雞白痢沙門氏菌的凈化效果監測

文│李澤宇 楊靖（新疆農業職業技術學院）

沙門氏菌病是一種多種動物共患的傳染病，其病原是沙門氏桿菌。根據病原特點，它可以分為三種不同的疾病，即禽傷寒、地方流行性禽副傷寒和雞白痢。近年來，雞白痢沙門氏菌流行廣泛，給養禽業造成了嚴重的影響和較大的經濟損失。為了解新疆維吾爾自治區規模化肉種雞場雞白痢沙門氏菌的感染情況，分6批從4棟雞舍采集血清2400份，進行雞白痢沙門氏菌抗體檢測，并對雞場采取了凈化措施。現將監測及凈化情況報告如下。

一、材料與方法

北京中海動物保健科技公司生產的雞白痢平板凝集抗原、標準陽性血清，實驗室提供微量移液器（eppendorf公司），滅菌高壓鍋，離心機等實驗所需儀器設備。

二、 實驗樣品

1.血清樣品采集。分六批采集新疆維吾爾自治區昌吉市某規模化父母代肉種雞場A、B、C、D4棟雞舍血清檢測樣品共2400份，每棟雞舍均每次均采集100份血清，六批采集時間分別為：14周齡、18周齡、22周齡、26周齡、30周齡和34周齡。

2.血清樣品采集的方法及樣品儲存。從雞翅靜脈采血，血液采集后用低速常溫離心機提取血清即樣品，即送實驗室檢測或置于-20℃冰箱儲存備用。

3.可疑沙門氏菌病雞病料的采集。根據現場剖檢病變及結合血清學檢測結果，采集可疑的沙門氏菌病雞病料，包括心血、肝臟、脾臟等，置于-80℃冰箱儲存備用。

三、實驗方法與判定

1.血清樣品處理。樣品：從冰箱取出待檢血清。

對照：用北京中海動物保健科技公司生產的雞白痢平板凝集標準陽性血清及陰性血清。

2.試驗方法步驟。

（1）滴加抗原。取一塊潔凈的玻璃板劃出方格，或用平板凝集反應板，在板上編號，將雞白痢標準抗原充分混勻，用移液器或滴管吸取雞白痢標準抗原，垂直滴1滴（約0.05毫升）于平板各格上。

（2）滴加血清。在第一格抗原上滴加雞白痢標準陽性血清1滴，在第二格抗原上滴加陰性血清1滴，其余各格為樣品檢測格（每只雞一格），用移液器吸取血液1滴（約0.05毫升）滴加在抗原滴上。

（3）混勻。用滅菌牙簽迅速將血清與抗原攪拌混勻，并散開至直徑約為2厘米的薄層后，輕輕晃動玻板，觀測5分鐘，判定結果并記錄。

3.結果判定。需同時符合在陽性對照血清液體出現100%凝集和陰性對照血清液體完全無凝集現象的前提下，判定結果為有效。雞白痢標準抗原與待檢血清混勻后，于1分鐘內出現很多大塊的凝集顆粒，而且底液清亮的判為強陽性反應，記錄為“#”；在1～3分鐘內出現很多大小不等的凝集顆粒，而且底液略有混濁的判為中強度陽性反應，記錄為“++～+++”；在3～4分鐘后，出現少量細微顆粒，底液較混濁的，判為弱陽性反應，記錄為“+”；在4分鐘內眼未見凝集現象發生或在4分鐘以后出現不明顯的凝集現象的判為陰性反應，記錄為“-”。

四、數據處理與統計分析

用EXCEL軟件進行原始數據處理，用SPSS 11.5對試驗數據進行t檢驗。

五、沙門氏菌的分離、培養及鑒定

將無菌采集的病料（肝臟和心血）接種于沙門氏菌選擇培養基中，進行沙門氏菌的分離、然后采用形態學、生理生化特性鑒定的方法，對分離的沙門氏菌進行鑒定。

六、凈化措施

1.淘汰陽性雞只。根據檢測結果，對所檢測的A、B、C、D4棟雞舍中，血清平板凝集檢測結果為陽性的雞只嚴格淘汰。同時，按照“種公雞進行全檢，種母雞按1%左右的比例進行抽檢”的原則，對雞場其他雞舍也進行了抽檢，及時了解雞場整體雞群白痢沙門氏菌的感染情況，堅決淘汰陽性雞只。

2.及時淘汰病死雞。在淘汰陽性雞只的同時，加強對雞群的觀察，密切監視雞群狀態，對有臨床癥狀的病雞及已死亡雞只及時淘汰，并進行無害化處理。

3.加強飼養管理。采用全價飼料喂養，確保雞只營養均衡。及時清除糞便，并對糞便做無害化處理。嚴格執行養雞場的衛生管理制度，雞場每天用1∶500的二氯異氰尿酸鈉消毒2次，雞場大門口消毒池也用該消毒液對出入車輛進行消毒。加強雞場人員管理，嚴格控制人員出入，設有人員出入專門通道，對出入雞場人員采用紫外線進行全身消毒，同時，在人員出入消毒池內放置1∶200二氯異氰尿酸鈉消毒，確保消毒效果。

4.敏感藥物進行防治。藥敏試驗發現，對該雞場的雞白痢沙門氏菌比較敏感的藥物分別為：頭孢噻呋、氟派酸、恩諾沙星、慶大霉素、卡那霉素等。根據國家及自治區關于雞白痢凈化規程，對雞群選用恩諾沙星、氟派酸、頭孢噻呋等輪換用藥進行治療。

七、結果與分析

1.第一次雞白痢血清抗體陽性率分析。從表1可以看出：14周齡400份血清中，結果陽性總數為149份，總陽性率為37.25%，其中，強陽性53份，強陽性率13.25%；弱陽性96份，弱陽性率24.00%。

2.第二次雞白痢血清抗體陽性率分析。從表2可以看出：18周齡400份血清中，結果陽性總數為116份，總陽性率為29.00%，其中，強陽性39份，強陽性率9.75%；弱陽性77份，弱陽性率19.25%。

3.第三次雞白痢血清抗體陽性率分析。從表3可以看出：22周齡400份血清中，結果陽性總數為89份，總陽性率為22.25%，其中，強陽性34份，強陽性率8.5%；弱陽性55份，弱陽性率13.75%。

4.第四次雞白痢血清抗體陽性率分析。從表4可以看出：26周齡400份血清中，結果陽性總數為72份，總陽性率為18.00%，其中，強陽性19份，強陽性率4.75%；弱陽性53份，弱陽性率13.25%。

5.第五次雞白痢血清抗體陽性率分析。從表5可以看出：30周齡400份血清中，結果陽性總數為33份，總陽性率為8.25%，其中，強陽性7份，強陽性率1.75%；弱陽性26份，弱陽性率6.50%。

表1 昌吉市某規模化肉種雞場第一次雞白痢血清抗體陽性率匯總表

表2 昌吉市某規模化肉種雞場第二次雞白痢血清抗體陽性率匯總表

表3 昌吉市某規模化肉種雞場第三次雞白痢血清抗體陽性率匯總表

6.第六次雞白痢血清抗體陽性率分析。從表6可以看出：34周齡400份血清中，結果陽性總數為17份，總陽性率為4.25%，其中，強陽性1份，強陽性率0.25%；弱陽性16份，弱陽性率4.00%。

表4 昌吉市某規模化肉種雞場第四次雞白痢血清抗體陽性率匯總表

表5 昌吉市某規模化肉種雞場第五次雞白痢血清抗體陽性率匯總表

表6 昌吉市某規模化肉種雞場第六次雞白痢血清抗體陽性率匯總表

八、沙門氏菌分離培養及鑒定結果

1.沙門氏菌形態學鑒定結果。按照細菌分離培養方法，從病雞的肝臟、心血中分離到沙門氏菌，用革蘭氏染色后，在顯微鏡油鏡下觀察，可以看到革蘭氏紅色陰性桿菌，兩端鈍圓，形態較小，無莢膜、無芽孢，完全符合沙門氏菌的形態學特征。

2.沙門氏菌的培養特性、生理生化及培養特性鑒定結果。培養特性：將按照細菌培養方法分離到的細菌，接種在普通營養瓊脂培養基上，在37℃的恒溫培養箱中生長培養24小時后，形成圓形、中等大小、無色半透明、表面光滑、邊緣整齊的菌落；接種在麥康凱瓊脂培養基上，在37℃的恒溫培養箱中生長培養24小時后，生長出無色菌落；接種在SS.培養基上，在37℃的恒溫培養箱中生長培養24小時后，生長出的菌落是圓形、表面光滑濕潤，無色透明或半透明、邊緣整齊，菌落中心呈黑褐色；接種在三糖鐵瓊脂斜面上，可以看到斜面為紅色，底部變黑并產氣。

生理生化特性：分離的細菌能發酵葡萄糖、麥芽糖、甘露醇和山梨醇產氣；不能使乳糖、蔗糖和側金盞花醇發酵；不產吲哚，V-P反應為陰性；不水解尿素和對苯丙氨酸不脫氨；枸櫞酸鹽試驗呈陰性。

九、分析與討論

1.結果分析。從結果分析可知，對昌吉市某規模化肉種雞場4個圈舍不同日齡的雞群分六批進行檢查，每次各檢測400份血清。第一次是對14周齡雞群進行血清學檢測，結果陽性總數為149份，總陽性率為37.25%，其中，強陽性53份，強陽性率13.25%；弱陽性96份，弱陽性率24.00%。針對感染情況，采取淘汰陽性雞只，淘汰病死雞，采用頭孢噻呋等敏感性強的藥物進行治療，加強消毒與通風等措施，雞白痢陽性率明顯下降。20周后，陽性率由37.25%下降到4.25%，下降了33個百分點。其中，強陽性1份，強陽性率0.25%；弱陽性16份，弱陽性率4.00%。

2.討論。考慮到昌吉市養禽業的實際情況及本地養禽業的發展，結合國家及自治區關于雞白痢的相關規定，在有效監測的基礎上，采取淘汰陽性雞只、藥物治療、加強飼養管理等綜合方法凈化肉種雞場雞白痢，取得了較好的效果。今后，在取得已有成績的基礎上，進一步加強肉種雞場雞白痢的凈化工作，選擇凈化的種源，嚴格從信譽度高的祖代雞場引進種雞；加強日常監測，堅決淘汰感染雞群；加強種蛋及孵化管理，嚴防雞白痢沙門氏菌感染，為客戶提供優質雞苗。