1.65%，表明8 h內黃芪甲苷穩定性較好。

2.7 重復性考察 稱取同一批供試品6份，精密稱定，按“2.3項”下方法制成供試品溶液，按“2.1項”色譜條件進樣分析，測定其峰面積，計算黃芪甲苷的含量，得RSD值為3.90%。表明該方法重復性良好。

2.8 準確度試驗 取同一批供試品6份，精密稱定，加入一定量對照品，按“2.3項”下方法制成供試品溶液，并進行分析，計算加樣回收率，黃芪甲苷的平均回收率為98.67%，RSD為0.87%，證明以上方法準確度良好，符合要求。

2.9 樣品含量測定 取三批樣品，每批各2份，按“2.3項”下方法制成供試品溶液，按“2.1項”的方法進樣分析，計算黃芪甲苷的含量，結果見表2。

3 討論

對于參黃養陰膠囊處方中七味中藥進行定性鑒別后，結果顯示丹參、黃芪、苦參、人參薄層鑒別具有專屬性，麥冬、黃精、甘草薄層鑒別不具有專屬性，所以本研究建立了參黃養陰膠囊中所含的4味中藥材的薄層色譜鑒別方法，為參黃養陰膠囊的質量控制提供參考。

由于中藥復方的成分多樣且復雜，待測的目標成分經常會受到一些其他雜質的干擾，使觀察到的結果不清晰，因此，應選擇合適的處理方法，既能保證結果清晰，又能去除背景干擾，如黃芪的供試品制備時，水飽合正丁醇萃取后，又用正丁醇飽和的0.3 mol/L氫氧化鈉溶液提取3次，再以正丁醇飽和的水洗滌至中性，后又通過D101型大孔吸附樹脂柱，得到供試品溶液。

在黃芪甲苷供試品溶液的制備中，先后考察了不同的提取方法（超聲提取方法、加熱回流提取方法和索氏提取方法）發現加熱回流方法黃芪甲苷損失較少，方法操作簡便。供試品去除雜質干擾的方法考察了萃取與大孔樹脂洗脫的方法，發現萃取方法較為適合。

《中華人民共和國藥典》中黃芪含量測定采用的流動相為乙腈-水（32∶68），按藥典流動相色譜峰分離效果均好，無干擾，故選其作為含量測定流動相。

參考文獻

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