冠心病患者血清內皮細胞特異性分子-1表達水平及其相關性

邱崇榮 羅 駿

(贛州市人民醫院 南昌大學附屬贛州醫院心內科，江西 贛州 341000)

冠心病病因復雜，其中內皮功能紊亂是冠心病發生與發展的始動環節，并貫穿于其發病的全過程〔1〕。近年來一種反映內皮功能紊亂的新型生物標記物，內皮細胞特異性分子(ESM)-1，引起了學者們的關注。研究表明ESM-1可能是血管內皮細胞功能紊亂的生物標記物〔2，3〕。國外有文獻報道高血壓患者及急性冠脈綜合征患者血清ESM-1表達水平明顯升高〔2，3〕，ESM-1可能參與動脈粥樣硬化的發病過程，同時炎癥與冠心病發病關系密切。然而，國內關于冠心病患者ESM-1表達水平的臨床研究文獻報道甚少，冠心病患者血清ESM-1水平與炎癥介質之間關系亦鮮見報道。本研究探討冠心病患者血清ESM-1表達水平，并分析其相關性。

1對象和方法

1.1對象 序貫入選2015年1月至2016年5月于贛州市人民醫院住院疑似冠心病患者300例，行冠狀動脈造影并被確診為冠心病的患者230例為冠心病組，年齡33～80歲，平均(64.78±12.59)歲，男138例，女92例。70例行冠狀動脈造影檢查結果正常者為對照組，年齡37～76歲，平均(61.56±6.63)歲，男41例，女29例。兩組年齡、性別比較差異無統計學意義(P>0.05)。冠心病診斷標準〔4〕：左主干、左前降支、左回旋支或右冠狀動脈至少有1支管腔直徑狹窄≥50%。排除標準：(1)血液系統疾病；(2)甲狀腺疾病；(3)免疫性疾病；(4)嚴重瓣膜疾病；(5)嚴重腎功能不全需要腎透析治療；(6)自身免疫性疾病；(7)感染性疾病；(8)惡性腫瘤。

1.2方法

1.2.1收集資料 收集所有研究對象的年齡、性別、身高、體重(計算體重指數)、吸煙史及既往史，入院收縮壓及舒張壓，入院次晨查血細胞分析〔計算中性粒細胞淋巴細胞比值(NLR)〕、總膽固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、空腹血糖、肌酐(Cr)。

1.2.2檢測血清ESM-1表達水平 所有研究對象抽取清晨7～8點外周靜脈血，空腹12 h以上，平臥20 min，急性心肌梗死患者入院次晨抽血，無須抗凝，立即置于4℃冰箱中1 h，4℃ 3 000 r/min 離心15 min，提取血清，置于-80℃冰箱保存備用。采用酶聯免疫法檢測血清ESM-1表達水平，試劑盒由上海酶聯生物科技有限公司提供，檢測下限為0.2 ng/ml，靈敏度為0.02 ng/ml，批內變異系數7.2%，批間變異系數9.8%，檢測步驟嚴格按照試劑盒說明進行。

1.2.3生化指標的檢測 生化指標的測定使用全自動生化儀7600(日本)。超敏C反應蛋白(hs-CRP)采用MAGLUMI2000全自動化學發光免疫分析儀檢測，試劑為機器配套試劑。

2 結 果

2.1冠心病組與對照組基線資料比較 兩組血脂、BMI、既往史比較差異均無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。與對照組比較，冠心病組ESM-1、hs-CRP、NLR水平較高(均P<0.05)。見表1。

2.2相關性分析 冠心病患者ESM-1水平與hs-CRP(r=0.128,P=0.011)及NLR(r=0.139,P=0.020)呈正相關。

表1 兩組基線資料比較

3 討 論

冠心病特征是進行性動脈粥樣硬化，導致管腔狹窄、血流受限，從而導致心肌缺血缺氧或壞死。內皮功能紊亂是冠心病發病的始動環節，紊亂的內皮促使脂質及細胞滲透、脂質蛋白氧化、炎癥反應、平滑肌細胞增殖，細胞外基質的沉積和溶解，血小板激活及血栓形成，從而促使動脈粥樣硬化的形成〔5〕。血管內皮不僅僅是一單層的細胞，同時也產生多種生物活性物質，在調節血管的功能和結構上起了一定的作用。內皮功能紊亂對不良心血管事件具有一定的預測價值，應用保護血管內皮功能的藥物，能降低不良心血管事件發生的風險〔6〕。多年來，人們致力于尋求各種檢測及判斷內皮功能紊亂的方法，評估血管內皮功能的方法包括有創檢查，如定量血管造影、心導管技術及血管內超聲等；無創檢查，如高分辨超聲檢測肱動脈血流介導的舒張功能等〔7〕。近年來，ESM-1引起了學者們的關注。

ESM-1也稱Endocan，在1996年由法國科學家Lassale等〔8〕發現并首次報道。初始分泌的ESM-1分子量為50 kD，經轉錄修飾后其分子量為20 kD。成熟的ESM-1是富含半胱氨酸的蛋白質，含有165個氨基酸的多肽，是高度保守的重復半胱氨酸，主要由高度糖基化的黏多糖以共價鍵方式結合在ESM-1多肽第137位絲氨酸結合位點形成一條硫酸皮膚素蛋白多糖單鏈，其生物活性廣泛，對調節細胞黏附、遷移、增殖起了重要作用〔8～10〕。本研究提示ESM-1可能為冠心病患者內皮功能紊亂生物標記物，與相關文獻報道一致〔11,12〕。ESM-1主要由內皮細胞分泌，當內皮功能紊亂時，其分泌入外周血液，因此，內皮功能紊亂時ESM-1表達水平升高〔13〕。

本研究發現，冠心病組hs-CRP及NLR水平隨ESM-1水平呈升高趨勢，炎癥參與冠心病發病已被證實。ESM-1作為內皮功能紊亂指標之一，可能作為炎癥介質通過一系列復雜機制參與冠心病的發生，其可能的機制為：(1)ESM-1在粥樣斑塊中高表達，ESM-1分泌增加可能促進血管平滑肌細胞 (VSMC)的遷移和增殖，從而參與動脈粥樣硬化的發病過程〔14〕。(2)ESM-1由血管內皮細胞分泌，在血管內皮細胞的增殖分化中起了重要作用，血管內皮細胞在動脈粥樣硬化的過程中充當重要角色。因此，ESM-1可能參與冠狀動脈粥樣硬化形成的病理生理過程〔1，9，12，15〕。(3) ESM-1是血管內皮細胞分泌的一種硫酸素蛋白多糖，在血液凝固及血栓形成中發揮了重要作用，可能與冠心病高血栓狀態密切相關〔12,16〕。 (4) 炎癥反應是導致血管內皮功能紊亂的關鍵因素，ESM-1可能參與炎癥反應過程，炎癥介質可能促進ESM-1表達〔8,17〕，ESM-1可能與炎癥指標如hs-CRP及NLR共同參與冠心病發病過程。ESM-1與心血管疾病炎癥關系仍不明確，Balta等〔2〕對初診高血壓患者研究得出ESM-1與hs-CRP呈正相關，亦有文獻報道，ESM-1與hs-CRP無明顯相關性〔12〕。本研究中ESM-1與炎癥介質hs-CRP及NLR均具有相關性，但呈現較弱的相關性。Lassalle等〔8〕研究發現，炎癥介質與ESM-1存在相互影響，炎癥介質對促進ESM-1的表達有一定的作用，不同的炎癥介質對ESM-1可能存在不同的影響。腫瘤壞死因子(TNF)α及E-選擇素均可以上調ESM-1的表達，表現為時間依賴性，TNFα上調表達程度呈倍數增加，作用后2 h表達上升，18 h達高峰。而E-選擇素上調作用是迅速而短暫的，而高峰卻出現在加入TNFα后第3個小時。其他炎癥介質，如白細胞介素(IL)-1β對ESM-1表達的效應與TNFα相似。然而當TNFα、干擾素(IFN)γ同時作用時卻抑制TNFα對ESM-1的表達。因此，ESM-1與炎癥介質關系有待于進一步研究。

內皮功能紊亂貫穿于動脈粥樣硬化形成的整個發病過程，在動脈粥樣硬化每一個階段都具有可逆性，因而內皮細胞功能靶點治療在心血管疾病的治療中是可行的、有效的策略，具有非常重大的意義。應用ESM-1類似物或抑制物早期對內皮功能紊亂患者進行干預，可以延緩或逆轉冠心病發病的進程，提高冠心病患者生存率，減少致殘率、降低住院費用，改善總體生活質量，降低全球心血管疾病負擔〔18〕。Tadzic等〔19〕研究已證實，ESM-1 水平下降可降低內皮細胞活化，從而延緩動脈粥樣硬化的發展。本研究對指導臨床早期評估冠心病患者內皮功能紊亂具有重要意義，早期檢測ESM-1可以早期發現高危患者，進而早期進行干預，改善冠心病患者生活質量。朱宗成等〔20〕研究發現，ESM-1預處理后的骨髓間充質干細胞可明顯改善心臟功能及抑制心室重構。因此，ESM-1用于治療冠心病具有廣闊的前景，對ESM-1與冠心病關系的進一步研究可能對尋求冠心病的治療提供新的策略。