飼料蛋白水平對梭魚形體指標(biāo)及血液生化指標(biāo)的影響

陳 濤，王愛民，胡 毅，倪金金，喬 幗，徐 跑，劉 波，徐鋼春，陸永生

(1.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)/湖南省特色水產(chǎn)資源利用工程技術(shù)研究中心，湖南長沙 410128； 2.鹽城工學(xué)院/江蘇省沿海養(yǎng)殖魚類飼料工程技術(shù)研究中心/江蘇省沿海池塘養(yǎng)殖生態(tài)重點實驗室，江蘇鹽城 224051； 3.中國水產(chǎn)科學(xué)研究院淡水漁業(yè)研究中心，江蘇無錫 214081)

梭魚屬于鯔形目鯔科，主要分布于中國、日本和朝鮮半島沿海，喜棲息于江河口和海灣內(nèi)，也進(jìn)入淡水中生活。梭魚肉質(zhì)鮮美、營養(yǎng)價值高，從生態(tài)養(yǎng)殖的角度來看，我國從20世紀(jì)50年代起就開始研究梭魚的人工繁殖和養(yǎng)殖技術(shù)。梭魚作為經(jīng)濟(jì)型魚類，有關(guān)它營養(yǎng)需求方面的研究有很多。張春暖等通過投喂6組脂肪水平不同的飼料，研究梭魚對脂肪的最適需求量，結(jié)果表明，梭魚適宜脂肪水平為9.30%～9.64%[1]。

蛋白質(zhì)是影響魚類生長和消化道組織的主要因素，不僅為魚類提供合成各種氨基酸，也是魚體內(nèi)酶、激素等重要物質(zhì)的主要成分[2]。飼料蛋白水平對魚類的生長有很重要的影響，當(dāng)飼料蛋白水平過低時，魚類的生長受阻，生長速率低，同時由于魚類攝入的蛋白質(zhì)不足，腸道黏膜及消化腺體細(xì)胞更新受到障礙，肝臟和胰臟維持正常生命活動的功能受損，從而引起消化機(jī)能障礙，若飼料蛋白水平長期過低，魚類的抵抗力下降，發(fā)病率將增高，但是飼料蛋白水平過高，會增加魚類肝臟的負(fù)擔(dān)，也不利于其生長，因此研究飼料蛋白水平對魚類生長的影響在水產(chǎn)養(yǎng)殖中具有重要意義[3]。

基于目前國內(nèi)外已有研究，梭魚關(guān)于飼料蛋白的研究還未見相關(guān)報道，本試驗通過投喂26%、28%、30%、32%等4種蛋白水平的飼料，研究其對梭魚形體及血液生化指標(biāo)的影響，為開發(fā)梭魚高效環(huán)保配合飼料提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗動物

試驗所用梭魚均采購自江蘇省鹽城市大豐龍辰特種水產(chǎn)養(yǎng)殖專業(yè)合作社，選取大小均勻、反應(yīng)靈敏、健康的梭魚。

1.2 試驗飼料

基礎(chǔ)飼料原料主要由魚粉、花生粕、菜籽粕、DDGS、小麥、米糠、豆油、磷酸二氫鈣、預(yù)混料組成，原料經(jīng)粉碎機(jī)粉碎，過80目篩，在基礎(chǔ)飼料中豆粕的添加量為15.00%、10.50%、6.00%、1.50%，蛋白水平分別為32%、30%、28%、26%，配制成4組蛋白水平的等能飼料，試驗飼料配方見表1。

表1 試驗飼料配方組成(干物質(zhì)基礎(chǔ))

注：預(yù)混料含各種維生素和礦物質(zhì)。

1.3 飼養(yǎng)與管理

養(yǎng)殖試驗在鹽城市大豐龍辰特種水產(chǎn)養(yǎng)殖專業(yè)合作社進(jìn)行，周期2個月(2016年7—9月)，采取池塘工業(yè)化養(yǎng)殖模式，分為4組(共12個水槽)，每組3個重復(fù)(3個水槽)，水槽長22 m、寬5 m，水深2 m，水槽容積約為200 m3，每個水槽放入2.0萬尾，平均體質(zhì)量約為93.7 g梭魚魚種，分別投喂26%、28%、30%、32%試驗飼料，每天投喂3次(06：30、12：30、17：30)，飼養(yǎng)期間保持各個水槽養(yǎng)殖條件一致，水質(zhì)清新，溶氧充足，水溫為27～28 ℃，pH值為7～8。

1.4 樣品采集

飼養(yǎng)60 d后禁食24 h，每個水槽隨機(jī)選取10尾大小均勻、健康的梭魚，用MS-222迅速麻醉，稱體質(zhì)量并測量其體長、體寬、體高、眼徑、尾柄寬等形體指標(biāo)。尾靜脈釆血，然后將梭魚解剖，取出內(nèi)臟，并稱內(nèi)臟、肝臟和胃的質(zhì)量。血清于-20 ℃下保存待測。

1.5 數(shù)據(jù)處理

試驗數(shù)據(jù)均以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示，采用SPSS 24.0軟件進(jìn)行單因素方差分析(One-Way ANOVA)和Duncan’s檢驗，數(shù)據(jù)統(tǒng)計的顯著性水平為0.05。

2 結(jié)果與分析

2.1 飼料蛋白水平對梭魚形體指標(biāo)的影響

由表2可知，隨著飼料蛋白水平的增加，梭魚的肥滿度、胃體指數(shù)、臟體指數(shù)及肝體指數(shù)均沒有明顯變化。飼料蛋白水平為30%時，梭魚的肥滿度最低；胃體指數(shù)在蛋白水平為30%時最低，在32%時最高；梭魚的臟體指數(shù)呈現(xiàn)先下降后上升的趨勢，并且在30%飼料蛋白水平時最低；肝體指數(shù)呈下降的趨勢。各組間形體指標(biāo)沒有顯著差異。

表2 飼料蛋白水平對梭魚形體指標(biāo)的影響

注：同列數(shù)據(jù)后不同小寫字母表示各組數(shù)據(jù)差異顯著(P<0.05)、字母相同或無字母表示差異不顯著(P>0.05)。下表同。

2.2 飼料蛋白水平對梭魚血液生化指標(biāo)的影響

2.2.1 飼料蛋白水平對梭魚血液蛋白代謝的影響 由圖1及表3可知，飼料蛋白水平為32%組總蛋白含量最高，飼料蛋白水平為28%組最低，2組差異顯著(P<0.05)。飼料蛋白水平為26%組白蛋白含量最高，飼料蛋白水平為28%組最低，2組差異顯著(P<0.05)。飼料蛋白水平為32%組球蛋白含量最高，飼料蛋白水平為26%組含量最低，飼料蛋白水平為32%組、30%組明顯高于飼料蛋白水平為28%、26%組(P<0.05)。

表3 飼料蛋白水平對梭魚血液生化指標(biāo)的影響

2.2.2 飼料蛋白水平對梭魚血液脂肪代謝的影響 由圖2、表3可知，飼料蛋白水平為26%組梭魚血液中的膽固醇含量最高，飼料蛋白水平為28%組膽固醇含量最低，4組差異不明顯(P>0.05)，總體呈下降趨勢；飼料蛋白水平為26%組梭魚血液中的甘油三酯含量最高，飼料蛋白水平為28%組甘油三酯的含量最低，4組差異不顯著(P>0.05)，總體呈下降趨勢。

2.2.3 飼料蛋白水平對梭魚肝功能的影響 由圖3、表3可知，梭魚血清中谷草轉(zhuǎn)氨酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、堿性磷酸酶活性差異不顯著(P>0.05)，谷草轉(zhuǎn)氨酶活性在蛋白水平為26%時達(dá)最高，在蛋白水平為28%時最低，但兩者差異不顯著(P>0.05)，蛋白水平為28%時谷丙轉(zhuǎn)氨酶含量最低，各個蛋白組間變化不顯著(P>0.05)，堿性磷酸酶分別在蛋白水平為30%、28%時達(dá)到最高和最低，但4組差異不顯著(P>0.05)。

3 討論

3.1 飼料蛋白水平對梭魚形體指標(biāo)的影響

肥滿度是魚的質(zhì)量與魚體體長立方的比值，反映的是魚類的生長情況和肥瘦程度。肥滿度高，表明魚的形體好，生長快。以往的研究表明，地區(qū)、溫度及個體性成熟年齡會對魚類的肥滿度產(chǎn)生影響。例如，通過測量云南昆明和四川2種地方裂腹魚的肥滿度發(fā)現(xiàn)，在四川飼養(yǎng)的裂腹魚的肥滿度高于云南昆明的裂腹魚[4]。李忠爐等研究渤海和黃海小黃魚時發(fā)現(xiàn)，水溫升高會導(dǎo)致小黃魚肥滿度增大，個體性成熟年齡小的小黃魚肥滿度比較小[5]。本試驗結(jié)果表明，4種蛋白水平的飼料對梭魚的肥滿度無顯著影響。這和黃姑魚研究得出的結(jié)論[6]一致，類似的結(jié)果在大黃魚[7]、寶石鱸[8]等魚類上都有發(fā)現(xiàn)。鄧偉用22%、24%、26%、28%、30%、 32%等6種不同全植物蛋白水平的顆粒飼料投喂團(tuán)頭魴，發(fā)現(xiàn)其肥滿度呈先上升后下降的趨勢，在蛋白水平為30%時達(dá)到最大，說明蛋白水平過高反而不利于團(tuán)頭魴良好體型的形成[9]。本試驗結(jié)果與團(tuán)頭魴的報道不一致，可能受到魚種、養(yǎng)殖模式和飼養(yǎng)條件等差異的影響。

內(nèi)臟質(zhì)量、內(nèi)臟指數(shù)作為評價動物生長發(fā)育程度和器官功能的2個常用指標(biāo)，在生物醫(yī)學(xué)研究中常被使用。臟體指數(shù)是內(nèi)臟質(zhì)量與體質(zhì)量的比值，用來衡量水產(chǎn)動物形體、健康狀況的指標(biāo)[10]。本試驗結(jié)果表明，26%、28%、30%、32%等4種蛋白水平飼料對梭魚的臟體指數(shù)沒有顯著影響，各試驗組間梭魚的臟體指數(shù)很接近，說明這4種蛋白水平?jīng)]有對梭魚的內(nèi)臟造成負(fù)擔(dān)，類似的結(jié)果在鯽魚中也有報道[11]。有關(guān)魚類內(nèi)臟團(tuán)增量的研究，大都是由脂肪引起的魚類內(nèi)臟增質(zhì)量，Aksnes等研究黑線鱈發(fā)現(xiàn)，由于魚類腸道外面儲存了多余的脂肪，從而使得內(nèi)臟質(zhì)量增加[12]；芙蓉鯉鯽也有類似的報道[13]。但也有研究表明，飼料蛋白水平對魚類的臟體比產(chǎn)生影響，達(dá)氏鱘幼魚的臟體比隨飼料蛋白水平的升高而呈下降的趨勢[14]，飼料蛋白水平過高，也會增加魚類內(nèi)臟的負(fù)擔(dān)，也不利于其生長[15]。本試驗結(jié)果和達(dá)氏鱘不一致，可能因為魚的品種不一樣，內(nèi)臟所能承受的蛋白水平程度也不一樣，有關(guān)梭魚內(nèi)臟所能承受的蛋白水平還須進(jìn)一步研究。

胃體指數(shù)是魚體胃的質(zhì)量與體質(zhì)量的比值。本試驗中各試驗組梭魚的胃體指數(shù)相近且沒有明顯差異，說明不同飼料蛋白水平對梭魚的胃體指數(shù)沒有顯著影響。對于魚類，胃是一個比較特殊的器官，并不是所有的魚都有胃，可以把魚分為有胃魚和無胃魚，一般偏草食性魚類具有胃，如鯽魚、鯉魚，反之肉食性魚類沒有胃。目前，還沒有飼料蛋白水平對魚類胃體指數(shù)影響的報道，因此有關(guān)飼料蛋白水平對梭魚胃體指數(shù)的影響有待進(jìn)一步研究。

在魚類上，肝臟被視為脂肪和糖原沉積的主要場所，肝體指數(shù)一般作為肝臟脂肪或者糖原蓄積的表觀指標(biāo)，肝體指數(shù)是魚類肝臟質(zhì)量與體質(zhì)量的比值。本試驗結(jié)果表明，飼料蛋白水平對梭魚的肝體指數(shù)沒有顯著影響，與寶石鱸[8]、金頭鯛、大西洋鮭和歐亞鱸的研究結(jié)果一致。以魚粉、豆粕和小麥粉作為蛋白質(zhì)源配制6種等能飼料喂養(yǎng)黃姑魚，發(fā)現(xiàn)各組的臟體比、肝體比及肥滿度的變化差異不顯著[6]。吳強(qiáng)強(qiáng)等研究發(fā)現(xiàn)，不同飼料對黃顙魚的形體指標(biāo)有一定的影響，但差異不顯著，而黃顙魚臟體比和肝體比的差異主要是由飼料中所含蛋白質(zhì)水平引起的，原因是粗蛋白給魚體肝臟帶來負(fù)擔(dān)，從而影響了臟體指數(shù)和肝體指數(shù)[16]。本試驗中各組梭魚的肝體指數(shù)沒有顯著差異，說明26%～32%的飼料蛋白水平?jīng)]有對梭魚的肝臟造成負(fù)擔(dān)。

3.2 飼料蛋白水平對梭魚血液生化指標(biāo)的影響

3.2.1 飼料蛋白水平對梭魚血液蛋白代謝的影響 蛋白代謝能力反映了機(jī)體對蛋白質(zhì)的消化利用情況。食物中的蛋白在動物體內(nèi)降解為氨基酸，被機(jī)體吸收利用合成生長所需的蛋白。總蛋白含量、白蛋白含量、球蛋白含量及白球比是評價動物蛋白代謝的主要指標(biāo)。球蛋白是機(jī)體的免疫蛋白，參與機(jī)體防御，保護(hù)動物不受外來入侵。白蛋白的含量在血液中較高，且會受到攝入蛋白量的影響，通常用以修復(fù)并保護(hù)破損的蛋白質(zhì)，維持血液環(huán)境的穩(wěn)定。

彭士明等在針對黑鯛的研究中發(fā)現(xiàn)，在正常范圍內(nèi)，隨著蛋白水平的提高，魚類的蛋白質(zhì)積累量逐漸增加[17]。邵慶均等在研究飼料蛋白水平對寶石鱸的生長影響試驗中發(fā)現(xiàn)，33%蛋白組中的肌肉蛋白含量顯著高于23%和28%蛋白組[8]。本試驗中梭魚體內(nèi)的蛋白含量隨著蛋白水平的提高而表現(xiàn)出顯著差異，與黑鯛和寶石鱸的研究相一致。高蛋白的飼料能夠給梭魚提供更多的蛋白質(zhì)，魚類所能獲取的氨基酸量更多，直接促進(jìn)魚類的生長，魚類的蛋白代謝速率提高，血液中的蛋白含量相應(yīng)上升。

3.2.2 不同蛋白水平對梭魚血液脂肪代謝的影響 血清中的脂類是反映魚體脂肪代謝的指標(biāo)，魚類會從食物中吸收自身生長所需要的營養(yǎng)物質(zhì)，過量的脂類物質(zhì)會被轉(zhuǎn)移到肝臟組織中。相應(yīng)地，肝臟中累積的內(nèi)源性脂肪也會轉(zhuǎn)移到外部。而這些過程中脂肪的轉(zhuǎn)運(yùn)工作都是以血液為載體進(jìn)行的。因此，魚類的脂肪代謝水平會在血液指標(biāo)中得到體現(xiàn)。

在研究吉富羅非魚[18]的過程中也發(fā)現(xiàn)，飼料中蛋白質(zhì)含量升高時，粗脂肪含量在減少，同樣的結(jié)論在馬來西亞鯰魚[19]和石斑魚[20]身上也得到了體現(xiàn)。而針對四須鲃[21]和棕鱒[22]的研究發(fā)現(xiàn)，魚類的脂肪代謝與飼料的蛋白水平?jīng)]有體現(xiàn)出任何線性關(guān)系。

本試驗結(jié)果顯示，總膽固醇和甘油三酯含量在28%蛋白組中均出現(xiàn)了最小值，且整體呈現(xiàn)出下降的趨勢，表明高蛋白會抑制梭魚血液脂肪的代謝。結(jié)果與吉富羅非魚、馬來西亞鯰魚和石斑魚的研究結(jié)果相一致，但與四須鲃和棕鱒的研究結(jié)果不符。可能是因為魚種不同，因此各個種類間脂肪沉淀的程度不同。當(dāng)飼料中的蛋白質(zhì)不足，魚類會繼續(xù)攝食來維持自身的生長和活動，導(dǎo)致更多的脂肪積累。在不同的生長時期，魚類對蛋白的需求量也有所變化，關(guān)于飼料蛋白水平對魚體脂肪代謝的影響機(jī)制仍有待深入研究。

3.2.3 不同蛋白水平對梭魚肝功能的影響 轉(zhuǎn)氨酶是評價動物肝臟功能很重要的指標(biāo)，谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)和谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)是動物體內(nèi)2種重要的酶，主要參與氨基酸代謝，在機(jī)體處于正常狀況時，血清中ALT和AST的活性較低，當(dāng)日糧中的營養(yǎng)物質(zhì)與動物所需不相符合或者動物受到脅迫作用時，特別是當(dāng)肝臟受損時，將會提高血清中ALT和AST的活性。本試驗結(jié)果顯示，隨著蛋白水平的升高，ALT和AST的活性沒有呈現(xiàn)升高的趨勢，意味著梭魚的肝臟組織沒有受到損害，各組梭魚的健康狀況良好，本試驗結(jié)果與大黃魚的結(jié)果[7]一致。ALT和AST在肝臟中的主要功能是負(fù)責(zé)將特定氨基酸的1個氨基轉(zhuǎn)移到另一個氨基酸上，參與氨基酸代謝。飼料中蛋白含量過高或者碳水化合物的比例過大都會造成肝臟中ALT和AST水平升高，本試驗中2種酶的活性都沒有隨著蛋白水平的升高而增加，說明32%飼料蛋白水平?jīng)]有超過梭魚肝臟所能承受的范圍。

堿性磷酸酶在動物的各種組織細(xì)胞中普遍存在，在肝臟細(xì)胞中活性最高，它是生物體內(nèi)調(diào)節(jié)鈣磷代謝、參與磷酸基團(tuán)轉(zhuǎn)移的重要調(diào)控酶。有研究表明，堿性磷酸酶能改變病原體的結(jié)構(gòu)，從而使病原體能更容易被機(jī)體識別和吞噬。有團(tuán)頭魴的研究表明，當(dāng)飼料蛋白水平由35%下降到25%時，團(tuán)頭魴幼魚的堿性磷酸酶活性沒有顯著變化[23]；本試驗結(jié)果表明，當(dāng)飼料蛋白含量從26%增加到32%時，梭魚血清中堿性磷酸酶的活性沒有顯著變化，說明梭魚屬于健康狀態(tài)，和團(tuán)頭魴的研究結(jié)果一致，類似的結(jié)果在星川斑魚上[24-25]也有發(fā)現(xiàn)。有關(guān)飼料蛋白水平對魚類堿性磷酸酶活性的影響的報道不多，有待于進(jìn)一步研究。

4 結(jié)論

飼料蛋白水平在26%～32%范圍內(nèi)，梭魚形體特征正常，未受影響；飼料蛋白水平在26%～32%范圍內(nèi)，高蛋白水平會促進(jìn)血液中蛋白質(zhì)的代謝，抑制脂肪代謝，對肝功能沒有影響。