新生兒臍血的網織血小板與產婦全血的網織血小板的相關性

李可成，劉艷萍，張華玲

(1.柳州市人民醫院檢驗科，廣西 柳州 545006；2.柳州市中醫醫院肺病科，廣西 柳州 545001)

網織血小板(Reticulated platelet，RP)在骨髓中能夠分泌到人體外圍血液內也即人體血循環內最為年輕也是尚未成熟狀態的血小板，是一種網絡狀的染色物。該指標所反映的是骨髓內血小板的生成狀態。它在血小板削減性病癥的診治與鑒別診治方面，發揮著關鍵性的功能。由于母親與胎兒的血流于胎盤內存在著緊密的組織學關系，產婦全血網織血小板能夠經由“血-胎盤屏障”的渠道轉移至正處于生長發育的胎兒體內[1]。本研究旨在分析是新生兒臍血的網織血小板與產婦全血的網織血小板的相關性，現報告如下。

1 資料與方法

1.1一般資料：隨機選取我院的年齡在26～38歲的身體健康的產婦100例為研究對象，其中孕周37～42周為滿足足月妊娠的產婦95例，不足37周屬于早產孕婦5例(注：本試驗中孕周都不低于35周)。新生兒男55例,女45例；平均體重(3 407.36±438.41)g，其中2.5～4.0 kg(即體重正常的新生兒)74例(其中，足月的新生兒71例，早產兒3例)，不足2.5 kg(即低體重的新生兒)10例(其中，足月的新生兒7例，早產兒3例)，超出4.0 kg新生兒18例[2]。

1.2儀器設備：Sysmex XN-9000全自動血液體液分析儀及其配套原廠試劑及其校準品和質控品。

1.3測定方法：孕婦入院待產時,使用無菌一次性注射器留取2 ml孕婦靜脈血,納入產婦組；分娩時留取2 ml臍靜脈血,納入新生兒臍血組；均用EDTA抗凝,顛倒混勻。通過使用Sysmex XN9000 PLT-F通道進行檢測，Fluorocell PLT 為 PLT-F 通道檢測專用熒光染料，高特異性(與CD41/61免疫學PLT檢測相當)，靜脈血在 CBC+DIFF+PLT-F模式下進行檢測，網織血小板以IPF(%)由配套軟件自動計算得出。

2 結果

100例產婦全血網織血小板和新生兒臍血的網織血小板無論是RP%平均值還是數量而言，差異均有統計學意義(P<0.05)，且新生兒臍血中的網織血小板含量要遠低于產婦全血的網織血小板的含量，見表1。通過相關性研究發現，100例產婦全血網織血小板和新生兒臍血的網織血小板之間RP%平均差異4.124 92，標準誤1.761 33，P=0.133，兩者并不存在著內在的相關性(P>0.05)。

品名例數RP%平均值RP(×109/L)產婦全血網織血小板10012.61±2.1314.32±2.41新生兒臍血網織血小板1009.32±3.3132.15±3.07P值0.0020.001

3 討論

根據相關的研究表明，網織血小板內胞漿留有不少的mRNA與粗面內質網，能夠保留并合成不多的蛋白質性能，其對凝血酶原受體激動肽(TRNP)的刺激會發生更為明顯的反應性，而膜外表能夠表達出更為豐富的CD62P，即凸顯出止血的活性。由于其體積比較大，TO能夠通過膜和漿中的RNA發生特異性結合，同時在很大程度上強化熒光的強度，從而有助于開展流式細胞儀的測試。出于確定所檢測的細胞是屬于網織血小板，一般借助于CD41加以測定[3-4]。在檢測網織血小板的過程中，RP網絡狀的結構屬于細胞質內所殘留的RNA，因為網絡狀的結構并不大，同時數量不多，在一般的光鏡下測試時并不容易，因此，在測定RP 檢時，在很長的一段時期中都沒有被使用于臨床學內。1986 年，Lee 等學者發現了可以和活細胞RNA物質相融合的熒光色素-噻唑橙(Thiazole orange,TO)，并在4年之后，運用到作RNA熒光的染料物質，借助于流式細胞儀則能夠容易地測定包括RNA的血小板，據此構建起RP 智能化的計數方法。該方法雖然比較地精確，然而試驗周期長，同時，結果也容易受到標本內網織紅細胞所產生的熒光影響。Richards 等學者對以上方法加以改進，然而仍舊存在著操作流程過于復雜與費時等不足之處。渡道清明等學者構建起基于奧黃 (AuramineO,AO)當做RNA主要染料的RP智能化計數法，此法有著良好的精確度，同時所制定的標本能夠維持在1/2 d。其最大的特征在于測定外周血標本所花費的時間只有78s。從而為臨床學的應用提供了有利的條件。外周血RP的測定，主要有助于血小板減少癥的病因學診斷，為生成障礙或破壞過多，可作為骨髓移植、造血促進因子使用和骨髓抑制后的骨髓血小板造血恢復的監控指標[5]。

就新生兒而言，雖然胎兒是母親身體的一部分，通過臍血和產婦相聯系起來，但由于胎盤具有屏障的功能，因此新生兒的臍血網織血小板比較地穩定，并不受到妊娠與生產的影響。同時，健康新生兒的RP與孕齡有關，孕齡<30周的新生兒RP為(8.7%±4.9%)，明顯高于>36周新生兒RP(3.9%±2.3%)和30～36周的新生兒RP (4.5%±1.6 %)。患免疫性血小板減少癥的足月新生兒RP則明顯高于健康足月新生兒，前者RP達(38.3% ±23.1%)，而在一名血小板生成減低的新生兒血中其RP百分率(1.6%)和絕對數均明顯降低。因此作者認為測定血中RP值有助于評價新生兒血小板減少癥的原因。

新生兒臍血的網織血小板與產婦全血的網織血小板并不存在關聯性，且新生兒臍血網織血小板不會受到孕婦的影響，處于穩定的狀態。

4 參考文獻

[1] INGRAM M，Coopersmlth A.Reticulated platelets following acute blood loss[J].Br J Haematol，2014，17(3)：225.

[2] 宋紅蕾，馮 萍，朱雪明.網織血小板與MPV、血小板數量的關系探討[J].臨床輸血與檢驗，2014，(62)：91.

[3] AULT KA，KNOWLES C.In vlvo biotinylation demonstrates that reticulated platelets are the youngest platelets in circulation[J].Exp Hematol，2015,23(9)：996.

[4] BUTKIEWICZ AM，KEMONA H，DYMIC KA，PIEKARSKA V，et al. P1atelet count，mean platelet volume and thrombocytopoi-ic indicesin healthywomen andmen[J].Thromb Res，2015，31(8)：30.

[5] Kienast J，Schmitz G.Flow cytometric analysis of thiazole orange uptake by platelets：a diagnostic aid in the evaluation of thrombocytopenic disorders[J].Blood，1990，75(1):116.