5490例性病門診患者HPV檢測結果分析

于功奇 王真真 付希安 王 川 王 娜 劉 紅 張福仁

人乳頭瘤病毒(HPV)是一種小分子雙鏈DNA病毒，對人皮膚、黏膜有高度親嗜性。目前已發現該病毒有200余種亞型，根據不同基因型與癌發生危險性的高低可分為高危型和低危型[1]，其中高危型HPV包括16、18、31、33、45、52、56、58型等，其持續性感染與子宮頸癌的發病及男性陰莖及肛周癌變密切相關；低危型HPV包括6、11型等，其感染與外生殖器尖銳濕疣等良性病變有關[1-3]。為了更好了解近年來山東地區HPV感染情況，本研究采用實時熒光定量PCR方法對2012年8月至2016年8月來本院性病門診就診的患者進行HPV(6,11型)及HR-HPV(8個型)檢測，現將結果報道如下。

1 資料與方法

1.1 標本來源 選取2012年8月至2016年8月來山東省皮膚病醫院性病門診就診的5490例檢測HPV項目的患者。其中男3195例，女2295例。年齡1個月至92歲。

1.2 標本采集 男性無菌棉拭子插入尿道2～3 cm輕輕捻動拭子采集分泌物后取出立即置于采集管中，密閉送檢(采集分泌物前2小時禁小便)；女性用無菌生理鹽水棉球洗去宮頸外分泌物，再用無菌棉拭子插入宮頸內，停5 s后旋動棉拭子采集宮頸分泌物，將棉拭子置入無菌管中，密閉送檢。尖銳濕疣患者標本的采集用無菌棉拭子刮取包皮、尿道口、大小陰唇、陰道口和肛周贅生物組織液，密閉送檢。

1.3 儀器與試劑 使用ABI7300基因擴增儀；HPV(6,11型)核酸檢測試劑盒，HR-HPV(8個型)核酸檢測試劑盒(包含16、18、31、33、45、52、56、58型)。試劑盒與質控品均為中山大學達安基因股份有限公司產品。

1.4 DNA提取及檢測 向無菌管中加入1 mL滅菌生理鹽水，渦旋震蕩，擠干棉拭子。將全部液體轉移到1.5 mL離心管中，13 800×g離心5 min，棄上清液，沉淀中加入50 μL DNA 提取液充分混勻，100℃恒溫10 min，13 800×g離心5 min。根據試劑盒要求吸取2 μL上清液作為模板加入反應管中進行PCR反應。擴增參數及結果判定嚴格按照試劑盒說明書進行。

1.5 統計學方法 采用SPSS 15.0統計學軟件進行數據分析，率的比較采用χ2檢驗，以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 5490例性病門診就診患者中有高危型HPV和低危型HPV單一感染的，也有重疊感染的，其中HPV(6,11型)陽性2016例，陽性率為36.72%。女性患者陽性753例(32.81%)，男性患者陽性1263例(39.53%)；HR-HPV(8個型)陽性1715例，陽性率為31.24%，女性患者陽性925例(40.31%)，男性患者陽性790例(24.73%)；HPV(6,11型)+HR-HPV(8個型)陽性768例，占13.99%，女性患者陽性358例(15.6%)，男性患者陽性410例(12.83%)。檢測結果顯示HPV(6,11型)陽性患者中，男性發病率高于女性，兩者差異有統計學意義(P<0.01)，而HR-HPV(8個型)陽性患者中，女性發病率高于男性，兩者差異有統計學意義(P<0.01)。5490例患者HPV(6,11型)、HR-HPV(8個型)感染情況見表1。

2.2 HPV感染的年齡分布及各年齡段的感染率 本研究中患者年齡主要集中在20～40歲，<20歲及>50歲的患者相對較少，各年齡段感染情況及構成比見圖1、表2、表3。所有數據均采用SPSS15.0統計軟件進行分析，經分析得出，不同年齡段女性HPV(6,11型)及HPV(8個型) 的感染率均有顯著差異(P<0.05)，不同年齡段男性HPV(6,11型)及HPV(8個型) 的感染率均無統計學意義。

圖1 各年齡段HPV感染情況對比圖

表1 HPV-DNA檢測結果 例

表2 男性HPV感染患者年齡分布表

表3 女性HPV感染患者年齡分布表

3 討論

HPV能引起人體皮膚黏膜的鱗狀上皮增殖，臨床上可分為高危型HPV和低危型HPV，其中低危型HPV感染尤其是HPV6型和HPV11型與外生殖器尖銳濕疣等良性病變有關[4]；高危型HPV持續性感染與子宮頸癌的發病及男性陰莖及肛周癌變密切相關[2]。隨著社會發展人們性意識發生很大變化，初次性生活低齡化及多個性伴侶等不潔性行為的增加，加大了HPV的感染風險[5]。直接性接觸為HPV主要傳播途徑[3，6]，現已嚴重威脅人們的身心健康。流行病學調查發現，HPV感染的不同型別與地區及人口有差異[7，8]，調查不同地區的感染情況，具有十分重要的臨床價值。本文通過對2012年8月至2016年8月5490例來我院性病門診就診患者的泌尿生殖系統分泌物采用實時熒光定量PCR技術對HPV(6,11型)和HPV(8個型) 的DNA進行檢測，通過本次研究的結果分析，我們發現男性更易感染低危型HPV而女性更易感染高危型HPV。山東地區女性HPV(6,11型)和HPV(8個型)的感染率隨著年齡的變化均成“U”型分布，與既往國內外報道結果相符[9，10]，感染率高峰出現在20歲以下及大于50歲，年輕女性感染率高發與性生活年齡的提前以及年輕女性宮頸免疫系統未被致敏有關。50歲后婦女進入絕經期后，生殖道免疫功能下降，清除病毒能力下降，導致高感染率[11]。而男性HPV(6,11型)和HPV(8個型)的感染率隨著年齡的變化無統計學差異。通過本次研究我們初步了解山東地區HPV感染情況，為今后臨床對HPV的預防監控及治療提供了科學依據。