杜雙迎
(吉林省吉林市人民醫院,吉林 吉林 132001)
尿液中有很多有形成分,不同的染料會使不同的有形成分著色,這樣,就可以快速準確的鑒別這些成分[1]。目前實驗室尿沉渣檢查基本以流式細胞儀及鏡下形態學檢驗為主,但是兩種方法都存在一定誤差,必要時都需要人工復檢[2]。在復檢的過程中,一些有形成分難以鑒別。尿液中的有形成分中,難以鑒別的是紅細胞與一些結晶,白細胞與移行上皮細胞等,它們的大小相似,形態結構也難以區分,如果能找到一種適合的染料,快速將有形成分染上不同的顏色,達到準確判定的目的[3-4]。本項目旨在于篩選不同的染料,將一些難以辨別的成分區分開來,及時,準確的發出報告,在提高實驗室效率的同時,也能為臨床提供科學的診斷依據,更好的為患者服務。現報道如下。
1.1 儀器與對象:儀器:OLYPUMS顯微鏡,朗邁尿全自動分析儀,10 mL尿沉渣離心管。染色試劑:尿沉渣Sternheimer-Malbin改良染色液(S-M法,批號408111)、Sternheimel染色液(S法,批號409111)、阿利新蘭-中性紅染色液(阿-中法,批號419321)。取80份人工復檢異常尿液標本10 mL置入尿沉渣離心管中,其中男性標本45例,女性標本35例。
1.2 檢測方法:所有尿液標本進行400轉/分離心5 min,棄上清液,取下層尿沉渣充分混勻(約0.2 mL),進行尿沉渣染色分析。所有檢測由本科室專業檢驗師負責檢驗,每份標本都在10 min之內檢測完畢,每日質控均在受控范圍。記錄不同染色時間,同時進行染色效果的比較,根據尿沉渣染色結果評判標準對結果進行判定。
1.3 統計學方法:選擇SPSS20.0軟件進行數據分析與記錄,P<0.05為差異顯著。
2.1 染色時間對比:S-M、S、阿-中染色法最佳時間都為2~5 min,染色0~2 min與5~8 min的效果為良,對比差異無統計學意義(P>0.05)。具體見表1。S染色法背景清晰或有少量雜質分布;S-M染色法背景的清晰度與S法的染色效果相近;阿-中染液染色背景雜質較多,有形成分結構模糊。
2.2 半定量結果對比:半定量結果顯示S與S-M染色法對比差異無統計學意義(P>0.05),S、S-M染色法與阿-中染色法比較差異明顯(P<0.05)。見表2。

表2 不同尿沉渣染色在尿全自動分析儀人工復檢的半定量結果對比(n)
尿液分析是三大臨床檢驗常規之一,分析的內容包括干化學檢查、外觀及物理性狀檢查、顯微鏡檢查等。隨著醫學技術的發展,尿全自動分析儀得到了廣泛應用,能分析尿液中的各種指標,可隨檢驗科的不同需要而修改,從而指導進行治療。
尿液沉渣顯微鏡檢查是尿全自動分析重要內容之一,也是泌尿系統鑒別診斷、病情判斷、疾病診斷、療效觀察的金標準,也是經典手工法[5]。由于尿沉渣中有形成分的多樣性和對染料親和力的不同,導致尿沉渣在不同的染色方法下的特征也各不相同,為此在臨床上要合理選擇染色方法[6]。不同的染料著色的重點不同,理論上講結晶不著色,只有由蛋白質組成的各種細胞才能著色,而且不同的染料染后的顏色也不同,如何能將不同成分著上不同的顏色是研究的難點。
S-M染色法就是采用結晶紫一沙黃染色,染色方便,染料價廉易得,可進一步提高管型、紅細胞、白細胞的鑒別,白細胞經S-M染色后,細胞核為淡藍或藍色,細胞質不染色或淡藍色,是尿液常規沉渣染色檢查的常用方法。S染色法中的胞質及RNA被派洛寧染成紅色,細胞核及管型基質可被阿爾新藍染成藍色,易于鏡下觀察[7]。但是上述兩種方法在檢測中都存在紅細胞染色欠佳等缺陷。本研究顯示S-M、S、阿-中染色法最佳時間都為2~5 min,染色0~2 min與5~8 min的效果為良,對比差異無統計學意義(P>0.05);S染色法背景清晰或有少量雜質分布;S-M染色法背景的清晰度與S法的染色效果相近;阿-中染液染色背景雜質較多,有形成分結構模糊。通過具體分析,阿-中染色法染色5 min后有大量褐色集結,致使識別和分類困難;S-M與S法的背景較清晰,但有形成分識別困難,結構模糊。

表1 不同尿沉渣染色在尿全自動分析儀人工復檢中的應用(n=80)
由于尿沉渣中各種成分的復雜性、易變性、多樣性,對于檢測的要求更高。尿沉渣染色顯微鏡檢查是目前輔助臨床醫師診斷泌尿系統疾病的主要方法,臨床上合理選擇染色方法具有重要的現實意義[8]。本研究半定量結果顯示S與S-M染色法對比差異無統計學意義(P>0.05),S、S-M染色法與阿-中染色法比較差異明顯(P<0.05)。結果說明尿沉渣S-M染色法、S染色法染色效果最佳,更適合于臨床尿沉渣染色顯微鏡檢查。不過在臨床檢查中,各種尿液的pH不同,試驗時要進行調節;尿液必須新鮮,不同的染色液要注意其pH變化,保障染色質量。當尿沉渣染色法的檢測結果與其他方法不一致時,需要密切結合臨床資料,才能得到客觀、準確的評價。對于可疑或確診為腎病者進行診斷和觀察療效時,必須采取傳統手工法檢測,以減少漏診和誤診;采集標本后30 min內要送至檢驗室,采集過程要嚴格遵守操作規程避免標本被污染??傊?,尿沉渣染色在尿全自動分析儀人工復檢中的應用有很好的效果,特別是S、S-M染色法對于不同細胞的形態、結構清晰易于識別,有很好的臨床應用價值。
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