氨溴索注射亞微乳穩定性研究

張會麗，李書平，姜亞玲

（鄭州工業應用技術學院藥學與化學工程學院，河南 鄭州 451150）

鹽酸氨溴索為黏痰溶解藥，2015年版《中國藥典（二部）》［1］收載的劑型有口服溶液、片劑、注射液、膠囊、緩釋膠囊、糖漿6種。雖有緩釋片上市，但對于不能口服給藥的患者無法使用，又存在臨床注射劑用量較大且有減少給藥次數的需求。鑒于該藥無乳劑品種上市，考慮將其制成乳劑以達到緩釋作用，而水／油（W／O）型和水／油／水（W／O／W）型乳劑由于注射時的生物相容性問題和儲藏不穩定性使得制備和使用的可能性較小。本研究中將鹽酸氨溴索制成氨溴索，再用剪切儀及均質儀做成油／水（O／W）型乳劑，以期制成有緩釋作用的注射用乳劑［2－4］，并對其穩定性進行研究［1，5－6］。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

隔水式電熱恒溫培養箱（上海市躍進醫療器械廠）；YSEI藥品穩定性試驗箱（重慶市永生實驗儀器廠）；AT460型電子天平、AG245型電子天平（瑞士Mettler Toledo儀器公司）；D－79282型高速剪切儀（德國Fluko公司）；M－110L型高壓微射流納米均質機（美國Mfic公司）；TGL－16GB型小型通用離心機（上海安亭科學儀器廠）；Professional Meter PP－50型電位與pH計（德國Sartorius公司）；BI－9000AT型光子相關光譜儀（美國Brookhaven公司）。

1.2 試藥

鹽酸氨溴索（北京太洋藥業有限公司，批號為M130909）；氨溴索亞微乳（自制，規格10 mL，批號分別為 2014112001，2014112002，2014112003）；磷酸二氫鉀（天津科密歐化學試劑有限公司，批號為20120512）、氫氧化鈉（天津市進豐化工有限公司，批號為20140512）均為分析純；甲醇（Merck公司，批號為1637030－217）為色譜純。

2 方法與結果

2.1 影響因素試驗

2.1.1 考察項目及測定方法

按最終處方和制備工藝制備3批載藥乳劑（編號分別為 001，002，003），氮氣流下灌封于 10 mL 安瓿，懸掛式震蕩滅菌。分別于 40℃，60℃，（4 500±500）lx光照，冰箱凍融3次后，考察以下項目。

外觀：目測，乳劑呈乳白色，倒轉后不粘壁，流動性良好，記為（＋），表示乳劑穩定；乳劑混濁、分層、粘壁或析油，記為（－），表示乳劑不穩定。

離心穩定性：取適量乳劑置5 mL離心管中，以4 000 r／min的速率離心15 min，同法評價乳劑穩定性。

pH：用Professional Meter PP－50酸度計測定乳劑的pH，結果應符合規定。

粒徑：采用動態激光光散射法測量。

含量測定：采用高效液相色譜法測定氨溴索亞微乳含量［1，7］。采用 LC －10AT 型高效液相色譜儀（含 ANASTAR工作站，日本島津公司），Diamonsil?C18色譜柱（250 mm ×4.6 mm，5 μm，迪馬公司），檢測波長 248 nm，柱溫 30℃，流速 1.0 mL／min，流動相為 pH ＝7.0的磷酸鹽緩沖液 －甲醇（27 ∶73），進樣量 20 μL。精密量取乳劑1 mL，置10 mL容量瓶中，加甲醇適量溶解，定容，精密量取1 mL，置10 mL容量瓶中，加甲醇適量溶解，定容；另配制同濃度的氨溴索對照溶液，進樣，按外標法計算氨溴索含量。

2.1.2 穩定性考察

高溫試驗：將氮氣流下灌封于10mL安瓿的載藥乳劑置40℃或60℃下10 d，分別于第5，10天取樣，按穩定性重點考察項目進行檢測。結果見表1和圖1。可見，溫度越高，乳劑的含量和pH下降越大，但粒徑幾乎無變化，說明乳滴本身對該條件穩定；由于高溫會影響藥物穩定性，因此，該藥乳劑應避免高溫貯藏（因篇幅所限，僅附60℃高溫下5 d粒徑分布圖）。

表1 高溫試驗結果

圖1 60℃高溫試驗5 d粒徑分布圖

強光照射試驗：將氮氣流下灌封于10 mL安瓿的載藥乳劑置（4 500±500）lx照度的條件下10 d，分別于第5天和第10天取樣，按穩定性重點考察項目進行檢測。結果見表2。可見，不同光照條件下，乳劑粒徑幾乎無變化，含量下降不明顯，但考慮到光是引起藥物降解的主要因素，因此乳劑仍宜避光貯藏。

表2 強光照射試驗結果

凍融試驗（熱循環試驗）：美國食品藥物管理局（FDA）于1998年6月發布的穩定性指導原則草案提出，對于易發生相分離、黏度減小、沉淀或聚集的藥品，需通過熱循環試驗來驗證其運輸或使用過程中的穩定性。作為影響因素試驗的一部分，應模擬藥品在運輸與使用過程中可能碰到的溫度條件下循環考察上市包裝藥品的穩定性。將氮氣流下灌封于10 mL安瓿的載藥乳劑，以－20℃條件下冷凍48 h和40℃條件下放置48 h為1個循環，共循環3次。每完成1個循環，按穩定性重點考察項目進行檢測。結果見表3。可見，乳劑在該條件下含量變化不明顯，但粒徑變化高于60℃時，貯藏乳劑時應避免劇烈的溫度變化。

表3 凍融試驗結果

2.2 加速試驗

按最終處方和制備工藝制備3批載藥乳劑（編號分別為 001，002，003），氮氣流下灌封于 10 mL 安瓿，懸掛式震蕩滅菌。置溫度（30±2）℃、相對濕度（65±5）%的條件下6個月，分別于第1，2，3，6個月末取樣，按穩定性重點考察項目進行檢測。結果見表4。可見，6個月內氨溴索亞微乳pH降低不明顯，粒徑稍增大，說明乳劑在該試驗條件下相對穩定，但考慮到乳劑本身的熱力學不穩定性，仍宜冷藏保存。

表4 加速試驗結果

2.3 長期留樣試驗

按最終處方和制備工藝制備3批載藥乳劑（編號分別為 001，002，003），氮氣流下灌封于 10 mL 安瓿，懸掛式震蕩滅菌。置溫度（25±2）℃、相對濕度（60±10）%條件下6個月，分別于第1，2，3，6個月末取樣，按穩定性重點考察項目進行檢測。結果見表5。可見，6個月內氨溴索亞微乳pH降低不明顯，粒徑稍微增大。

表5 長期留樣試驗結果

3 討論

鹽酸氨溴索有溶解分泌黏液及促進黏液排出的作用，并能增加呼吸道黏膜漿液腺的分泌，減少黏液腺分泌，從而降低痰液黏度；同時可促進肺表面活性物質的分泌，增加支氣管纖毛運動，使痰液易于咳出，達到顯著排痰及改善呼吸的作用。肺癌患者由于腫塊壓迫、侵犯氣管，使得支氣管狹窄，引流不暢，致使癥狀遷延不愈，感染不易控制［8］。對于合并阻塞性肺炎的肺癌患者，聯合鹽酸氨溴索治療能更好地緩解癥狀，控制炎癥，提高氧合能力，促進病灶吸收，減少抗菌藥物的使用時間和住院時間［9］。

在不同影響因素、加速試驗和長期試驗條件下，乳劑的粒徑變化均不明顯，說明乳滴本身對該條件穩定。但影響因素試驗中，乳劑的pH及氨溴索亞微乳含量略有下降，對含量的影響大小順序為60℃＞40℃＞凍融＞光照。因此，乳劑在貯存時宜陰涼處避光保存。

由于溫度和貯存期間甘油酯和磷脂的水解會產生游離脂肪酸，從而導致乳劑pH下降，故制備乳劑時pH需調至弱堿性。又因在各種條件下，乳劑pH均有下降，故制備乳劑時宜將其pH調至8.5左右。

60℃高溫試驗結果顯示，乳劑的含量和pH值下降較大；加速試驗6個月和長期試驗6個月結果顯示，乳劑中氨溴索亞微乳下降率較小，分別為1.67%和1.29%。由于高溫會影響藥物穩定性，因此該藥乳劑應陰涼處貯藏。