藍孔雀群發支原體病的診斷與治療

呂 冉 程家球 李俊嫻 余樹培

(南京市紅山森林動物園，南京，210028)

支原體(Mycoplasmaspp.)也稱霉形體，是分類上介于細菌和病毒之間的沒有細胞壁的原核生物，屬于柔膜菌綱(Mollicutes)，支原體目(Mycoplasmatales)支原體科(Mycoplasmata ceae)。雞毒支原體(MG)和滑液囊支原體(MS)是兩種重要的家禽病原[1]。國內有關禽類支原體病的文章較多，但對藍孔雀感染支原體的病例報道較少。

1 發病情況

2015年11月27日，該基地3只藍孔雀出現張口呼吸，咳嗽，流漿液性鼻液等癥狀并發出“干啰音”，糞便較稀呈黃綠色；11月30日發現2只藍孔雀死亡；12月7日發病數量孔雀增至十幾只，呼吸音明顯，偶爾發出啰音，甩頭，單獨呆立較多，吃食較少，精神狀態逐漸變差，最終死亡。2015年12月至2016年3月初群養藍孔雀張口呼吸癥狀較多，隔離藍孔雀個體食欲情況稍有好轉。3月之后，群養藍孔雀張口呼吸癥狀較少，死亡數量下降，趨于平穩。藍孔雀發病過程中的總數量及死亡率變化如圖1所示。

圖1 藍孔雀發病過程中總數量及死亡率變化Fig.1 The total number of changes and the variationof mortality in blue peacocks

2 病理解剖

對病死藍孔雀進行剖檢(圖2)，見其龍骨突出，氣管環嚴重出血；心臟表面有點狀出血點，肝臟質脆，兩側肺臟大面積化膿、壞死；氣囊壁增厚、發黃，有干酪樣滲出物；小腸黏膜脫落、糜爛出血。

(A)為2015年11月30日死亡藍孔雀解剖氣管外觀(A)Shows the trachea of dead blue peacock on November 30,2015

(B)為2015年11月30日死亡藍孔雀解剖肺臟外觀(B) Dissected lung appearance of blue peacock on November 30,2015

3 實驗室診斷

3.1 病原體分離鑒定

用無菌棉簽采取病死藍孔雀的氣管或氣囊滲出物、鼻甲骨、鼻竇的滲出物或肺組織等作為病料，置支原體液體培養基(由美國BD公司提供)過濾器除菌之后，37℃培養5～7 d待培養基顏色變黃，立即接種至固體培養基(由美國BD公司提供)上培養3～4 d，如果顏色沒變化，每隔3 d傳1次，及吸取培養液到支原體液體培養基上，共傳3代，培養10 d后接種至固體培養基上培養。可在固體培養基上觀察到中央凸起呈荷包蛋樣的菌落[2]。將初步分離得到的病原菌送至南京天邦生物科技有限公司進行進一步做血清鑒定。

經鑒定確診藍孔雀為支原體感染。

3.2 藥敏試驗

采用MIC發進行藥敏試驗，在96空板的每孔加50 μL Frey’s肉湯；在第1孔加50 μL藥，混勻后，吸取50 μL到第2孔，依次稀釋到第11孔，吸去50 μL；每孔加濃度為103～14CFU/mL的細菌，振蕩混勻，37 ℃培養1周；觀察顏色變化情況，顏色變黃，說明藥沒有作用，不變色則藥有效果，記錄顏色開始變黃的稀釋度，報告結果[3]。

藥敏試驗結果顯示支原體對泰樂菌素、替米考星、諾氟沙星均敏感，對頭孢菌素、阿莫西林、青霉素類均不敏感。

4 治療

發病初期，將有明顯臨床癥狀的藍孔雀及時隔離到新籠舍，口服復方新諾明，0.5片/只，連用3日。此后按群養藍孔雀用藥方式治療。

使用16.0%～23.0%過氧乙酸溶液對藍孔雀內籠舍消毒，3～4次/周。將藍孔雀的外籠舍用竹網進行圍擋，控制其活動范圍；夜晚將內籠舍燈光打開，吸引藍孔雀回內籠舍，減少冬季低溫寒冷應激。

對群養藍孔雀使用復合維生素預混劑，按0.1 g/kg水補充維生素，增強抵抗力。混飼的藥物：雙黃連連喂5 d，停藥3 d；泰樂菌素飼喂2個5 d療程中間停藥3 d；恩諾沙星用藥5 d，停藥3 d；10%多西環素+20%替米考星和諾氟沙星聯合用藥5 d為1療程。之后按泰樂菌素、恩諾沙星、10%多西環素+20%替米考星和諾氟沙星順序輪換交替使用，5 d為1療程，中間停藥3 d。

經藥物有效治療，藥物療程持續近4個月后，藍孔雀的死亡率從9.3%下降到2.1%，張口呼吸癥狀的藍孔雀減少，病情得到控制。

5 討論與小結

支原體感染多能引起呼吸道臨床癥狀，主要表現為呼吸困難，咳嗽，逐漸消瘦，在長期感染情況下，機體抵抗力較弱的，最終導致死亡。該病容易與禽類傳染性支氣管炎、傳染性喉氣管炎、新城疫、大腸桿菌病混合感染，并能引起免疫缺陷。

支原體感染發病季節常在寒冷的冬季和初春，發病時間長，具有傳染性。南京地區屬于亞熱帶季風氣候，四季分明，冬季濕冷天氣較多，容易引起支原體病的感染。另外群養藍孔雀內籠舍面積狹小、通風不暢導致氨氣較重，加之天氣寒冷抵抗力變差使動物機體易感染此病。對此，我們對飼養結構進行調整，及時將帶病藍孔雀隔離治療，縮小外籠舍飼養面積。

支原體病在診斷上有一定難度，國內有很多有關支原體病的報道，目前該病原的試驗診斷方法主要有血清學(平板凝集、HI和ELISA)、病原分離和PCR法[3]。

該病主要采用長期抗生素治療，補充維生素等營養增強抵抗力，有一定的療效。藥敏試驗結果顯示支原體對供試6種抗菌藥物表現了不同的敏感度，其中對泰樂菌素、替米考星、諾氟沙星均敏感，對頭孢菌素、阿莫西林、青霉素類等藥物耐藥。有文章表明60～80 mg / L 劑量組 10% 磷酸替米考星可溶性粉可作為治療雞支原體病的最佳使用劑量，且能夠產生最佳的治療效果[4]。筆者在用藥過程中發現10%多西環素+20%替米考星和諾氟沙星聯合用藥在臨床上起到良好的效果。在藥物聯合用藥過程中，為避免病原體產生耐藥性和動物機體中毒，采用長期用藥和輪換用藥的原則。

支原體自身的變異特性、免疫逃逸功能決定了禽支原體病難于控制，通過疫苗免疫和藥物治療很難消滅支原體，防控禽支原體病會是一項長期動態、細致復雜的工作，各種措施中，免疫尤其是采用活疫苗免疫依然是綜合控制的核心和重點[5]。

“防重于治”是動物疾病的主要防治原則。首先動物的飼養管理占主要地位，應將飼養密度控制在合適范圍之內，冬季采取適當措施為動物防寒保暖；夏季則應注意防暑降溫。其次應保持動物籠舍衛生清潔，定期通風和消毒，切斷支原體病的傳染源，仍舊是做好動物疾病預防的重點工作。