小鼠骨髓間充質干細胞移植途徑對肝硬化治療效果的比較

王 敏， 胡 皓， 韓 英

1.上海市兒童醫院，上海 200062；2.復旦大學附屬中山醫院內鏡中心；3.空軍軍醫大學西京消化病醫院

肝硬化是由于不同病因長期作用而引起肝臟慢性、彌漫性改變[1]。每年因各種原因所致肝硬化死亡人數高達50萬[2]。肝硬化作為肝臟病發展的終末階段，目前臨床上廣泛采用的治療策略是保護殘存肝細胞及對癥治療，但總體療效欠佳[3]。干細胞因其具有多向分化能力、免疫調節能力，可以通過定向分化成肝細胞、旁分泌免疫調節因子等作用改善肝功能[4]。實驗研究和臨床試驗[5-6]證實，干細胞治療可減輕肝硬化程度，改善終末期肝病患者肝功能,因而逐漸成為肝硬化及終末期肝病治療的新選擇。目前報道的干細胞移植途徑主要有外周靜脈、肝門靜脈、腹腔等[7]。以往研究主要將干細胞治療機制及效果作為評價內容，而對于決定干細胞定植及治療效果非常重要的干細胞移植途徑的因素[8]卻少有報道。本實驗在小鼠肝硬化模型上，對比外周靜脈、門靜脈及腹腔三種移植途徑移植骨髓間充質干細胞(mesenchymal stem cells，MSCs)治療肝硬化的效果，通過定植細胞數量、組織學及肝功能比較，評價三種移植方式的優劣。為干細胞治療終末期肝病的最優移植途徑提供理論依據。

1 材料與方法

1.1實驗動物及試劑、儀器設備4周齡雄性C57BL/6小鼠、C57BL/6-GFP+轉基因小鼠由空軍軍醫大學實驗動物中心提供[生產許可證：SCXK(軍)2007-007]。CCl4、天狼星紅購自Sigma公司，小鼠MSCs培養基、成骨誘導培養基、成軟骨誘導培養基購自廣州塞業生物技術有限公司，胎牛血清DMEM/F12、胎牛血清購自Gibco公司，流式鑒定抗體購自Biolegend公司，流式細胞儀購自BD公司，熒光顯微鏡購自Olympus公司。……