三陰性乳腺癌患者的臨床特征、預后及藥物敏感度蛋白表達情況

張志強，全昌銀，胡鵬，杜志勇

宜昌市第一人民醫院暨三峽大學人民醫院1甲乳科，2普外科，3門診部，湖北 宜昌4430000

三陰性乳腺癌（triple-negative breast cancer，TNBC）與其他類型乳腺癌相比，具有發病率高、發病早、治療難、易復發及預后差的特點[1]。TNBC是一種不表達人表皮生長因子受體2（human epidermal growth factor receptor 2，HER2）、孕激素受體（progesterone receptor，PR）和雌激素受體（estrogen receptor，ER）的乳腺癌[2]。近年來，隨著 TNBC 發病率的不斷增加，臨床越來越重視其臨床特征、治療方案的選擇及臨床預后的研究[3]。目前，TNBC的治療僅限于化療，但療效不明顯，患者治療后的轉移率和局部復發率較高，預后欠佳[4]。本研究對宜昌市第一人民醫院收治的TNBC和非TNBC患者的臨床特征、預后及藥物敏感度蛋白表達情況進行比較分析，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2012年4月至2017年4月在宜昌市第一人民醫院接受治療的乳腺癌患者221例，并搜集其存檔的乳腺癌組織標本。其中TNBC患者63例，作為觀察組；非TNBC患者158例，作為對照組。納入標準：①均經組織病理學檢查確診為乳腺癌；②術前均未接受放化療；③病歷資料保存完整；④均為女性；⑤均能獲取隨訪資料。排除標準：①病歷資料不完整；②晚期或復發乳腺癌患者；③術后未接受正規輔助化療，或接受少于6個療程的化療。收集患者的年齡、病理類型、臨床分期、組織學分級、腫瘤直徑、絕經狀態、手術方式、乳腺癌家族史等一般資料。

1.2 免疫組織化學檢測

采用免疫組織化學SP法測定兩組患者乳腺癌組織中拓撲異構酶Ⅱ（topoisomeraseⅡ，TOPOⅡ）、β-微管蛋白Ⅲ（β-tubulin Ⅲ）、p53、Ki-67和E-cadherin的表達情況。石蠟切片脫蠟水化，制成4～5 μm厚切片，放入Citrate緩沖液，在微波中中火煮沸10 min，用蒸餾水沖洗冷卻后，30 ml/L過氧化氫浸入5 min，經蒸餾水沖洗后，再用磷酸鹽緩沖液（phosphate buffer saline，PBS）沖洗。加入一抗，孵育30 min后，用PBS沖洗3次，每次約2 min，加入二抗En-Vision孵育30 min后，與加入一抗相同，用PBS沖洗后，加DAB顯色，用蘇木精對比染色。以PBS為陰性對照，以陽性切片為陽性對照。

1.3 隨訪方法

采用門診復查、電話回訪等方式對出院患者進行隨訪。隨訪內容包括患者乳腺癌轉移、生存和復發情況。

1.4 統計學分析

采用SPSS 19.0統計軟件對數據進行分析。計量資料采用均數±標準差（±s）表示，兩組間比較采用t檢驗；計數資料以率（%）表示，組間比較采用χ2檢驗；采用Kaplan-Meier法繪制生存曲線，組間比較采用Log-rank檢驗。以P﹤0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 臨床特征的比較

觀察組和對照組患者的年齡、絕經狀態、腫瘤直徑、病理類型和手術方式比較，差異均無統計學意義（P﹥0.05）；觀察組中有乳腺癌家族史、臨床分期為Ⅲ期、有淋巴結轉移及組織學分級為Ⅲ級的患者所占比例均高于對照組，差異均有統計學意義（P﹤0.05）。（表1）

2.2 TOPOⅡ、 β-tubulinⅢ、 p53、Ki-67和E-cadherin表達情況的比較

觀察組患者乳腺癌組織中TOPOⅡ的陽性表達率明顯低于對照組，β-tubulinⅢ的陽性表達率明顯高于對照組，差異均有統計學意義（P﹤0.01）；觀察組和對照組患者乳腺癌組織中p53、Ki-67、E-cadherin的陽性表達率比較，差異均無統計學意義（P﹥0.05）。（表2、圖1）

表1 兩組患者臨床特征的比較

表2 兩組腫瘤組織中TOPOⅡ、 β-tubulinⅢ、 p53、Ki-67、E-cadherin陽性表達情況的比較[ n（%）]

圖1 觀察組與對照組TOPOⅡ、 β-tubulinⅢ陽性表達情況（免疫組化染色，×100）

2.3 生存情況的比較

觀察組患者的中位總生存時間和中位無進展生存時間均短于對照組，差異均有統計學意義（χ2=26.705、27.190，P﹤0.05）。（圖2、圖3）

圖2 觀察組與對照組患者的總生存曲線

圖3 觀察組與對照組患者的無進展生存曲線

3 討論

TNBC是一種特殊類型的乳腺癌，據報道，TNBC的平均發病年齡約為53歲，低于非TNBC[5]。TNBC患者的組織學分級較高，且在絕經前發病，對于臨床判斷有積極意義。TNBC缺乏HER2/neu靶基因的表達以及相應的激素受體，因此無法對其進行靶向治療和內分泌治療[6]。TNBC對內分泌治療不敏感，且常用的分子靶向藥物對其針對性較差，導致患者的總體預后較差，關于進一步改善TNBC的預后效果需要進行深入研究[7]。TNBC有著獨特的生物學行為，對其化療敏感度的分析是化療研究的熱點問題。越來越多的學者開始研究TNBC并針對其臨床治療策略、臨床生物學和分子生物學的特征進行深入研究[8]。乳腺癌的靶向治療越來越受到重視，鉑類藥物治療是目前TNBC患者腫瘤切除術后最常用的治療方法[9]。TNBC患者與非TNBC患者相比，治療后更易出現遠處轉移和復發，這也是TNBC患者治療失敗并最終死亡的重要原因[10]。有研究表明，TNBC患者的臟器轉移率高于非TNBC患者，且肺部和腦轉移率也較非TNBC患者高，但骨轉移率較非TNBC患者低[11]。本研究結果顯示，觀察組患者的中位總生存時間和中位無進展生存時間均短于對照組（P﹤0.05）；且觀察組中有乳腺癌家族史、臨床分期為Ⅲ期、有淋巴結轉移及組織學分級為Ⅲ級的患者所占比例均高于對照組（P﹤0.05），表明TNBC患者的乳腺癌家族史會增加其患病的風險。

TOPOⅡ參與DNA的復制，是與細胞增殖相關的一類酶，是嘧啶拮抗劑、蒽環類以及氟尿嘧啶等多種化療藥物的靶點[12]。TOPOⅡ主要存在于S期細胞，其表達率降低導致藥物靶向作用的位點減少，使藥物的作用效果下降，進而影響TNBC化療的敏感度，甚至可引起腫瘤細胞耐藥。TOPOⅡ在細胞內的表達率越高，以TOPOⅡ為靶點的化療藥物的敏感度越高，TOPOⅡ的表達情況與患者的腫瘤大小和局部分期具有一定的相關性，與腫瘤的遠處轉移和淋巴結轉移相關[13]。本研究結果顯示，觀察組患者乳腺癌組織中TOPOⅡ的陽性表達率明顯低于對照組（P﹤0.01），表明TNBC患者腫瘤組織內TOPOⅡ陽性表達率下降更為明顯，藥物的敏感度更低，影響了化療藥物對腫瘤細胞的殺傷能力。

β-tubulinⅢ與肺癌、前列腺癌、乳腺癌、卵巢癌等一些實體腫瘤的預后具有一定的相關性。β-tubulinⅢ與腫瘤細胞紫杉醇耐藥性的獲得密切相關，是紫杉醇的靶向作用位點[14]。有研究顯示，βtubulinⅢ的表達水平變化會影響紫杉醇的化療敏感度，導致治療效果下降，β-tubulinⅢ高表達與腫瘤細胞紫杉醇耐藥有關[15]。本研究結果顯示，觀察組患者乳腺癌組織中β-tubulinⅢ的陽性表達率高于對照組（P﹤0.05），表明TNBC患者β-tubulinⅢ的表達率高于非TNBC患者，可導致TNBC患者體內腫瘤細胞的耐藥性增強，影響患者的治療效果，可能會引起預后不良。

綜上所述，臨床可根據TNBC患者體內TOPOⅡ、β-tubulinⅢ的表達水平判斷患者的臨床治療效果及預后情況。