兩種白細胞稀釋液在白細胞計數中的應用

胡 燕，劉 文，彭 濤

白細胞是機體防御系統的重要組成部分,在正常情況下,維持著一定的數量。隨著病情病理的變化,如血液、腦脊液、胸腹、尿液等常會發生數量和質量的改變。臨床上常根據白細胞的變化來查找原因,了解病情,判斷疾病好轉或惡化及療效等。白細胞計數(whitebloodcellcount，WBC)是指單位體積血液中所含的白細胞數目。對于白細胞計數的方法主要有兩種，一種是血細胞自動計數儀，另一種是手工計數法。本實驗則是著重研究手工計數法中的稀釋計數法。即將一定倍數稀釋的混勻血液滴入具有固定體積和精密劃分刻度的改良牛鮑計數板中，在顯微鏡下對所選區域中的細胞進行計數，再乘以稀釋倍數，將其轉換成單位體積內的細胞數[1]。白細胞顯微鏡下手工計數在檢驗大專、本科專業中是必須掌握的技能之一，也是儀器計數的理論基礎[2]。因此，掌握白細胞的手工計數也是非常必要的。白細胞顯微鏡計數常用2%冰醋酸作為稀釋液，但白細胞總數會隨著放置時間延長，而使結果呈進行性降低。1%草酸銨對紅細胞及有核紅細胞都有很強破壞作用而不破壞白細胞，并且能使白細胞輕微膨脹，使白細胞體積變大，有利于觀察計數，故理論上也可作為白細胞稀釋液。本文擬采用兩種白細胞稀釋液做對比較，探討兩種稀釋液對白細胞計數是否存在差異。

1資料與方法

1.1一般資料 隨機收集臨床EDTA-K2血常規標本21例。

1.2檢測方法 取20ul全血分別加入0.38ML的1%草酸銨和2%冰醋酸稀釋中，待紅細胞充分破壞后充池改良牛鮑計數板中，靜置5分鐘后在低倍鏡下計數，計數池內四角4個大方格內白細胞總數，壓線細胞數上不數下，數左不數右。然后進行儀器計數，并轉化為每升標本中的細胞數。各標本兩種稀釋液平行測定3次取平均值。稀釋比例及方法按照《臨床檢驗操作規程》[3]執行。儀器法采用邁瑞5800，及其配套質控和試劑進行測定。

2結 果

表1 兩種不同稀釋液方法對21例患者白細胞計數結果(±s)比較

由表可見，1%草酸銨為稀釋液的計數結果無論手工法還是儀器法，均略高于2%冰醋酸為稀釋液的計數結果，但兩者沒有統計學差異。

3討 論

傳統的白細胞稀釋計數法不僅僅用于血液，腦脊液、胸腹水、尿液等體液也經常使用，且其測定結果被視為“金標準”。隨著醫學科技的不斷發展，各種血細胞計數的自動化儀器被發明并不斷升級，由于儀器法檢測具有高靈敏度、高重復性、客觀、準確及多參數等優點，越來越在臨床所普及。但儀器畢竟不能完全取代傳統的計數方法。以尿沉渣檢查為例，高效、快捷的尿沉渣分析儀逐步取代了傳統的顯微鏡檢查[4]。然而，近年來有不少臨床報道證實尿沉渣分析儀對某些成分不能做出正確的判斷，以致醫師做出錯誤的結論[5]。臨床上，動態觀察疾病的發展和治療依賴于精準的定量報告[6]。目前，在顯微鏡下利用手工對細胞來計數依然是最可靠的檢查手段，也是最重要的參考方[7]。《全國臨床檢驗操作規范》規定的白細胞計數的標準方法為冰醋酸溶解計數法。基于本實驗目的的特殊性是比較兩種稀釋液用于白細胞計數的可行性，故參考值需選用自動化分析儀對樣本中白細胞水平進行定標操作[8]。我們的研究結果顯示，1%草酸銨作為白細胞計數稀釋液同樣可行。1%草酸銨與2%冰醋酸在白細胞計數上，無論儀器法還是手工法，兩者計數結果沒有統計學差異。除了臨床工作外，在檢驗專業實驗教學中白細胞計數作為重要的實驗項目，也可以開展草酸銨稀釋計數法。同時我們應該注意到，1%草酸銨稀釋液計數結果略高于2%冰醋酸稀釋液，但兩者沒有統計學差異，這有可能是和樣本量太少有關，也有可能是放置時間延長，而使結果呈進行性降低，與文獻報道基本一致[9]。因此，1%草酸銨與2%冰醋酸作為白細胞計數的稀釋液，在檢驗工作和臨床教學中可以通用。