菜豆不定根的誘導

段永平 趙美榮

(內蒙古赤峰學院生命科學學院 024000)

植物生長調節劑的一個重要生理作用是誘導植物插條產生不定根[1]，植物生長素對插條不定根誘導實驗是許多學校選擇開出的學生實驗，在這個實驗過程中，常用的方法采用萘乙酸處理易生根的植物插條為材料[2]觀察對不定根誘導的影響，在處理材料過程中，均采用小燒杯水培的方式。但是，采用這種方法主要存在的問題是： 如果處理時間較長，會使浸入處理液中的材料發生腐爛的現象，導致實驗失敗。經過幾年的實驗摸索，利用菜豆(Phaseolusvulgaris)芽下胚軸作為實驗材料，使用培養皿和濾紙夾層進行培養，較好地解決了材料處理過程中腐爛的問題，取得了較好的實驗效果，具體做法如下。

1 材料的準備

菜豆芽的準備采用王金祥的方法[3]，挑取飽滿的菜豆種子，清水清洗6遍，用0.1%的NaClO消毒30min，再用清水沖洗6次，然后浸種8h，將水倒掉，上覆濕紗布，在25℃～28℃條件下培養，待下胚軸長度達到4～5cm時，即可作為實驗材料使用。

2 裝置準備

在12cm的玻璃培養皿鋪3層直徑11cm的濾紙，再用濾紙裁成10cm×7cm的長方形10張，其中，將3張長方形濾紙疊在一起使用，10cm長邊一側接觸培養皿底部，另一側擔在培養皿的邊緣，留另外2張濾紙疊在一起，將來覆蓋在實驗材料上面備用。

3 材料處理

取培養好的菜豆芽，在豆芽根上0.5cm處用刀片切除菜芽根；培養皿中加入處理材料的萘乙酸溶液(按設定的濃度進行配制)，將去掉菜豆芽的根的實驗材料5～10株平鋪在長方形的濾紙上，擺放位置上端以子葉長出濾紙0.5～1cm為宜，避免菜豆芽的莖尖直接接觸濾紙為宜；然后，蓋上備用的濾紙，最好上、下層濾紙對齊，待萘乙酸溶液完全浸濕濾紙后，保持培養皿萘乙酸溶液0.5cm左右，然后放入培養箱進行培養。這樣處理實驗材料，濾紙通過毛細管現象從培養皿下部獲得萘乙酸溶液，大豆芽下胚軸部分直接接觸萘乙酸溶液達到處理材料的目的。同時，由于處理材料處在兩夾層濾紙中間，材料下胚軸可通過濾紙縫隙獲得O2，保證材料進行有氧呼吸，這樣就避免水培方法處理實驗材料致使O2供應不足，引起材料進行無氧呼吸、材料腐爛的問題。待達到處理時間，即可進行觀察、統計設計的實驗結果(圖1)。

圖1 菜豆不定根誘導結果

在相同的實驗中，也可使用市場購買大豆(Glycinemax)芽等作為實驗材料，也能獲得比較好的實驗效果。

*前文受翰思科學儀器公司關注*