40%聯苯肼酯·乙螨唑懸浮劑的高效液相色譜分析

潘 靜，東 琴，高敬雨，劉潤峰

(北京明德立達農業科技有限公司，北京 102206)

聯苯肼酯(bifenazate)是聯苯肼類殺螨劑，純品外觀為白色固體結晶[1]。該劑系M.A.Dekeyser等于1996年報道，由Uniroyal公司發現并由Uniroyal公司和Nissan公司聯合開發，于2000年上市。聯苯肼酯是一種新型選擇性葉面噴霧用殺螨劑。該劑作用機制為對螨類的中樞神經傳導系統的一種 γ-氨基丁酸(GABA)受體有獨特作用。該劑對螨的各個生活階段有效，具有殺卵活性和對成螨的擊倒活性(48～72 h)，持效期長達14 d左右，推薦使用劑量范圍內對作物安全[1,2]。乙螨唑(etoxazole)化學名稱：(RS)-5-叔丁基-2-[2-(2,6-二氟苯基)-4,5-二氫-1,3-噁唑-4-基]苯乙醚，是日本八洲化學公司于1994年開發的新穎噁唑類觸殺型殺螨劑，可抑制螨正常蛻皮過程并具有殺卵活性，能有效控制螨的整個幼齡期(卵和若螨)，此外還對雌性成螨有不育作用[4]。乙螨唑是具有特殊結構的殺螨劑，對卵及幼螨有卓效，主要具有觸殺作用，持效期長[5]。該劑高效、低毒和對非靶標生物安全，符合當今綠色殺蟲劑的要求[6]。

1 試驗部分

1.1 儀器和試劑

儀器：Agilent 1260高效液相色譜儀；紫外檢測器；Agilent色譜工作站；色譜柱：150 mm×4.6 mm(i.d.)不銹鋼柱，內裝ZORBAX SB-C18填充物，粒徑5 μm；超聲波清洗器；過濾器：過濾膜孔徑0.45 μm。乙腈：色譜純；水：新蒸二次蒸餾水；聯苯肼酯標準品≥98.0%；乙螨唑標準品≥99.0%(兩者均由北京明德立達農業科技有限公司提供)；40%聯苯肼酯·乙螨唑懸浮劑(25%聯苯肼酯+15%乙螨唑，北京明德立達農業科技有限公司研制)。

1.2 色譜操作條件

流動相：乙腈∶水＝80∶20(體積比)；檢測波長：220 nm；流速：1.0 mL/min；進樣體積：5 μL；柱溫：(25±2) ℃。在上述色譜操作條件下，聯苯肼酯的保留時間約為2.6 min；乙螨唑的保留時間約為7.0 min。典型的液相色譜圖如下見圖1、圖2。

圖1 聯苯肼酯、乙螨唑標準樣品的高效液相色譜圖

圖2 40%聯苯肼酯·乙螨唑懸浮劑的高效液相色譜圖

1.3 溶液配制

1.3.1 標樣溶液的配制

分別稱取聯苯肼酯標樣15 mg、乙螨唑標樣9 mg(精確至0.000 02 g)，置于50 mL容量瓶中，加入適量乙腈溶解，流動相定容，搖勻后備用。

1.3.2 試樣溶液的配制

準確稱取試樣60 mg (精確至0.000 02 g)，置于50 mL容量瓶中，加入適量流動相溶解并定容、搖勻后，過0.45 μm有機系濾膜，備用。

1.4 測定

在上述色譜條件下，待儀器基線穩定后，連續注入數針標樣溶液，計算各針相對響應值，直至相鄰2針聯苯肼酯(乙螨唑)響應值相對變化小于1.5%時，按照標樣溶液、試樣溶液、試樣溶液、標樣溶液的順序進行測定。用外標法計算各自含量。

1.5 計算

將測得的2針試樣溶液以及試樣前后2針標樣溶液中的聯苯肼酯(乙螨唑)峰面積分別進行平均。試樣中聯苯肼酯(乙螨唑)的質量分數X(%)按下式計算：

式中：A1——標樣溶液中，聯苯肼酯(乙螨唑)峰面積的平均值；A2——試樣溶液中，聯苯肼酯(乙螨唑)峰面積的平均值；m1——聯苯肼酯(乙螨唑)標樣的質量，單位為克(g)；m2——試樣的質量，單位為克(g)；P——標樣中聯苯肼酯(乙螨唑)的質量分數，%。

1.6 允許差

兩次平行測定結果之差，聯苯肼酯、乙螨唑分別應不大于0.5%、0.3%，取其算術平均值，作為測定結果。

2 結果與討論

2.1 檢測波長的選擇

通過UV-1800型紫外可見分光光度計分別對聯苯肼酯和乙螨唑標樣溶液進行紫外掃描，乙螨唑在200.0～230.0 nm均有紫外吸收；聯苯肼酯在204.9 nm、230.8 nm和265.0 nm處均有較大紫外吸收，考慮到低波長處紫外吸收會有溶劑或助劑的干擾，同時兼顧聯苯肼酯和乙螨唑的峰面積和峰高的差距盡量小，最終選擇220 nm作為聯苯肼酯、乙螨唑的檢測波長。

2.2 流動相的選擇

為達到聯苯肼酯和乙螨唑的有效分離，先后對甲醇和水、甲醇和冰乙酸水溶液、乙腈和水、乙腈和冰乙酸水溶液的不同體積配比進行試驗，最后發現用乙腈和水(體積比為 80∶20)做流動相，流速為1.0 mL/min時，分離效果好，出峰時間短，且峰形尖銳、對稱。綜上因素，選定乙腈+水(體積比80∶20)作為流動相。

2.3 分析方法的線性關系曲線

分別配制5組不同質量濃度的標準溶液，按上述色譜操作條件進樣分析，每個濃度分析2次，求其峰面積平均值。以聯苯肼酯質量濃度為橫坐標，峰面積平均值為縱坐標繪制標準曲線，得聯苯肼酯線性回歸方程y=20.506 0x-12.727 2，其線性關系系數 R2=0.999 5 (圖 3)；得乙螨唑線性回歸方程 y=13.350 1x+51.310 6，其線性關系系數R2=0.999 3，表明線性關系良好(圖4)。

2.4 分析方法的精密度

按上述色譜操作條件，對同一個樣品連續進行5次平行測定。測得聯苯肼酯和乙螨唑的標準偏差分別為0.14和0.11；變異系數分別為0.55%和0.72% (表1)。表明此方法的精密度能夠滿足定量分析的要求。

表1 40%聯苯肼酯·乙螨唑懸浮劑精密度測定

2.5 分析方法的準確度

為了考察分析方法的準確度，測定登品的回收率。在已知含量的40%聯苯肼酯·乙螨唑懸浮劑中加入一定量的聯苯肼酯、乙螨唑的標樣，按上述色譜操作條件進行測定，并計算回收率。測定聯苯肼酯的回收率為 98.42%～100.80%，平均回收率為99.49%；乙螨唑的回收率為98.39%～100.22%，平均回收率為99.15%(表2)。

圖3 聯苯肼酯線性關系圖

圖4 乙螨唑線性關系圖

表2 40%聯苯肼酯·乙螨唑懸浮劑準確度測定

3 結 論

上述試驗表明，40%聯苯肼酯·乙螨唑懸浮劑中有效成分質量分數的分析方法，具有較高的準確度和精密度，方法操作簡便、快速、分離好，可以滿足生登企業生登中的質量控制要求。

參 考 文 獻

[1] 曹巍, 陳高部, 關云飛等. 聯苯肼酯的高效液相色譜分析研究[J].農藥, 2011, 50(6): 424－425.

[2] 劉長令. 世界農藥大全: 殺蟲劑卷[M]. 北京: 化學工業出版社, 2012, 773－775.

[3] 肖崢. 聯苯肼酯 43%懸浮劑的高效液相色譜分析[J]. 農藥科學與管理, 2010, 31(8): 40－42.

[4] 官帥, 張樹秋, 李慧冬等. 氣相色譜-質譜法測定乙螨唑在蘋果和土壤中的殘留及消解動態[J].農藥學學報, 2015, 17(4): 480－485.

[5] 徐彥磊, 何偉娟. 阿維·乙螨唑 11%乳油高效液相色譜分析[J]. 農藥科學與管理, 2014, 35(4): 59－61.

[6] 李永強, 于秀玲, 劉玉秀等. 新型2,4-二苯基-1,3-唑啉類殺螨劑的研究進展[J]. 農藥學學報, 2014, 16( 6) : 619－634.