子癇前期發(fā)病與Hif-1α和PLGF表達異常

周小燕，余娟娟

子癇前期是妊娠期特有的疾病，其發(fā)病率國內(nèi)大約在9.4%[1]。近年來，隨著對子癇前期疾病的研究不斷深入，母嬰預(yù)后雖然具有明顯的改善，但是對于子癇前期疾病的發(fā)病機制仍然不十分明確。為了探討子癇前期發(fā)病與缺氧誘導(dǎo)因子1α(hypoxia-inducible factor-1α，Hif-1α)和胎盤生長因子(placental growth factor，PLGF)表達的相關(guān)性，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1臨床資料在我院2010年2月至2012年2月收治的子癇前期患者中選取60例為研究對象，年齡(27.5±3.2)歲，孕周(35.4±2.3)周。本組60例患者均符合《婦產(chǎn)科學(xué)》第6版診斷要求，同時根據(jù)分類標準將60例患者分為輕度子癇前期30例、重度子癇前期30例。同時選擇30例正常妊娠者作為對照組，年齡(27.4±3.5)歲，孕周(35.5±2.1)周。上述3組患者均無原發(fā)性心臟病、高血壓以及糖尿病等。3組年齡、孕周等一般資料比較P>0.05，差異無統(tǒng)計學(xué)意義。

1.2方法

1.2.1標本的采集3組孕婦均胎盤娩出后5 min內(nèi)，立即選取母體面中央部位的胎盤組織，大小2.0 cm×1.5 cm×0.5 cm，采用生理鹽水沖洗后，放置在4%甲醛溶液中固定24 h以上進行檢查。

1.2.2檢測方法臨床對胎盤組織中Hif-1α和PLGF均采用免疫組化法檢測：將制作好的標本常規(guī)脫水，采用石蠟包埋并制作成3 μm厚度的連續(xù)切片，經(jīng)過HE染色判斷其質(zhì)量后，采用鏈霉素抗生物素蛋白—過氧化物酶連接法進行檢測。Hif-1α兔抗人多克隆抗體及PLGF鼠抗人單克隆抗體購自武漢博士德生物工程有限公司，免疫組化檢測試劑盒購自福州邁新生物工程技術(shù)有限公司。操作步驟嚴格按照試劑盒說明書進行。陰性對照采用磷酸鹽緩沖溶液代替一抗。最后根據(jù)檢測的著色強度和面積進行評分：①著色強度：沒有著色為0分，淺黃色為1分，棕黃色為2分，棕褐色為3分；②著色面積：5%以下為0分，5%～25%為1分、25%～50%為2分、50%～75%為3分，75%以上為4分。上述兩項結(jié)果相加得出最后總得分，其中0～1分為陰性(-)、2～3分(+)、4～5分為(++)，6～7分為(+++)。

2 結(jié)果

2.13組胎盤組織中Hif-1α的表達隨著患者病情加重，Hif-1α蛋白的表達呈現(xiàn)增加的趨勢。其中輕度子癇前期組和重度子癇前期組中Hif-1α蛋白表達強度均比對照組高(均P<0.05)，而重度子癇前期組和輕度子癇前期組比較，表達也明顯升高(P<0.05)，見表1。

表1 3組孕產(chǎn)婦Hif-1α表達情況(n=30) 例(%)

注：①與對照組比較，P<0.05；②與輕度子癇前期組比較，P<0.05。

2.23組孕婦胎盤組織中PLGF的表達隨著患者病情加重，PLGF的表達呈現(xiàn)降低的趨勢。其中輕度子癇前期組和重度子癇前期組中PLGF表達強度均比對照組低(P<0.05)，重度子癇前期組中PLGF表達強度高于輕度子癇前期組，兩組相比P>0.05，差異無統(tǒng)計學(xué)意義，見表2。

表2 3組孕產(chǎn)婦PLGF表達情況(n=30) 例(%)

注：①與對照組比較，P<0.05。

2.3Hif-1α和PLGF表達的相關(guān)性分析通過對Hif-1α和PLGF表達的相關(guān)性分析，胎盤Hif-1α與PLGF的表達呈負相關(guān)(rs=-0.46，P<0.05)。

3 討論

子癇前期屬于妊娠期高血壓疾病中一種類型，其病理改變主要是由于小動脈痙攣、血管內(nèi)皮細胞損傷以及全身器官的血液灌流量下降等造成的。此種疾病對母嬰健康具有極大的危害，嚴重將會導(dǎo)致母嬰死亡[2]。研究表明，子癇前期發(fā)病主要是由于胎盤滋養(yǎng)細胞凋亡以及血管內(nèi)皮細胞激活與損傷造成，而胎盤形成缺陷以及胎盤淺著床導(dǎo)致胎盤缺氧、缺血是造成子癇前期發(fā)病的主要原因。[3]Hif-1α蛋白主要是細胞缺氧應(yīng)激所產(chǎn)生的轉(zhuǎn)錄激活因子，是缺氧調(diào)節(jié)通路上的關(guān)鍵環(huán)節(jié)之一，同時缺氧也是誘導(dǎo)Hif-1α蛋白表達的關(guān)鍵因素[4-7]。本研究結(jié)果，輕度子癇前期組和重度子癇前期組中Hif-1α蛋白表達強度均比對照組高(P<0.05)，而重度子癇前期組中Hif-1α蛋白表達強度強于輕度子癇前期組(P<0.05)。說明在缺氧的情況下，Hif-1α和Hif-1β形成的二聚體更加穩(wěn)定，進而造成Hif-1α在子癇前期患者胎盤組織中降解減少，表達隨著疾病加重而增加[8-9]。

而PLGF是血管內(nèi)皮生長因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)家族中的一員，其與VEGF有高度的同源性，PLGF經(jīng)過轉(zhuǎn)錄后加工修飾，將會產(chǎn)生不同的蛋白亞型[10]。研究表明，PLGH在胎兒和成體發(fā)育的血管形成中具有重要的作用，妊娠期PLGH表達的增強將會促進滋養(yǎng)細胞增殖和分化，進而誘導(dǎo)內(nèi)皮細胞增殖、抗內(nèi)皮細胞凋亡，最終保證胎盤血管網(wǎng)充分形成[11]。但是，如果PLGF的合成和分泌出現(xiàn)減弱，則會導(dǎo)致滋養(yǎng)細胞增殖活性轉(zhuǎn)化浸潤活性受阻，最終導(dǎo)致胎盤淺著床、胎盤缺氧、缺血[12-13]。本研究結(jié)果，隨著患者子癇前期病情加重，PLGF的表達呈現(xiàn)降低的趨勢。輕度子癇前期和重度子癇前期中PLGF表達強度均比對照組低(均P<0.05)說明本研究中患者PLGF的表達異常，將會導(dǎo)致胎盤缺氧、缺血，進而造成子癇前期的發(fā)生。另外，通過對Hif-1α和PLGF表達的相關(guān)性分析可以得知，胎盤Hif-1α表達與PLGF的表達呈負相關(guān)(r=-0.46，P<0.05)，說明在子癇前期發(fā)生中，胎盤Hif-1α表達與PLGF的表達相互影響、相互作用，進而導(dǎo)致子癇前期疾病的發(fā)展。以上提示胎盤Hif-1α和PLGF可作為血清標志物，其在子癇前期臨床監(jiān)測及診治中具有一定的應(yīng)用價值。

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