急性心肌梗死發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)與C反應(yīng)蛋白基因多態(tài)性的相關(guān)性

朱艷彬 劉同庫 馬 雋 信業(yè)久 王 丹

(北華大學(xué)附屬醫(yī)院，吉林 吉林 132001)

C反應(yīng)蛋白(CRP)以參與炎癥反應(yīng)為主要作用，進(jìn)化非常保守。若CRP基因發(fā)生遺傳變異，可能會(huì)改變其表達(dá)、結(jié)構(gòu)及功能；從而影響個(gè)體的心肌梗死易感性，急性心肌梗死(AMI)發(fā)病之前會(huì)有很長的隱匿期〔1〕，AMI危險(xiǎn)性大，及早發(fā)現(xiàn)并預(yù)防越來越刻不容緩，如果能在發(fā)病之前進(jìn)行檢測(cè)、并預(yù)見這種疾病的可能性，及早的進(jìn)行干預(yù)，必定具有很重大的臨床價(jià)值〔2〕。此外，分子學(xué)、基因?qū)W是現(xiàn)在的研究趨勢(shì)，在這種大背景下,AMI的基因檢測(cè)價(jià)值凸顯，CRP基因?qū)W研究成為當(dāng)今熱點(diǎn)〔3〕。本文探討AMI發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)和CRP基因T-757C多態(tài)性的相關(guān)性。

1 資料和方法

1.1臨床資料 選擇北華大學(xué)附屬醫(yī)院2015年12月至2017年2月住院的AMI患者125例(AMI組)，全部由心電圖(ECG)、超聲心動(dòng)圖或冠狀動(dòng)脈CT血管成像、數(shù)字減影血管造影等確診。選擇同一期間體檢的健康觀察對(duì)象85例作為對(duì)照組。

1.2一般資料 收集全部觀察對(duì)象的基本資料。

1.3CRP基因T-757C多態(tài)性檢測(cè) 參照以往研究方法〔3〕。

1.4AMI基因報(bào)告 分為以下6個(gè)階段①-：患病的風(fēng)險(xiǎn)非常低,幾乎不患本病。②-:發(fā)生AMI的概率較低,相當(dāng)與普通人。③+-:發(fā)生AMI的風(fēng)險(xiǎn)有，但不高，發(fā)病概率略高于普通人，建議該人群日常生活中注重預(yù)防保健，無需治療。④+:AMI發(fā)病因素較高，需要高度重視，預(yù)防為主，注意預(yù)防保健，定期檢查身體，若生活因素控制不佳，發(fā)病率提高，可通過控制生活習(xí)慣，降低發(fā)病率。⑤:AMI的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)很高，若生活習(xí)慣控制不佳，很容易發(fā)病，若注重生活因素控制，可有效降低發(fā)病概率。建議及早預(yù)防保健和身體檢查。⑥:AMI的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)極高，若生活因素控制欠佳，極易發(fā)病，同樣的，若注重控制生活因素，如心情平和等，可有效降低發(fā)病概率。建議及早預(yù)防保健及規(guī)范、定期專項(xiàng)體檢。①～③認(rèn)為陰性,④～⑥認(rèn)為陽性。

1.5AMI的基因檢測(cè)適應(yīng)證〔4〕①目前尚無臨床狀,但危險(xiǎn)因素很多，如中老年男性，絕經(jīng)后女性；不良飲食習(xí)慣，長期吸煙史，肥胖或者缺乏運(yùn)動(dòng)；有家族史，血糖、血壓及血脂等異常；胰島素抵抗增強(qiáng)；一些凝血因子的增高；高纖維蛋白原血癥;尿酸增高等。可以經(jīng)由基因檢測(cè)，預(yù)測(cè)觀察對(duì)象的AMI發(fā)病概率，稱為一級(jí)預(yù)防。②受檢查已經(jīng)出現(xiàn)胸悶、胸痛、呼吸困難等臨床表現(xiàn),可抽血檢測(cè)基因，評(píng)估梯度，以便進(jìn)行下一步檢測(cè)或保健。③抑郁、焦慮等與AMI癥狀相似的病變,心電圖不典型者可抽血進(jìn)行基因檢測(cè)。

1.6血清CRP水平檢測(cè) AMI組發(fā)病時(shí)間短于24 h，并及時(shí)采集空腹靜脈血，取5 ml血液于室溫下靜置30～60 min，離心后得到需要的血清，選擇酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)CRP水平，檢測(cè)之前血清需要放入-70℃冰箱內(nèi)保存。

1.7統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS19.0軟件行t及χ2檢驗(yàn)；偏態(tài)分布者選擇中位數(shù)/四分位數(shù)間距(M/IQR)表示，并進(jìn)行Wilcoxon秩和檢驗(yàn)或Kruskal-WallisH檢驗(yàn)。校正其他因素對(duì)血清CRP濃度的影響時(shí)選擇多變量Logistic回歸分析；臨床參數(shù)及血清CRP水平的關(guān)聯(lián)性分析選擇多元線性回歸分析。

2 結(jié) 果

2.1一般臨床資料對(duì)比 與對(duì)照組相比較，AMI組年齡更長，男性比例明顯提高，吸煙與高血壓的比例更高，血糖水平更高，而高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)水平明顯減低(P<0.05)，空腹血糖(FPG)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表1。

2.2CRP基因T-757C多態(tài)性 PCR擴(kuò)增獲取314 bp的特異性片段，該片段經(jīng)過酶切后在兩組中皆呈現(xiàn)CC(314 bp)、TC(314 bp、234 bp和80 bp)和TT(234 bp和80 bp)3種基因型。兩組基因型分布差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有群體代表性，見表2。

表1 兩組一般臨床資料比較

2.3血清CRP水平 AMI組血清CRP濃度明顯高于對(duì)照組(5.985/6.255 μg/ml:3.269/1.294 μg/ml，P<0.01)，且經(jīng)Logistic回歸分析校正AMI相關(guān)臨床因素，包括性別、年齡、吸煙、高血壓、血糖和血脂異常等，兩組血清CRP水平差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(OR=2.088，95%CI1.259～3.458，P<0.01)。

2.4AMI患者CRP基因T-757C多態(tài)性與血清CRP水平的相關(guān)性 去除以上提到的臨床影響因素后，分析比較AMI患者各種基因型的血清CRP水平，CC(4.071/2.492 μg/ml)、TC(5.744/6.319 μg/ml)及TT(6.126/6.627 μg/ml)基因型之間CRP水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。CC、TC基因型的AMI患者≥60歲和<60歲的CRP水平差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，而TT基因型的AMI患者在不同年齡段CRP水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，見表3。

表3 不同年齡AMI患者CRP水平比較(M/IQR,μg/ml)

3 討 論

CRP來源于肝臟，作為當(dāng)前炎癥標(biāo)志中探討最廣泛的因子，以血清濃度反映感染或組織損傷。CRP的主要生物學(xué)功能是通過其識(shí)別病原體和宿主的能力受損的細(xì)胞和補(bǔ)體系統(tǒng)的招聘和吞噬細(xì)胞介導(dǎo)的消除〔5〕。CRP還是一項(xiàng)新的心肌標(biāo)志物，心血管疾病的病理改變就是血管發(fā)生炎癥反應(yīng)，進(jìn)而出現(xiàn)粥樣硬化等表現(xiàn)，因此在這個(gè)組織受損的過程中CRP值也會(huì)升高，進(jìn)而成為實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)指標(biāo)〔6〕。文獻(xiàn)表示，超敏CRP(hsCRP)濃度是心血管疾病發(fā)展過程中的促炎性反應(yīng)，其濃度的升高和心血管疾病聯(lián)系緊密〔7〕。CRP具有多種生物學(xué)效應(yīng):①和補(bǔ)體發(fā)生反應(yīng)，補(bǔ)體被激活補(bǔ)體，CRP發(fā)生氧化，促進(jìn)補(bǔ)體的吞噬作用；②CRP本身可促進(jìn)與外源性凝血機(jī)制相關(guān)的組織因子的增加，從而增加血栓的形成;③改變?cè)镜膬?nèi)皮細(xì)胞一氧化氮(NO)的表達(dá)與形成，通過影響血管內(nèi)皮細(xì)胞功能，加快白細(xì)胞介素(IL)-6等因子的生成，同時(shí)降低內(nèi)皮細(xì)胞NO合酶mR1VA的穩(wěn)定性，進(jìn)一步降低NO量，不易產(chǎn)生新生血管，進(jìn)而改變心血管結(jié)構(gòu)；④降低LDL-C的作用。血清CRP濃度成為冠狀動(dòng)脈病變高危人群的獨(dú)立預(yù)測(cè)指標(biāo)。CRP是冠心病的重要危險(xiǎn)因子。因此，生物學(xué)層面的CRP基因的遺傳變異可能調(diào)節(jié)AMI風(fēng)險(xiǎn)。CRP基因已被映射到人類染色體1q21和1q23之間。它包含2 263個(gè)核苷酸，有1個(gè)單一的內(nèi)含子。CRP的表達(dá)主要是在轉(zhuǎn)錄水平的調(diào)節(jié)，而轉(zhuǎn)錄后機(jī)制也有助于CRP基因表達(dá)的調(diào)控。研究已經(jīng)表明，在CRP基因啟動(dòng)子區(qū)常見的多態(tài)性可能是AMI的風(fēng)險(xiǎn)中扮演著重要的角色〔3,8〕。

血清CRP、白細(xì)胞及白蛋白水平受遺傳因素影響。位于啟動(dòng)序列的CRP基因286C>T>A屬于功能性多態(tài)性位點(diǎn)，和CRP水平有相關(guān)性。CRP基因T-757C也位于啟動(dòng)子區(qū)，在轉(zhuǎn)錄中起重要作用，和286C>T>A間關(guān)系密切〔9〕。所以推測(cè)，T-757C也可能通過轉(zhuǎn)錄、翻譯，間接影響血清CRP水平。

本研究顯示，AMI患者和健康人均存在CRP基因T-757C多態(tài)性，且T-757C多態(tài)性與AMI明顯相關(guān)。但本研究中各基因型樣本特別是CC型樣本量很少，統(tǒng)計(jì)結(jié)果可能存在一定誤差，還需進(jìn)一步研究CRP基因多態(tài)性和AMI的相關(guān)性。采用CRP基因多態(tài)性檢測(cè)參與評(píng)估AMI的風(fēng)險(xiǎn)性；增加了對(duì)AMI發(fā)生發(fā)展的認(rèn)識(shí)〔10〕。對(duì)于臨床上懷疑AMI的患者,可以通過抽血檢查基因的方式預(yù)測(cè)AMI的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn),改變了以往必須經(jīng)影像檢查診斷心臟病變的局面，減輕冠心病患者對(duì)臨床檢查存在的恐懼和抵觸情緒。