例析酵母菌計數方法與其種群密度調查方法的區別

黃淑彬

【摘 要】本文從學生解題中對酵母菌的計數方法和酵母菌的種群密度調查方法存在的疑惑出發，對人教版高中生物必修三中提到的酵母菌種群密度的調查方法和選修一中微生物的計數方法進行解釋，以便學生理解應用。

【關鍵詞】酵母菌；計數方法；種群密度；調查方法

【中圖分類號】G633.91 【文獻標識碼】A

【文章編號】2095-3089（2018）21-0070-01

一、題目

在“探究培養液中酵母菌種群數量的變化”的實驗中：

（1）采用的方法對酵母菌進行計數。

學生1的答案：顯微鏡直接計數

學生2的答案：血球（血細胞）計數板計數

學生3的答案：抽樣檢測

參考答案：抽樣檢測

學生的疑惑：參考答案只給了抽樣檢測一個答案，此問難道答顯微鏡直接計數和血球（血細胞）計數板計數是錯誤的嗎？

經了解，學生有此疑惑的原因是，他們在平時練習中做過以下題目：

例1.下列有關實驗敘述，正確的是（ ）

A.探究培養液中酵母菌種群數量的變化，可采用抽樣檢測的方法對酵母菌計數

B.模擬探究細胞大小與物質運輸關系，正方體瓊脂塊的體積是無關變量

C.探究植物生長調節劑對扦插枝條生根作用，插條生根數是因變量

D.探究光照強弱對光合作用強度影響，小圓形葉片表面的氣泡數是因變量

答案：A

例2.（多選）要達到下列各項研究目的，所采用的研究方法正確的是（ ）

A.種群的數量變化——抽樣調查法

B.有絲分裂中染色體的變化規律——對比實驗法

C.酵母菌的種群密度——抽樣檢測法和顯微直接計數法

D.土壤小動物豐富度統計——記名計算法或目測估計法

答案：CD

例3.下列有關實驗的敘述，不正確的是（ ）

A.在觀察洋蔥細胞有絲分裂實驗中，解離的目的是使組織中的細胞相互分離

B.在綠葉中色素的提取實驗中，研磨綠葉時應加入一些有機溶劑，如無水乙醇等

C.進行酵母菌計數時，可采用抽樣檢測的方法，利用血球計數板進行計數

D.檢測梨汁中是否含有葡萄糖，可加入適量斐林試劑，搖勻后觀察顏色變化

答案：D

人教版高中生物教材中有兩處涉及到微生物數量的計數，一處是必修三中“探究培養液中酵母菌種群數量的變化”，運用抽樣檢測法，在顯微鏡下觀察統計血球計數板上酵母菌數量并推算出培養液中酵母菌的個體數[2]；另一處是選修一中“土壤中分解尿素的細菌的分離和計數”，介紹了三種微生物的計數方法，分別是顯微鏡直接計數法、稀釋涂布平板法和濾膜法[1]。學生通過練習，再結合教材自行總結：酵母菌的種群密度的調查方法有抽樣檢測法、顯微鏡直接計數法，酵母菌的計數方法有抽樣檢測法、顯微鏡直接計數法、血球（血細胞）計數板計數法、稀釋涂布平板法。所以該題就出現如學生1和學生2的答案。

二、辨析

1.顯微鏡直接計數法。

顯微鏡直接計數法適用于各種含單細胞菌體的純培養懸浮液，如有雜菌或雜質，常不易分辨。菌體較大的酵母菌或霉菌孢子可采用血球計數板（也叫做血細胞計數板），一般細菌則采用彼得羅夫.霍澤（Petrof Hausser）細菌計數板，兩種計數板的原理和部件相同，只是細菌計數板較薄，可以使用油鏡觀察。而血球計數板較厚，不能使用油鏡，計數板下部的細菌不易看清[3]。由此筆者認為微生物的計數方法，如果計數的微生物是菌體較大的酵母菌或霉菌孢子，則抽樣檢測法，顯微鏡直接計數法和血球計數板計數法是等同的。

2.抽樣檢測法。

調查玻璃容器中酵母菌數量應該使用血細胞計數板對培養液進行抽樣檢測的方法，來調查酵母菌的種群數量變化，通過取多次調查的平均值進行估算，而不能準確計數。利用血細胞計數板進行抽樣檢測的方法用到像調查植物種群數量變化的樣方法，但不等同于樣方法。

抽樣檢測法調查酵母菌種群密度的具體操作：先將蓋玻片放在計數室上，用吸管吸取培養液，滴于蓋玻片邊緣，讓培養液自行滲入，多余培養液用濾紙吸去，稍待片刻，待酵母菌細胞全部沉降到計數室底部，將計數板放在載物臺的中央，計數一個小方格內的酵母菌數量，再以此為根據，估算試管中的酵母菌總數。

三、結論

抽樣檢測法對酵母菌進行計數時，要用到顯微鏡和血球計數板。由此筆者認為抽樣檢測法、顯微鏡直接計數法、血球（血細胞）計數板計數法的原理相似，所以這三種方法是等同的。也就是說酵母菌的計數方法有抽樣檢測法、顯微鏡直接計數法、血球（血細胞）計數板計數法，而酵母菌的種群密度的調查必須對其進行計數，故酵母菌的種群密度的調查方法和計數方法是一致的。所以該題學生1、學生2、學生3的答案都是正確的。

參考文獻

[1]朱正威，孫萬儒，趙占良主編.普通高中課程標準實驗教科書生物選修一生物技術實踐[M].北京：人民教育出版社，2016：21.

[2]朱正威，孫萬儒主編.普通高中課程標準實驗教科書生物必修三穩態與環境[M].北京：人民教育出版社，2013：68.

[3]韓翠翠.“題說”2015年高考題中的微生物計數法[J].生物學教學，2016，44（1）：47.