包蟲病防控技術研究

一、病原學研究

1. 棘球蚴病。棘球蚴病俗稱包蟲病，由棘球屬絳蟲幼蟲（中絳期）──棘球蚴（包蟲）寄生于人和動物肝、肺等器官所引起的一類重要人獸共患寄生蟲病。

2. 病原學。棘球蚴屬于絳蟲剛圓葉目帶科棘球屬，棘球屬的絳蟲種類有細粒棘球絳蟲、多房棘球絳蟲、少節棘球絳蟲、石渠棘球絳蟲、加拿大棘球絳蟲等。

二、流行病學研究

1.包蟲病在全國的流行情況。全國棘球蚴病流行縣有368/413個，分布于內蒙古、四川、西藏、甘肅、青海、寧夏、云南、陜西和新疆等9省（自治區），其中115個縣為細粒棘球蚴病和多房棘球蚴病混合流行區。

青海、西藏、甘肅等3省（自治區）的犬糞棘球蚴絳蟲抗原陽性率較高；西藏、青海和四川等3省（自治區）的人群棘球蚴病檢出率較高；西藏、青海和四川等3省（自治區）的家畜棘球蚴病檢出率較高。

在中國流行的蟲株（中間宿主體內）里，細粒棘球蚴G1較廣泛分布于家畜和人，多房棘球蚴較廣泛分布于人和嚙齒動物。四川、新疆、黑龍江發現少量G3、G6、G10人體病例；石渠棘球蚴一般分布于青藏高原的嚙齒動物。

2012-2016年中國流行區學校兒童棘球蚴病患情況和血清學調查和野生動物棘球蚴病感染情況調查結果都顯示，內蒙古、四川、甘肅、青海、寧夏和新疆等地的陽性率和感染檢出率較高。

2.包蟲病在內蒙古的流行情況。流行區包括東烏珠穆沁旗、化德縣、太仆寺旗、新巴爾虎右旗、額爾古納市等23個市、縣、區、旗。1985年唐崇惕等人于內蒙古倫貝爾草原上動物多房棘球蚴感染情況：布氏田鼠和長爪沙鼠的平均感染率分別為2.43%和16.67%。1998-2001年唐崇惕等人于內蒙古倫貝爾草原上動物多房棘球蚴感染情況：布氏田鼠感染率分別為0.92%，其他6種嚙齒動物未發現感染情況。

三、防控措施研究

1. 切斷病原在犬—家畜之間的傳播鏈：如驅蟲和疫苗接種。

2. 禁止隨意拋棄荷有包蟲的動物臟器和喂犬（注意屠宰檢疫、廢棄臟器無害化處理等環節）。

四、診斷檢測技術的研究與應用

（一）國外研究現狀

研究結果表明，利用大腸桿菌生產的基因工程亞單位重組疫苗（GST-EG95+Quil A）對綿羊進行二免后可使免疫動物產生堅強的抵抗棘球蚴感染的保護力（90%以上）。

基因工程EG95亞單位重組抗原疫苗免疫保護作用：已有大量文獻報道，基因工程亞單位重組疫苗（EG95）在綿羊和牛進行二免后可使免疫動物產生堅強的抵抗棘球蚴感染的保護力（80%以上）。基因工程亞單位重組疫苗（EG95）已在中國、阿根廷等國家推廣使用和評價疫苗效果。

（二）國內包蟲病疫苗研制現狀

中國農業研究院生物制品工程技術中心引進新西蘭專利技術生產動物包蟲病基因工程重組抗原疫苗，疫苗產品為白色疏松的凍干苗。疫苗主要組成為細粒棘球絳蟲EG95重組抗原和Quil-A佐劑，并取得國家一級新獸藥證書。后將此技術轉讓至重慶澳龍生物制品有限公司。

（三）中國國家包蟲病免疫計劃

農業部文件（農醫發[2014]10號）常見動物疫病免疫推薦方案（試行）規定：首次將包蟲病列為免疫病種之一；農業部文件（農醫發[2016]10號）國家動物疫病強制免疫計劃規定：在包蟲病重疫區，由省級畜牧獸醫主管部門會同有關部門根據監測情況自主選擇免疫的策略；農業部文件（農醫發[2017]8號）國家動物疫病強制免疫計劃規定：在包蟲病流行區對新補欄養只進行包蟲病免疫，群體免疫密度應常年保持在90%以上，應免疫動物免疫密度達到100%。

（四）2018年國家包蟲病免疫計劃

農業部文件（農醫發[2018]1號/20180116）發布了針對包蟲病的政策：包蟲病是國家強制免疫的5種疫病病種之一；在包蟲病流行區，對新生羔羊、補欄羊及時進行包蟲病免疫；群體密度應常年保持在90%以上，其中應免動物免疫密度達到100%。

五、診斷技術的研究與應用

（一）終末宿主—棘球絳蟲感染的診斷

一是死后診斷，即剖檢法（抽樣調查）；二是生前診斷，包括糞蟲卵與節片鏡檢、檳榔堿瀉下法（抽樣調查）、糞DNA檢測法（PCR、LAMP、RPA、實時熒光PCR）、糞抗原ELISA法等。現國際上仍普遍采用“氫溴酸檳榔堿下瀉法”和“剖檢法”（金標準）檢查犬科動物棘球絳蟲感染情況。

1. 氫溴酸檳榔堿下瀉法：（1）經口灌喂氫溴酸檳榔堿，腸道痙攣、引起下泄，檢查下泄糞便；（2）標準糞便：帶腸黏膜凍狀下泄物；（3）優點：客觀、真實、準確；（4）缺點：環境污染、操作者有一定風險、可能會有10%～20%的犬不下瀉。

2. 糞抗原ELISA法（酶聯吸附測定）。（1）試劑盒：購置市售商品試劑盒（雙抗體夾心法）；（2）優點：操作簡便、可批量檢測等；（3）敏感性低、目前市面上的試劑盒只針對細粒棘球絳蟲（狹義種）、對樣品新鮮度要求較高等。

（二）中間宿主—棘球蚴感染的診斷

生前診斷主可依靠影像學方法（B超/x光）；死后診斷主要是剖檢法，包括宰后肉眼觀察、實驗室診斷（PCR、核苷酸序列測定、RFLP-PCR、RPA、RTPCR等）。現普遍采用國際公認的剖檢法，對家畜宰后進行棘球蚴感染的調查，該法取得的調查結果為“金標準”；對可疑病灶或包囊、一種宿主可感染多種棘球蚴等、有時無法鑒定；目前對中間宿主患棘球蚴病的生前診斷尚無行之有效的方法；一些血清學方法逐漸應用于生前流行病學和群體感染情況的調查。

細粒棘球絳蟲基因型（測序）存在G3和G6基因型，特別是G6基因型的存在應引引起注意：現有的診斷試劑盒可能造成漏檢，因為與G1基因型(普通綿羊株差異較大）。

（三）羊棘球蚴病抗體檢測測試試劑盒的研制

蘭州獸醫研究所分離篩選了棘球蚴囊液種極具應用價值的抗原成分，并制備了羊包蟲病檢測試劑盒。該試劑盒與同類試劑盒的檢測敏感性相比較，經試驗證明，該試劑盒對剖檢及分子生物學鑒定為包蟲病的羊血清檢測數量為200份，陽性檢測的敏感性為83%，遠遠高于其他試劑盒，檢測陰性羊血清840份，陰性準確率為97.2%。

疫苗免疫動物后血清抗體的檢測關系到免疫動物是否有免疫保護力，更關系到動物群體免疫抗體水平和密度。在對市售EG95抗體ELISA檢測試劑盒的對比實驗中，對已知的10份綿羊陰性血清（健康對照羊）檢測的結果顯示，市售產品中一半會呈現假陽性率過高，而蘭州獸醫研究所研制的EG95抗體ELISA檢測試劑盒的假陽性率僅有4.4%。