血清白細胞介素21水平與大皰性類天皰瘡無相關性

李思哲 閆天萌 李麗 晉紅中 左亞剛

100730北京，中國醫學科學院 北京協和醫學院 北京協和醫院皮膚科 協和醫學轉化中心

大皰性類天皰瘡（BP）是自身免疫性大皰性皮膚病，病理上表現為表皮下水皰形成，常有嗜酸性粒細胞（EOS）浸潤。患者外周血EOS計數、抗BP180抗體滴度與病情相關［1?2］。白細胞介素（IL）21是一種重要免疫調節因子，由多種細胞分泌，在固有免疫及適應性免疫中均發揮重要作用，尤其在幫助初始B細胞分化為漿細胞并分泌抗體中作用更明顯［1］。許多研究發現，其在系統性紅斑狼瘡、炎癥性腸病等自身免疫性疾病患者外周血中明顯升高，IL?21與BP相關性研究報道較少。我們用酶聯免疫吸附試驗（ELISA）檢測BP患者血清IL?21與抗BP180抗體、EOS的關系。

圖1 大皰性類天皰瘡患者血清IL-21與抗BP180抗體、嗜酸性粒細胞絕對值、大皰性類天皰瘡疾病面積指數（BPDAI）的相關性

一、對象與方法

1.對象：2016年3月至2017年4月在北京協和醫院皮膚科門診收集初診并且最終診斷為BP的50～80歲患者，排除患有腫瘤、其他自身免疫性疾病或急性感染的患者。共收集BP患者31例，年齡50～80（68.39±9.160）歲，男11例，女20例；健康對照組31例，年齡50～ 80（64.55± 7.536）歲，男14例，女17例。兩組年齡、性別差異無統計學意義（均P＞0.05）。31例BP患者組織病理均表現為表皮下水皰形成，皰液中有EOS浸潤，直接免疫熒光（基底膜帶線狀IgG、IgM或C3沉積）、間接免疫熒光（血清中出現抗基底膜帶抗體）、抗BP180抗體指標中任意2項陽性。本研究經北京協和醫院倫理委員會批準，受試者均簽署知情同意書。

2.試劑、儀器及方法：IL?21 ELISA試劑盒（英國Abcam公司），抗BP180抗體檢測試劑盒（日本MBL公司），Varioskan Flash多功能酶標儀（美國賽默飛世爾科技公司）。

收集BP患者及健康對照靜脈血4Ml，分離血清置-80℃冰箱保存待測。用ELISA檢測血清IL?21及抗BP180抗體水平，按照試劑盒說明書進行，酶標儀讀取450 nm吸光度，根據標準曲線計算IL?21及抗BP180抗體含量。31例BP患者中，27例行全血細胞計數，其中男13例，女14例。根據皮膚、黏膜各區域皮損類型、數目及患者主觀瘙癢程度，詳細記錄13例患者BP疾病面積指數（BPDAI）分值。

3.統計學分析：用SPSS20.0統計學軟件分析。兩組計數資料比較用卡方檢驗。計量資料以M（P25～P75）表示，組間比較采用Mann?whitney檢驗，相關性分析采用Spearman檢驗，相關系數＞0.7為較強相關，0.4～0.7為中度相關，0.1～0.3為弱相關，P＜0.05為差異有統計學意義。

二、結果

1.患者組與對照組IL?21水平：患者組31例血清IL?21水平為255.28（156.19～ 361.59）ng/L，對照組31例為150.47（72.4～268.73）ng/L，兩組差異無統計學意義（P=0.14）。

2.BP患者外周血IL?21水平與抗BP180抗體相關性：31例BP患者血清IL?21水平與抗BP180抗體［82.98（26.82～132.92）U/ml］無顯著相關性（rs＝0.18，P=0.332）。見圖1。

3.BP患者外周血IL?21水平與EOS相關性：27例有EOS計數的BP患者中，血清IL?21水平［256.72（150.81～884.10）ng/L］與全血EOS絕對值［0.53（0.17～ 1.04）× 109/L］無統計學相關性（rs＝0.104，P=0.606），見圖1。

4.BP患者外周血IL?21與BPDAI相關性：13例評估BPDAI的患者中，血清IL?21水平［223.30（200.68 ～ 981.63）ng/L］與BPDAI［96（69 ～ 141）］無統計學相關性（rs＝-0.233，P=0.464）。見圖1。

三、討論

Li等［3］研究發現，BP患者血清IL?21明顯升高，且與抗BP180?NC16A抗體滴度正相關，并得出了Tfh與IL?21在BP患者抗體產生中發揮重要作用的結論。而本研究結果顯示，BP患者組與健康對照組血清中IL?21含量差異無統計學意義，IL?21與抗BP180抗體和血EOS絕對值及BPDAI均無顯著相關性。以上結果與Li等的研究結論不一致，推測原因可能有以下幾個方面：①目前對于IL?21與BP關系研究較少，無其他研究佐證本研究與Li等研究之間的矛盾；②Tfh細胞可分為Tfh?Th1、Tfh?Th2、Tfh?Th17亞群，其中IL?21主要由Tfh?Th2和Tfh?Th17分泌，而不是Tfh?Th1細胞，而在BP患者中，可能主要為Tfh?Th1，因此較少產生IL?21；③體內免疫反應中IL?21的作用是多樣的，既能促進多種免疫反應，也能抑制眾多免疫過程，IL?21在BP中發揮的作用有待進一步研究；④本研究樣本例數較少，大部分病例來自于既往就診患者，收集樣本時多已經過系統治療，不同治療方案間是否對IL?21的產生有影響尚不得而知，后續可進行更深入研究。