抗骨增生膠囊聯合鹿瓜多肽對骨關節炎血清IL-1β、bFGF、TGF-β及關節液TIMP-1、SOD水平的影響

葉春萍 何 凡 沈翠華 吳豐寅 吳佳佳

(溫州醫科大學附屬第一醫院骨科，浙江 溫州 325000)

骨關節炎(OA)好發于老年人群，典型病理特征為關節軟骨退變，嚴重時甚至造成關節畸形〔1〕。目前臨床關于OA發病機制中較常見的為炎癥反應〔2〕，主要包括白細胞介素(IL)-1β、堿性成纖維細胞生長因子(bFGF)、C反應蛋白(CRP)等。近年來有研究表明抗氧化指標〔一氧化氮(NO)、超氧化物歧化酶(SOD)〕、轉化生長因子(TGF)-β1、基質金屬蛋白酶(MMP)因子與炎癥因子存在一定關系〔3〕。抗骨增生膠囊具有活血止痛功效，適用于OA等病癥，但關于其對OA作用是否與抗炎有關尚不明確。鹿瓜多肽主要由梅花鹿四肢骨、甜瓜籽提煉而成，能有效抑制炎癥介質釋放。本研究探討抗骨增生膠囊聯合鹿瓜多肽治療OA的療效及作用機制。

1 資料與方法

1.1臨床資料 抽取2014年2月至2016年2月溫州醫科大學附屬第一醫院就診的OA患者94例，隨機數字表法分為觀察組與對照組各47例。觀察組男27例，女20例；年齡42～75〔平均(59.3±5.2)〕歲；病程1～12〔平均(4.5±1.6)〕個月；體重45～78〔平均(58.6±4.3)〕kg；合并糖尿病12例，高血壓15例。對照組男30例，女17例；年齡45～78〔平均(59.6±5.0)〕歲；病程2～14〔平均(4.7±1.5)〕個月；體重44～76〔平均(58.4±4.0)〕kg；合并糖尿病14例，高血壓13例。納入標準：①關節腫痛、上下樓梯等疼痛加劇，X線片、CT檢查證實為OA；②入組前4 w無激素、鎮痛劑相關藥物使用史；③知情同意。排除標準：①肝、腎、肺、心嚴重病變；②類風濕關節炎、關節間隙明顯狹窄、關節腫瘤；③免疫系統疾病、精神異常、認知障礙者；④相關藥物過敏者；⑤因用藥依從性差等中途退出者。兩組年齡、病程等基線資料差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2治療方法 對照組采取鹿瓜多肽治療，鹿瓜多肽注射液(哈爾濱譽衡藥業股份有限公司生產，國藥準字H23020001)8 ml+5%葡萄糖注射液250 ml靜脈滴注，1次/d。觀察組在對照組基礎上加以抗骨增生膠囊(江蘇康緣藥業股份有限公司生產，國藥準字Z10880006)治療，1.75 g/次口服，3次/d。1個療程15 d，兩組均干預1個療程。

1.3觀察指標 ①臨床療效；②觀察記錄用藥期間患者惡心、皮疹等不良反應情況；③治療前、治療15 d后清晨空腹抽取外周靜脈血3 ml，常規抗凝干預后提取血清，保存在-20℃冰箱中待測，通過酶聯免疫吸附法(ELISA)測定IL-1β、bFGF、CRP血清炎癥因子，通過放射免疫法測定TGF-β1、胰島素樣生長因子(IGF)-1；④治療前、治療15 d后分別抽取兩組關節滑液3 ml，無菌操作，3 000 r/min離心15 min，上清液提取后保存在-70℃冰箱中待測，通過酶標儀檢測兩組關節液MMP組織抑制物(TIMP)-1，分別通過硝酸還原酶法、黃嘌呤氧化酶法、硫代巴比妥酸法測定關節液NO、SOD、丙二醛(MDA)。

1.4療效判定標準 臨床痊愈：膝骨關節疼痛等癥狀及體征消失，恢復正常工作；顯效：膝骨關節疼痛明顯緩解，行走或活動時偶爾輕微疼痛，關節活動障礙改善50%以下；好轉：膝骨關節疼痛有所緩解，關節活動障礙改善10%以下；無效：膝骨關節疼痛、活動范圍變化不大或加重。總有效率=臨床痊愈率+顯效率。

1.5統計學方法 應用SPSS19.0軟件行χ2、t檢驗。

2 結 果

2.1臨床療效 觀察組治療總有效率(91.49%，臨床痊愈30例，顯效13例，好轉4例)顯著高于對照組(78.72%，臨床痊愈24例，顯效13例，好轉10例，P<0.05)。

2.2治療前后兩組血清炎癥因子、TGF-β1及IGF-1水平變化 治療前，兩組血清IL-1β、bFGF、CRP、TGF-β1及IGF-1水平差異無統計學意義(P>0.05)；治療后，兩組均明顯下降，且觀察組明顯低于對照組(均P<0.05)。見表1。

表1 兩組治療前后血清相關炎癥因子、TGF-β1及IGF-1水平和關節液TIMP-1及抗氧化指標比較

與同組治療前比較：1)P<0.05；與對照組治療后比較：2)P<0.05

2.3治療前后兩組關節液TIMP-1及抗氧化指標變化 治療前，兩組關節液TIMP-1、NO、SOD、MDA水平差異無統計學意義(P>0.05)；治療后，兩組TIMP-1、SOD水平明顯上升，NO、MDA水平下降，且觀察組上述指標均明顯優于對照組(均P<0.05)。見表1。

2.4不良反應情況 用藥期間觀察組出現惡心、輕度皮疹癥狀各1例；對照組無不良反應發生。兩組不良反應發生率比較差異無統計學意義(P>0.05)。

3 討 論

OA基礎病變特征為軟骨損傷，其發病與力學、生物學因素密切相關〔4〕，軟骨細胞及其分泌的細胞外基質、軟骨下骨相互影響(分解、合成代謝失衡)最終造成OA〔5〕，而三者失衡是炎癥因子、相關基質通過結合特殊受體將信號傳送至細胞核，激活炎癥因子及MMP轉錄的結果。

IL-1β在OA發病過程中有重要作用：可以和軟骨細胞膜上IL-1R1結合成受體復合物，再通過結合IL-1R輔助蛋白讓細胞域之間產生異二聚化，經由C環磷酸腺苷(cAMP)等信息傳遞系統將IL-1信號激活，促使IL-1水平上升，促炎癥發生〔6〕；同時IL-1β與腫瘤壞死因子(TNF)受體因子-6存在一定關聯，可連接IL-1R1與κB誘導激酶，最終導致細胞核轉錄因子-κB被激活〔7〕。bFGF能顯著促3T3細胞增殖及有絲分裂，參與組織修復、血管再生過程。bFGF不僅可以促軟骨、骨組織形成，而且能有效促毛細血管生成〔8〕。CRP為急性時相反應蛋白，組織損傷等炎癥刺激病癥發生時其濃度明顯上升，是炎癥判斷敏感指標之一。本研究結果表明鹿瓜多肽注射液能有效改善OA患者炎癥癥狀，與鹿瓜多肽注射液藥理作用密切相關：主要含有甜瓜籽多肽、游離氨基酸等成分，其中甜瓜籽多肽不僅能促使骨關節局部毛細血管通透性降低，減少炎癥滲出，抑制炎癥介質釋放及炎癥細胞浸潤，而且還可以有效降低血液黏度，促局部血液循環，同時抑制前列腺素釋放，發揮止痛作用〔9〕。但受OA發病機制復雜影響，單一靶向治療效果較不理想，常需聯合其他作用機制藥物治療，本研究表明中西醫結合相比單純西醫治療在抑制OA患者全身炎癥癥狀上更有優勢，與牛玉祥〔10〕研究觀點一致。

TGF-β1為促修復細胞因子，OA患者中TGF-β1較高表達，經由結合細胞表面受體對細胞代謝調節，可誘導關節軟骨病變，最終導致OA發生。通常OA患者早期TGF-β1處于較高水平狀態，且早期TGF-β1水平越高，OA進展越快，這與TGF-β1破壞關節有關〔11〕。IGF-1為細胞調節因子，經由結合細胞表面受體對多種酶激活，可誘導軟骨細胞增生，抑制軟骨細胞凋亡。本研究結果表明鹿瓜多肽注射液聯合抗骨增生膠囊方案能有效減輕TGF-β1破壞骨關節，抑制IGF-1高表達以避免關節骨贅形成，延緩OA進展。MMP能降解相關細胞外基質成分，其中TIMP-1為MMP-3特異性生理抑制物，對軟骨基質裂解能避開。OA患者MMP-3處于高水平，易導致軟骨基質溶解，而TIMP-1水平上升對MMP-3有一定的抑制作用〔12〕。本研究結果顯示鹿瓜多肽注射液聯合抗骨增生膠囊能明顯提高TIMP-1水平，抑制軟骨基質裂解。另外，OA患者關節軟骨易磨損，致使膠原蛋白網絡斷裂，造成OA組織能量代謝異常，導致脂質過氧化，破壞關節軟骨，加重OA病情，反之又導致SOD活力降低，NO、MDA活力增強。本研究結果顯示鹿瓜多肽注射液聯合抗骨增生膠囊治療抗氧化作用顯著。

OA發生與炎癥因子、基質成分、生長因子等有關，且各作用機制之間存在一定關系。OA發病后機體血清IL-1β、bFGF水平上升，除了增強纖溶酶活性以破壞軟骨、基質外，還會刺激軟骨細胞產生MMP，致使MMP-3水平升高，TIMP-1水平下降，促軟骨基質分解；同時IL-1β可刺激軟骨細胞產生NO。相關報道〔13〕稱OA發病與IL-β、TIMP-1異常表達有關，IL-1β水平過高致使TIPM-1、MMP-3失衡，破壞軟骨關節，進而導致OA發生。抗骨增生膠囊中含有熟地黃、骨碎補、肉蓯蓉、淫羊藿、牛膝、雞血藤、女貞子(鹽制)等成分，具有活血化瘀、強筋骨、止痛功效，適用于關節腫脹、疼痛等OA病癥。本研究結果顯示，鹿瓜多肽聯合抗骨增生膠囊治療能明顯抑制血清IL-1β、bFGF、CRP、TGF-β1、IGF-1及關節液NO、MDA水平，顯著提高關節液TIPM-1及SOD水平，這可能是抗骨增生膠囊治療OA的作用機制。

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