寧夏回族高血壓過氧化物酶體增殖物激活受體γ2基因多態性與血脂關系的探討

劉海燕 張曉伏 徐清斌

【摘要】 目的：探討寧夏回族高血壓PPARγ2基因多態性與血脂的關系。方法：收集寧夏回族146例EH患者、回族112例NT者，采用聚合酶鏈反應限制性片段長度（PCRRFLP）多態性技術檢測PPARγ2 Pro12Ala基因多態性，進一步分析寧夏回族高血壓各基因型與血脂的關系。結果：寧夏回族人群Ala12攜帶者（PA/AA）的基因型分布及A等位基因頻率在EH組和NT組間差異無統計學意義（P>0.05），寧夏回族高血壓PA/AA基因型組甘油三酯水平低于PP基因型組，差異有統計學意義（P<0.05），在TC、HDLC、LDLC、BMI上差異無統計學意義（P>0.05）。結論：PPARγ2 Pro12Ala基因變異與寧夏回族高血壓病無顯著關聯；PA/AA型高血壓患者甘油三酯水平顯著低于PP型者。

【關鍵詞】 過氧化物酶體增殖物激活受體；多態性；寧夏回族；血脂

過氧化物酶體增殖物激活受體（PPAR）是人類重要的核轉錄因子之一，其亞型PPARγ是參與調節糖、脂質代謝重要因子，PPARγ基因是一種遺傳易感基因，Pro12Ala為PPARγ基因最常見的多態位點[1]，此變異與代謝綜合征的關系是當今研究的熱點之一，不同的種群研究結果不一，在此筆者關注的是PPARγ2基因Pro12Ala突變與寧夏回族高血壓人群血脂的關系。

1材料與方法

1.1研究對象

研究對象來自2009年12月至2010年10月在寧夏醫科大學總醫院門診體檢及住院且長期居住于寧夏的回族個體。高血壓組（EH組）146例，男74例、女72例，平均年齡（48.28±16.03）歲。正常對照組（NT組）112例，男63例、女49例，平均年齡（45.1±16.16）歲。

1.2方法

1.2.1收集一般臨床資料，如姓名、年齡、性別、民族、家族史等。測量身高、體質量，計算體質量指數BMI。

1.2.2生化指標清晨空腹12h抽取外周的靜脈血，行生化檢查檢測血尿酸（UA）、空腹血糖（GLU）、尿素氮（BUN）、肌酐（Cr）、總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）等。

1.2.3外周血抽提DNA靜脈血EDTA-Na抗凝使用DNA小量抽提試劑盒提取血液基因組DNA。

1.2.4PCR擴增引物利用Premier5.0軟件設計，上游引物為5CAAGCCCAGTCCTTTCTGTG3，下游引物為5AG TGAAGGAATCGCTTTCCG3。PCI反應體系20μL，反應條件：94℃預變性3min，94℃變性30s，50℃退火30s，

基金項目：寧夏醫科大學青年基金項目（XQ2012010）

72℃延伸30s，循環35次，72℃延伸10min。對PCR擴增產物進行酶切，酶切產物經電泳系統電泳并軟件分析電泳結果。

1.2.5PCRRFLP分析結果受檢者DNA經PCR擴增后，可產生267bp特異擴增產物。擴增產物HpaII酶切后，Pro12野生純合子（PP）呈二個電泳帶型224bp，43bp，A la12突變純合子（AA）呈一個電泳帶267bp，Pro12A la突變雜合子（PA）電泳帶呈三個電泳帶267bp、224bp和43bp。見圖1。

1.3統計學處理

采用SPSS 17.0軟件進行數據分析，組間計量資料用（±s）表示，計數資料以頻數表示，組間均數比較用t檢驗，方差不齊采用近似t檢驗。計數資料頻數比較用χ2檢驗。檢驗水準a=0.05。

2結果

2.1EH組和NT組一般臨床資料

EH組和NT組在年齡、性別、TC、HDLC、LDLC上無統計學差異（P>0.05）；在收縮壓、舒張壓、BMI、TG上有統計學差異（P<0.05）。見表1。

2.2EH組和NT組PPARγ2基因型及等位基因比較

兩組PP、PA和AA三種基因型總體分布頻率無統計學差異（χ2=2.118，P=0.282），P、A等位基因間差異無統計學意義（χ2=2.054，P=0.152）。見表2。

2.3寧夏回族高血壓PPARγ2不同基因型間血脂水平的比較

PA/AA基因型組和PP基因型組的TG水平有顯著差異（P<0.05），在TC、HDLC、LDLC、BMI上差異無統計學意義（P>0.05）。如表3。

3討論

Pro12Ala基因多態性位于PPARγ2外顯子B上，由于第34位核苷酸C→G的替換，而造成PPARγ2特有氨基酸序列發生改變，從而引起其功能的變化。Ala等位基因頻率在不同種族中有差異，日本人為4%、薩摩亞人為8%、美國人為10%[2]。本研究發現寧夏回族高血壓人群與正常人群A等位基因分別為7.5%和4.5%，與上述報道亦有所差異。

回族是我國具有代表性的少數民族之一，寧夏是我國回族聚居的主要地區之一，由于回族禁止與非信仰伊斯蘭教的民族間通婚，因此形成了遺傳上相對隔離的“隔離群體”。通過比較發現，本研究與既往多個研究結果存在差異，可能是樣本量大小、基因多態性位點的作用強度不同、不同種群的遺傳背景差異以及疾病、飲食習慣等不同導致的上述差異。總之，全面認識PPARγ2 Pro12Ala基因變異與寧夏回族高血壓、血脂紊亂的相關性對研究我國不同人群代謝綜合征的發病機制、早期預防及臨床治療起指導作用。

參考文獻

[1] 張玉領，陳培，劉家秀.過氧化物酶體增殖物激活受體γ2基因Pro12Ala多態性與2型糖尿病相關性的Meta分析[J].中國糖尿病雜志，2013，21（05）：412415.

[2] 鄭萍，秦勤.PPARγ基因多態性與冠心病及其危險因素相關性研究概況[J].中國分子心臟病學雜志，2012，12（02）：121124.

[3] 張曉伏，李新茹，薛新宏，等.過氧化物酶體增殖物激活受體γ2基因Pro12Ala多態性與寧夏漢族原發性高血壓的關系[J].中國煤炭工業醫學雜志，2017，30（08）：885889.

[4] 張曉伏，李新茹，薛新宏，等.過氧化物酶體增殖物激活受體γ2基因Pro12Ala多態性與寧夏回、漢族原發性高血壓的關系[J].臨床心血管病雜志，2018，34（01）：4751.

[5] 李秀麗，章琳，李影娜，等.PPARγ_2基因Pro12Ala多態性與2型糖尿病及其一級親屬血脂的相關性研究[J].西安交通大學學報（醫學版），2013，34（05）：632636.