Mammaglobin 在子宮內膜腺癌和宮頸腺癌的表達及臨床意義

易靜，何蓉，李君怡

(江西省萍鄉市婦幼保健院病理科，萍鄉 337000)

子宮內膜腺癌和宮頸腺癌均為婦科常見的惡性腫瘤，兩者的臨床治療方法、手術方案的選擇以及臨床預后等各不相同。據統計，≤50歲年齡組子宮內膜癌患者有增高趨勢，≤40歲和＞60歲年齡組宮頸癌患者呈增高趨勢[1]。子宮內膜癌是婦科生殖道最常見的惡性腫瘤之一，其發生率約占女性生殖道惡性腫瘤的20%-30%，近年來，發病率呈持續上升趨勢[2]。宮頸腺癌是宮頸癌中除宮頸鱗癌之外最常見的一種亞型，以往在宮頸癌中所占比例較小。近年來，宮頸腺癌的發病率逐年升高，且有年輕化趨勢，因此人們對宮頸腺癌的研究越來越重視[3]。子宮內膜腺癌和宮頸原發腺癌生物學行為均可向下擴展與向上延伸，宮頸腺癌多數起源于宮頸管內膜，最常見的為頸管內膜型，它可向子宮內膜方向分化形成子宮內膜樣癌和透明細胞癌，亦可向輸卵管上皮方向分化形成漿液乳頭狀腺癌[4，5]。由此可見，兩者無論從解剖學位置還是組織學形態均無一個明確的分界及區別。然而，子宮內膜腺癌和宮頸腺癌的鑒別診斷對于臨床治療和預后的判斷具有重要的臨床意義[6，7]，因此，兩者的鑒別診斷顯得尤為重要。1996年美國學者Mark A Watson和Timothy P Fleming[8]利用差式篩選和cDNA末端擴增（rapid amplification of cDNA ends，RACE）技術，從乳腺癌上皮細胞中克隆出一個分子量10.5kDa的分泌性差異表達蛋白，該蛋白是93個氨基酸殘基構成的多肽，其氨基酸序列與子宮珠蛋白（uteroglobin，UG）超家族同源，從而將其命名為人乳腺球蛋白。2002年Darrick Carter等的研究表明hMAM與另一種子宮珠蛋白超家族成員Lipophilin B形成共價復合物，它們在乳腺癌組織中特異表達且表達水平顯著相關[9]。Mammaglobin的生理功能不明，但UG超家族的成員全都是分泌性，少有糖基化的小分子二聚體蛋白，主要在粘膜組織中表達，結構相似，功能相近[10]。本文通過免疫組化S-P兩步法對50例子宮內膜腺癌病例和21例宮頸腺癌病例進行Mammaglobin蛋白檢測，并分析其結果，探討Mammaglobin蛋白檢測應用于子宮內膜腺癌和宮頸腺癌鑒別診斷中的臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取我院病理科2014年4月至2017年11月存檔蠟塊中抽取子宮內膜腺癌50例，患者年齡41-67歲，平均年齡53.7歲；宮頸腺癌21例，患者年齡36-80歲，平均年齡59歲。兩組中每個病例均由2名多年資且經驗豐富的病理醫師診斷。

1.2 實驗操作方法 儀器設備：不銹鋼鍋，耐高溫塑料染色架，電磁爐。所需試劑：鼠抗Mammaglobin單克隆抗體，為即用型抗體，購自福州邁新生物技術開發有限公司；酶標羊抗小鼠/兔IgG聚合物；EDTA抗原修復液，PH=9.0，蒸餾水。操作步驟：⑴前期蠟塊制作。⑴組織處理：10%中性福爾馬林緩沖液→80%乙醇→85%乙醇→95%乙醇→100%乙醇→二甲苯→石蠟。⑵組織包埋、切片。⑶脫蠟和水化：①石蠟切片置于二甲苯15min×2次；②無水乙醇浸泡3min×2次；③95%乙醇浸泡3min；④85%乙醇浸泡3min；⑤自來水沖洗1min；⑥PBS沖洗3min×3次。⑷高壓鍋開鍋后加熱EDTA抗原修復液，加熱至沸騰，將功率調至最小 （處于保溫狀態），將切片置入已沸騰的修復液中，繼續加熱20min，自然冷卻。①蒸餾水沖洗3min×2次。②PBS沖洗3min×2次。③加一抗（鼠抗Mammaglobin單克隆抗體）室溫60min。④PBS沖洗3min×2次。⑤加二抗 （酶標羊抗小鼠/兔IgG聚合物）室溫15-20min。⑥PBS沖洗3min×2次。⑦DAB顯色劑3-5min。⑧蘇木素復染10-30s、脫水、封片。⑸在顯微鏡下進行觀察，每批染色均設已知陽性及陰性對照。

1.3 結果判讀 Mammaglobin以細胞質出現棕黃色顆粒為陽性。判定標準：陽性細胞＜5%為陰性。

1.4 統計學分析 數據采用χ2檢驗，檢驗標準取P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

Mammaglobin陽性表達率在子宮內膜腺癌為72%（36/50），宮頸腺癌為 4.8%（1/21），子宮內膜腺癌Mammaglobin陽性率明顯高于宮頸腺癌，差異具有統計學意義（P＜0.05），見表 1。

表1 Mammaglobin在子宮內膜腺癌和宮頸腺癌中的表達[n（%）]

3 討論

子宮內膜腺癌占女性生殖道惡性腫瘤20%-30%，近年來發病率不斷上升，晚期癌灶可向下擴展侵及宮頸，其組織學類型主要分為子宮內膜樣腺癌、黏液腺癌、漿液性癌及透明細胞癌[11]。宮頸癌為最常見的婦科惡性腫瘤，而宮頸腺癌占宮頸癌15%-20%，極少部分宮頸腺癌可向上延伸累及子宮內膜。其組織學類型分為普通型腺癌、黏液腺癌、微偏腺癌、絨毛管狀腺癌、透明細胞癌、漿液性癌、中腎管癌和一些少見的亞型，其中普通型宮頸腺癌是最常見的組織類型，其形態類似子宮內膜腺癌，腺體形態既有宮頸內膜樣分化，又有子宮內膜樣分化[12]。因此，從癌灶發生的部位以及組織形態學方面均不能十分準確的區分子宮內膜腺癌和宮頸腺癌。近年來，免疫組織化學技術逐步發展成為臨床病理診斷不可缺少的技術手段[13]，當組織形態不能做出明確的病理診斷時，免疫組化起著至關重要的作用。經過臨床研究顯示，已經有一些免疫組化標記物被證明對兩者的鑒別診斷有一定的臨床意義，如 P16、CEA、ER 等[14，15]，但特異性及敏感性都不是特別顯著。我們需要研究并探討，是否有更特異及更敏感的免疫組化標記物能應用于兩者的鑒別診斷。由于Mammaglobin對乳腺癌的敏感性和特異性較高，已成為診斷外科病理的一種有效的免疫組織化學標志物[16-19]。有研究表明該蛋白與大鼠前列腺素蛋白具有42%的序列同一性，與兔和人的子宮分泌球蛋白家族1A成員1（SCGB1A1）具有高度同源性[20]。并且，子宮內膜癌是在Bhargava等人的研究中表達Mammaglobin最常見的非乳腺病變[20]。到目前為止，只有少數研究在惡性或良性的人體子宮內膜組織中檢測到Mammaglobin[21-24]。一項研究報告稱Mammaglobin存在于9個子宮內膜癌中的一個[16]，而另項研究報告在39個子宮內膜癌中存在30例[19]。本文研究結果顯示，50個子宮內膜癌中存在36例Mammaglobin表達陽性。不可否認，Mammaglobin應用于子宮內膜腺癌和宮頸腺癌的鑒別診斷，具有重要的臨床應用價值，盡管不是絕對特異，但仍可以作為一個重要參考指標，幫助判斷子宮腺癌的原發部位，究竟是子宮內膜來源還是宮頸來源，尤其是當子宮內膜及宮頸均有癌灶時，能夠進一步明確是子宮內膜腺癌侵及宮頸，還是宮頸腺癌累及內膜，還是雙原發癌，從而提高病理診斷的準確性，并影響患者的治療及預后，值得我們進一步研究推廣。