湖南省12個赤擬谷盜品系對磷化氫和敵敵畏抗性測定

王亞洲 劉蔓文 唐培安 陸月明 趙葉飛 馮俊

[摘要]本文針對儲糧害蟲磷化氫抗性嚴重，影響儲糧安全的現實問題，測定了湖南省12個赤擬谷盜品系的磷化氫和敵敵畏抗性水平，并對抗性分布和發展趨勢進行分析。結果表明，12個品系的磷化氫抗性系數范圍為1.7～44.4，其中8個是敏感品系，其余4個為抗性品系。對不同場所的抗性情況分析發現，酒廠、加工廠、飼料廠和農戶均有抗性品系和敏感品系，而來自糧庫的1個品系為敏感品系，表明赤擬谷盜對磷化氫的抗性水平與場所沒有顯著相關性。對赤擬谷盜敵敵畏抗性水平測定結果表明，12個品系的致死中濃度（LC₅₀）值為0.051～0.108g/L，相對敏感性水平在2.1倍以內，表明這些赤擬谷盜品系對敵敵畏的敏感性差異不大，推測其對敵敵畏的抗性水平較低。

[關鍵詞]赤擬谷盜;磷化氫;敵敵畏;抗性測定

赤擬谷盜（Triholium castaneum）屬鞘翅目（Coleplera）、擬步甲科（Tenehrionidae）、擬谷盜屬（Triholium），是一種危害性嚴重的儲糧害蟲，分布于世界各地[1]，其食性雜，可危害谷物、油料、動物性產品及加工品、中藥材等，其中面粉被害最重。除取食外，成蟲會分泌臭液，大量分泌時會產生污染，造成巨大的經濟損失[2]。磷化氫（PH₃）是一種廣泛應用于儲糧害蟲防治的熏蒸藥劑，具有穿透性強、擴散性好、殺蟲效果顯著、成本低等特點[3]。然而由于長期、單一使用磷化氫以及操作不規范等原因，儲糧害蟲對磷化氫產生了不同程度的抗性，磷化氫的殺蟲效果也因此大幅度降低[4]。敵敵畏是一種有機磷殺蟲劑，具有觸殺、熏蒸等作用，常被用作防治儲糧害蟲的空倉殺蟲劑。本文測定了采白湖南省的12個赤擬谷盜的品系對磷化氫和敵敵畏抗性水平，并分析了抗性水平與采集場所的關系，不僅為儲糧害蟲磷化氫抗性治理提供基礎數據，還為科學合理防治儲糧害蟲提供理論依據。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 供試昆蟲

供試昆蟲采白湖南省不同地區和場所，具體情況見表1。

1.1.2 儀器與試劑

恒溫恒濕培養箱（BSC-250）：上海博訊實業有限公司醫療設備廠;氣密性注射器：Hamilton公司;電熱恒溫鼓風干燥（DUG-9246A）：上海精宏實驗設備有限公司;電子分析天平：賽多利斯科學儀器有限公司;PH3氣體檢測儀：北京佳糧科貿有限公司;粉碎機：天津市泰斯特儀器有限公司;PH3發生和收集裝置：自制;濃硫酸、磷化鋅粉末、敵敵畏：南京市若研實驗器材有限公司。

1.2 方法

1.2.1 飼料準備

使用全麥粉作為飼料。將小麥洗凈后置于80℃干燥箱中消毒、烘干，干燥過程中每隔0.5h對小麥進行翻動以保證小麥水分均勻。烘干后參照GB 5497-1985《糧食、油料檢驗水分測定法》調節小麥的水分至15%±1%，用粉碎機將小麥粉碎成全麥粉，密封后放入冰箱中冷藏保存。

1.2.2 試蟲培養

從每個選定的晶系中，分別挑選數百只赤擬谷盜成蟲，將其置于裝有200g全麥粉的500mL廣口瓶中，將廣口瓶置于南京財經大學儲藏物昆蟲研究室內飼養，設定培養條件為溫度30℃±1℃，相對濕度75%，無光照。待成蟲產卵3d后，挑出全部成蟲并轉移至另一瓶飼料中繼續產卵，經過一段時間的培養后，挑選1～3周齡的羽化成蟲進行試驗。

1.2.3 磷化氫氣體發生與濃度測定

采用聯合國糧食及農業組織（FAO）[5]推薦的裝置，PH₃氣體由磷化鋅和10%硫酸反應制備而得，發生裝置見圖1。

1.2.4 磷化氫抗性測定

采用FAO推薦的磷化氫抗性測定方法，并稍做改動。通過預實驗，設定5～7個濃度梯度，使試蟲死亡率為16%-84%，設1個空白對照，每個濃度設3次重復。把50只試蟲放入熏蒸瓶，用高真空硅脂把熏蒸瓶與玻璃旋塞密封。使用相應量程的氣密性注射器抽取PH₃氣體，從熏蒸瓶上的橡膠塞注入熏蒸瓶內，輕輕搖勻，置于溫度為30℃、相對濕度為75%、無光照的培養箱中密閉熏蒸20h。熏蒸結束后在通風櫥中打開熏蒸瓶的玻璃旋塞，散氣1h后取出試蟲，給飼料飼養至少3d后，統計死亡數量，用毛筆觸碰蟲體，如果試蟲的附肢都不動即視作死亡，記錄每個濃度下試蟲的死亡數與總數。

1.2.5 敵敵畏抗性測定

參考侯毅等[6]的方法，并稍做改動。用丙酮將敵敵畏原油稀釋成不同的濃度，通過預實驗，設定5-7個濃度梯度，使試蟲的死亡率為16%-84%，用丙酮做對照實驗，每個濃度設3次重復。吸取1mL丙酮稀釋過的敵敵畏試劑，將試劑均勻地涂在直徑為9cm的培養皿中，將培養皿放置在通風處1h，待丙酮揮發之后，將30只試蟲放于培養皿中，讓其在培養皿中運動2h。將處理過的試蟲移到新的培養皿中，加入飼料，過24h，統計死亡數量，用毛筆觸碰蟲體，如果試蟲的附肢都不動即視作死亡，記錄每個濃度下試蟲的死亡數與總數。

1.3 數據處理

用SPSS 17.0軟件分析測定結果，分析得出12個品系的LC₅₀值、LC₉₉值和相應的毒力回歸方程并計算抗性系數（Rf）以及相對抗性系數。其中，抗性系數（Rf）=試蟲實際LC₅₀/敏感品系LC₅₀，相對系數=試蟲實際LC₅₀/最小LC₅₀。

2 結果與分析

2.1 赤擬谷盜磷化氫抗性測定

赤擬谷盜各品系的磷化氫抗性數據見表2。結果表明，12個赤擬谷盜品系的磷化氫抗性系數范圍為1.7-44.4，其中有8個品系是敏感品系，占調查總數的66.7%，其余4個品系為抗性品系，其中1個低抗品系、2個中抗品系、1個高抗品系，抗性品系占調查總數的33.3%。對不同場所的抗性情況分析發現，酒廠、加工廠、飼料廠和農戶均有抗性品系和敏感品系，而來自糧庫的1個品系為敏感品系，表明赤擬谷盜對磷化氫的抗性水平與場所沒有顯著相關性。與已有研究相比，本文所測定的赤擬谷盜磷化氫抗性水平不高。

2.2 赤擬谷盜敵敵畏抗性測定

12個赤擬谷盜品系的敵敵畏抗性數據見表3。結果表明，12個品系的致死中濃度（LC₅₀）值為0.051-0.108g/L，相對敏感性水平在2.1倍以內，表明這些赤擬谷盜品系對于敵敵畏的敏感性差異不大。12個赤擬谷盜品系來源于湖南省5個市5種不同的場所，推測湖南不同地區的赤擬谷盜品系對于敵敵畏的抗性水平較低，可以用敵敵畏來進行空倉熏蒸，以期達到理想的熏蒸效果。

3 結論

磷化氫作為儲糧熏蒸劑，具有成本低、效果好、施藥方便等特點，廣泛運用于儲糧害蟲防治。然而由于長期且單一地使用磷化氫，儲糧害蟲對磷化氫產生了十分嚴重的抗藥性[7]，導致磷化氫的殺蟲效果大幅度下降。曹陽等[8]對五種儲糧害蟲11個品系的磷化氫抗性進行了測定，結果表明，與敏感品系相比，赤擬谷盜抗性品系的磷化氫抗性已高達449倍，而谷蠹與米象的抗性分別達327倍與148倍。嚴曉平等[9]對我國23個省（自治區）、55個地區糧庫中的主要儲糧害蟲進行抗性測定，結果表明，低抗性蟲樣占9.8%、中抗性蟲樣占7.6%、高抗性蟲樣占13.0%、極高抗性蟲樣占15.2%。本文主要研究了湖南省5個市5種不同場所的12個赤擬谷盜品系對磷化氫的抗性數據，12個品系的磷化氫抗性系數范圍為1.7-44.4，抗性品系占調查總數的33.3%。對不同場所的抗性情況分析發現，赤擬谷盜對磷化氫的抗性水平與場所沒有顯著相關性。赤擬谷盜晶系對磷化氫的抗性數據表明，湖南省這5個市的赤擬谷盜品系對磷化氫的抗性不嚴重，磷化氫仍然可以作為防治赤擬谷盜的熏蒸劑。然而由于樣本數量較少，這些磷化氫抗性數據僅作為參考。與前人報道的赤擬谷盜抗性水平相比，本文測定的抗性水平偏低，其原因可能與樣本的采集地、采集場所、樣本經歷的磷化氫熏蒸過程有關。

敵敵畏是一種有機磷殺蟲劑，具有觸殺、熏蒸等作用，常被用作防治儲糧害蟲的空倉殺蟲劑。侯毅等[6]通過藥膜法測定了赤擬谷盜成蟲對于敵敵畏的抗性，致死中濃度（LC₅₀）為493.99mg/L。劉新等[10]測定了小麥蛾對敵敵畏的抗性，致死中濃度（LC₅₀）為618.5μg/mL。王長青等[1]研究了中華微蛾對敵敵畏的抗性，致死中濃度（LC₅₀）為98.21mg/L。勞傳忠等[2]研究了敵敵畏對小眼書虱成蟲的觸殺效果，結果表明，致死中濃度（LC₅₀）為0.344 2μg/cm²。本文主要測定了湖南省5個市的12個赤擬谷盜品系對于敵敵畏的抗性水平，12個品系的致死中濃度（LC₅₀）值為0.051-0.108g/L，相對敏感性水平在2.1倍以內，表明這些赤擬谷盜品系對于敵敵畏的敏感性差異不大，據此推測，赤擬谷盜對敵敵畏沒有產生較強的抗藥性，敵敵畏仍然可以作為儲糧空倉殺蟲的有效藥劑。

參考文獻

[1]陳艷，張紅建，謝更祥，等.海南地區赤擬谷盜抗藥性及磷化氫完全致死濃度與時間的研究[J].熱帶農業科學，2017（5）：63-66.

[2]張生芳.中國儲藏物甲蟲[M].北京：中國農業科技出版社，1998.

[3]段錦艷，吳海晶，唐培安，等.8個品系銹赤扁谷盜和谷蠹的磷化氫抗性測定[J].糧食儲藏，2016 （1）：1-4.

[4]周天智，劉士強，馬文斌，等.鄂中地區四種儲糧害蟲對磷化氫抗性發展及對策研究[J].糧食儲藏，2011 （4）：6-9.

[5] ANONYMOUS. Reconmmend methods for the detection andmeasurement of resistance of agricultural pest to pesticidesTeantative method for adulrs of some major pests of stored cerealswith methylbromide and phosphine[J].FAO Plant ProtectionBulletin，1975（10）：120-122.

[6]侯毅，靳然，王志超，等.常用殺蟲劑對赤擬谷盜成蟲和幼蟲的毒力測定[J].山西農業大學學報（自然科學版），2007 （2）：190-192.

[7]禹建輝，謝令德，沈茜，等.湖北不同地區銹赤扁谷盜磷化氫抗性比較[J].武漢工業學院學報，2013 （2）：22-25.

[8]曹陽，劉梅，鄭彥昌.五種儲糧害蟲11個品系的磷化氫抗性測定[J].糧食儲藏，2003 （2）：9-11+25.

[9]嚴曉平，周浩，沈兆鵬，等，中國儲糧昆蟲歷次調查總結與分析[J].糧食儲藏，2008 （6）：3-11.

[10]劉新，尤民生.敵敵畏、高效氯氰菊酯及其混劑對小菜蛾的毒力與藥效[J].福建農業大學學報，2000 （2）：206-209.

[11]王長青，吉志新，王長安.敵敵畏·除蟲菊提取液混配對中華微蛾的增效作用[J].安徽農業科學，2010 （5）：2438-2440.

[12]勞傳忠，冼慶，劉芳芳，等.殺蟲劑對小眼書虱成蟲的觸殺毒力[J].糧食儲藏，2007 （4）：11-12+18.