遺傳性耳聾相關基因在突發性耳聾發病中的作用

常方悅　任俊宏　常新劍

【摘 要】目的：探討分析遺傳性耳聾相關基因在突發性耳聾發病中的作用。方法：選取我院2017年1月至2018年3月收治的突發性耳聾患者50例為觀察組，同期選擇健康無聽力損傷者50例為對照組。兩組均采集外周靜脈血進行DNA測序，并采用多聚酶鏈反應（PCR）擴增相關基因目片段。比較兩組基因突變率。結果：兩組GJB2、GJB3基因突變率對比差異不顯著，且P>0.05；兩組均為檢測出有意義的GJB6基因突變。結論：遺傳性耳聾相關基因在突發性耳聾發病中任何作用，即GJB2、GJB3、GJB6等基因突變與患者發病無相關性。

【關鍵詞】突發性耳聾；遺傳性；耳聾相關基因；發病作用

【中圖分類號】R47.12 【文獻標識碼】A 【文章編號】1005-0019（2018）04--01

在臨床上，突發性耳聾（sudden hearing loss）是一種感音神經性耳聾，其特點為原因不明、發生突然[1]。有的患者還會伴有惡心、嘔吐、眩暈、耳鳴，但這些癥狀不會反復發作，多數患者為單側發病，但偶有先后發生或雙側同時發生[2]。有關學者認為，遺傳因素可能與突發性耳聾發病有一定相關性，而已經提出的基因主要包括GJB2、GJB3、GJB6等[3]。因此本文即對遺傳性耳聾相關基因在突發性耳聾發病中的作用進行了探討分析，現具體報道如下：

1 一般資料與方法

1.1 一般資料 選取我院2017年1月至2018年3月收治的突發性耳聾患者50例為觀察組，同期選擇健康無聽力損傷者50例為對照組。本次研究經過醫院倫理委員會批準同意，所有患者均知曉同意。其中，對照組男31例，女19例，年齡為23-54歲，平均年齡為（38.5±10.2）歲。觀察組男29例，女21例，年齡為24-56歲，平均年齡為（37.9±11.3）歲。兩組基礎臨床資料比較差異不顯著，且P>0.05無統計學意義。

1.2 方法 兩組均采取3-5mL靜脈血，采用EDTA抗凝，采用試劑盒法提取DNA，即根據TAKERA DNA EXTRACTION KIT （50）的說明書進行嚴格炒作。然后對DNA溶液的A260以及A260/A280值采用超微量分光光度計進行測定，以衡量其純度和濃度，然后在-30攝氏度下保存所提取的DNA。由大連寶生物公司合成的引物，對GJB-2F，GJB2-2R；GJB-3F，GJB-3R；GJB-6F，GJB-6R等設計引物。取全血樣品2μLDNA，在30.2μL反應體積中，由10μmol/L引物正反向各0.2μL，14μLddH2O ，0.3μ5U/μL Tap 酶L，4.5μL 25μmol/L Mg2+Cl ，3μL 10×PCR緩沖液，6μL 0.2μmol/L d-NTP。在PCR儀上，4min 94攝氏度熱變性后，循環94攝氏度 30s—59攝氏度 30s—72攝氏度 30s，將72攝氏度延長10min，采用1.5%瓊脂糖凝膠電泳，然后對結果進行觀察。經純化PCR產物后，采用DNA Star 軟件包中的Seqman軟件比對分析測序結果序列，并與標準序列進行對比，然后對結果峰圖文件采用Chromas2.0軟件進行讀取，以確認或者排除突變基因。

1.3 觀察指標 比較兩組基因突變率。

1.4 統計學分析 采用統計學軟件spss22.0進行數據處理?？ǚ接靡詸z驗計數資料，t值用以檢驗計量資料，組間差異以P<0.05具有統計學意義。

2 結果

兩組GJB2、GJB3基因突變率對比差異不顯著，且P>0.05；兩組均為檢測出有意義的GJB6基因突變。

3 討論

近幾年，臨床上突發性耳聾呈現為發病率逐漸提高的趨勢，而其發病原因目前尚未弄清。針對此類病癥，臨床治療存在一定難度，而治療的關鍵則在于明確其發病原因。有關研究顯示，與突發性耳聾發病有關的基因最可能為遺傳性耳聾相關基因和凝血因子基因。前者主要包括凝血酶原（G20210A）＼凝血因子V萊頓（G1691A）、5，10-亞甲基四氫葉酸還原（MTHFRC677）等，而后者主要包括GJB2、GJB3、GJB6等基因。目前有關報道對遺傳性耳聾相關基因對突發性耳聾發病的作用進行了研究，但均未發現有意義的突變位點[4]。而本文的研究中，兩組GJB2、GJB3基因突變率對比差異不顯著，且P>0.05；兩組均為檢測出有意義的GJB6基因突變。該研究結果與上述研究報道一致，這表明造成突發性耳聾發病的病理基礎分子可能不是遺傳性耳聾相關基因，而未來還需對該病癥的相關基因加大、加深研究，即加大樣本量，以獲取準確的突變基因，從而為臨床治療提供可靠依據[5]。

綜上所述，遺傳性耳聾相關基因在突發性耳聾發病中無任何作用，即GJB2、GJB3、GJB6等基因突變與患者發病無相關性。

參考文獻

劉閩. 廣西地區感音神經性聾人群致病基因SLC26A4的突變研究[D].廣西中醫藥大學，2017.

曹昱. 云南地區非綜合征型耳聾患者常見耳聾基因篩查分析[D].昆明醫科大學，2017.

王欣. 尿酸與突發性耳聾關系研究及影響突發性耳聾預后的相關因素初步探討[D].河北醫科大學，2016.

金磊. 質膜Ca～（2+）-ATP酶異構體2基因的多態性與突發性耳聾關系[D].昆明理工大學，2014.

宋攀攀，張瓊敏，王延藏，陳曉云，朱翌.遺傳性耳聾相關基因在突發性耳聾發病中的作用[J].溫州醫學院學報，2013，43（04）：211-214.