細針穿刺細胞學檢查聯(lián)合免疫組化對甲狀腺癌的術前診斷準確率的影響

裴芝娟

[摘要] 目的 觀察分析細針穿刺細胞學檢查聯(lián)合免疫組化對甲狀腺癌的術前診斷準確率的影響。 方法 回顧性分析2015年1月～2016年12月于我院就診的甲狀腺結節(jié)患者86例的臨床資料，術前均進行細胞學檢查，同時進行免疫組化分析，并與術后病理結果進行對比。 結果 術前細胞學診斷38例乳頭狀癌，18例濾泡性腫瘤，16例濾泡性病變，2例未分化癌。18例可疑惡性腫瘤患者采用免疫組化染色，其中7例乳頭狀癌，2例濾泡癌；術后病理結果：9例乳頭癌，2例濾泡癌。16例可疑良性病變采用免疫組化染色，其中9例惡性腫瘤，術后病理結果得知，5例乳頭癌，2例濾泡癌。術后病理檢查得知，48例乳頭癌，4例濾泡癌，9例未分化癌，25例結節(jié)性甲狀腺腫。單個免疫組化標記物抗體Galectin-3、CK19、BRAF、HBME-1、TPO與聯(lián)合標記在甲狀腺癌診斷中的敏感性、準確性、特異性均較高；但與聯(lián)合標記對比差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）；細胞學檢查聯(lián)合免疫組化對診斷甲狀腺結節(jié)的敏感性、準確性、特異性均顯著高于細胞學檢查（P<0.05）。 結論 細針穿刺細胞學檢查聯(lián)合免疫組化能夠有效提高甲狀腺癌診斷準確性，可有效減少甲狀腺癌的誤診與漏診，有利于臨床治療與預后。

[關鍵詞] 細胞學檢查；免疫組化；甲狀腺癌；術前診斷

[中圖分類號] R736.1 [文獻標識碼] B [文章編號] 1673-9701（2018）09-0130-03

Effect of fine needle aspiration cytology combined with immunohistochemistry on the accuracy of preoperative diagnosis of thyroid cancer

PEI Zhijuan

Department of Pathology， Zhejiang Cancer Hospital， Hangzhou 310022， China

[Abstract] Objective To investigate the effect of fine needle aspiration cytology combined with immunohistochemistry on the accuracy of preoperative diagnosis of thyroid cancer. Methods The clinical data of 86 patients with thyroid nodules who were treated in our hospital from January 2015 to December 2016 were retrospectively analyzed. Cytology was performed on all participants before operation with immunohistochemical analysis conducted at the same time. The results were compared with postoperative pathological findings. Results 38 cases of papillary carcinoma， 18 cases of follicular tumor， 16 cases of follicular lesion and 2 cases of undifferentiated carcinoma were diagnosed using preoperative cytology. Immunohistochemical staining was used in 18 cases of suspected malignant tumor with 7 cases of papillary carcinoma and 2 cases of follicular carcinoma as a result. Postoperative pathology showed that， there were 9 cases of papillary carcinoma and 2 cases of follicular carcinoma. 16 cases of suspected benign lesions were immunohistochemistry， with 9 cases of malignant tumors as a results， while postoperative pathology found 5 cases of papillary carcinoma and 2 cases of follicular carcinoma. Postoperative pathological examination found 48 cases of papillary carcinoma， 4 cases of follicular carcinoma， 9 cases of undifferentiated carcinoma and 25 cases of nodular goiter. The sensitivity， accuracy and specificity of single immunohistochemical antibody such as Galectin-3， CK19， BRAF， HBME-1， TPO and combined markers in the diagnosis of thyroid cancer were high. While there was no statistical significance when compared with combined markers（P>0.05）. The sensitivity， accuracy and specificity of cytological examination combined with immunohistochemistry in diagnosis of thyroid nodules were significantly higher than cytology alone（P<0.05）. Conclusion Fine needle aspiration cytology combined with immunohistochemistry can effectively improve the diagnostic accuracy of thyroid cancer， reduce the misdiagnosis and missed diagnosis of thyroid cancer and is beneficial to clinical treatment and prognosis.

[Key words] Cytology； Immunohistochemistry； Thyroid cancer； Preoperative diagnosis

甲狀腺癌是甲狀腺上皮細胞發(fā)生的惡性腫瘤，近年來甲狀腺癌的發(fā)病率逐漸增加，已成為發(fā)病率增加最快的惡性腫瘤之一，嚴重危害人類的生命安全[1]。因此，提高甲狀腺癌的早期診斷準確率、減少誤診與漏診具有重要意義。本文觀察分析細針穿刺細胞學檢查聯(lián)合免疫組化對甲狀腺癌的術前診斷準確率的影響，以期為臨床診斷提供參考依據(jù)，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2015年1月～2016年12月于我院就診的86例甲狀腺結節(jié)患者，患者術前均接受細胞學檢查、免疫組化標記以及術后的病理診斷。其中男31例，女55例，年齡25～74歲，平均（38.78±8.17）歲，患者在術前均未接受過化療、放療與免疫治療。本次研究均征得我院醫(yī)學倫理委員會及患者的同意，并與患者簽署知情同意書。

1.2 方法

患者取仰臥位，頭仰伸，以充分暴露患者頸部，常規(guī)消毒鋪巾后，局部麻醉，持7號針頭穿刺針，在維持針頭穩(wěn)定的狀態(tài)下快速穿刺數(shù)次，取得組織置于清潔玻璃片上，進行涂片[2]。

免疫組化標記：涂片脫水后采用TBS洗滌，分別標記鼠抗Galectin-3、鼠抗CK19、鼠抗BRAF、鼠抗HBME-1、鼠抗TPO，37℃下放置30 min，TBS洗滌，采用DAB顯色15 min，測定細胞角蛋白（CK）-19、半乳糖凝集素（Galectin）-3、BRAF、HBME-1、TPO的免疫表達[3]。

細胞學檢查：采用Wright stain染色細胞，涂片后采用0.5 mL劉A溶液染色30 s，滴加劉A液使用量的2倍在劉B液之上，使劉A液與劉B液充分混合，染色2 min，水洗干燥后進行鏡檢。

病理組織學觀察：術中切去病理標本采用4%中性甲醇固定，采用石蠟包埋，將其制備成6 μm切片，采用蘇木精-伊紅染色后進行鏡檢。

1.3 觀察指標

觀察比較細胞學檢查與聯(lián)合免疫組化標準診斷甲狀腺結節(jié)的敏感性、準確性、特異性。敏感性=真陽性例數(shù)/（真陽性例數(shù)+假陰性例數(shù)）×100%；特異性=真陰性例數(shù)/（真陰性例數(shù)+假陽性例數(shù)）×100%。以1-特異性為橫向坐標，敏感性為縱向坐標構建ROC曲線，評價比較兩種方法在甲狀腺癌的術前診斷中的準確率。

1.4 統(tǒng)計學分析

采用SPSS22.0處理本文數(shù)據(jù)，計數(shù)資料以百分比表示，組間比較行χ2檢驗，P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 細胞學檢查結合免疫組化標記與術后病理結果比較

術前細胞學診斷38例乳頭狀癌，18例濾泡性腫瘤，16例濾泡性病變，2例未分化癌。18例可疑惡性腫瘤患者采用免疫組化染色，其中7例乳頭狀癌，2例濾泡癌；術后病理結果：9例乳頭癌，2例濾泡癌。16例可疑良性病變采用免疫組化染色，其中9例惡性腫瘤，術后病理結果得知，5例乳頭癌，2例濾泡癌。術后病理檢查得知，48例乳頭癌，4例濾泡癌，9例未分化癌，25例結節(jié)性甲狀腺腫。見封三圖11～14。

2.2 免疫組化標記物診斷甲狀腺癌的敏感性、準確性與特異性比較

單個免疫組化標記物抗體Galectin-3、CK19、BRAF、HBME-1、TPO與聯(lián)合標記在甲狀腺癌診斷中的敏感性、準確性、特異性均較高；但與聯(lián)合標記對比差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。見表1。

2.3 細胞學檢查聯(lián)合免疫組化標準診斷甲狀腺結節(jié)的敏感性、準確性、特異性比較

細胞學檢查聯(lián)合免疫組化對診斷甲狀腺結節(jié)的敏感性、準確性、特異性均顯著高于細胞學檢查（P<0.05）。見表2。

3 討論

甲狀腺結節(jié)有良惡性之分，良性結節(jié)為多發(fā)性結節(jié)，不會影響腺體的生理功能，也沒有甲亢表現(xiàn)，可以使用藥物進行治療，惡性結節(jié)為單發(fā)性，容易出現(xiàn)癌變[4]。惡性的甲狀腺結節(jié)以甲狀腺癌為主，另外還包括甲狀腺淋巴瘤、轉(zhuǎn)移瘤等[5]。甲狀腺結節(jié)診斷要點主要是甲狀腺結節(jié)和甲狀腺功能基本正常。T4正常或者稍低，但是T3可以略高以維持甲狀腺功能正常，但是高峰時間很少提前出現(xiàn)，T3抑制試驗呈可抑制反應[6，7]。血清高敏感性TSH濃度測定是評價甲狀腺功能的最佳指標，血清TSH常正常[8]。

細胞學檢查是一種微創(chuàng)、安全、并發(fā)癥少、操作方便的檢查手段，其診斷速度快且診斷準確性與可行度較高，是評估甲狀腺結節(jié)性質(zhì)的金標準，在甲狀腺結節(jié)的定性診斷中廣泛使用，但是甲狀腺細胞病理診斷標準難以掌握，且操作技術與操作經(jīng)驗各有不同，且穿刺標本僅為可疑結節(jié)，對于一些不典型細胞，難以準確診斷，導致容易出現(xiàn)甲狀腺癌的漏診與誤診[9-11]。而手術治療成功與否取決于診斷準確性的高低，所以提高甲狀腺診斷準確性尤為重要。有研究結果表明，細胞學檢查結合免疫組化標記能夠有效提高診斷準確率[12]。Nakamura等[13]對乳腺癌患者臨床可疑轉(zhuǎn)移腋窩淋巴結采用CT或彩超引導下細針穿刺，發(fā)現(xiàn)細針穿刺活檢的敏感度、特異度、陽性與陰性預測值和準確度分別為65%、99%、99%、80%和85%。霍雷軍等[14]報道超聲引導下細針穿刺細胞學檢查判斷乳腺癌腋窩淋巴結轉(zhuǎn)移的敏感度為55.9%（19/34）、特異度為88.9%（8/9）、準確度為62.8%（27/43）、陽性預測值為95.0%（19/20）、陰性預測值為34.8%（8/23）。超聲引導下細針穿刺是一種創(chuàng)傷小、操作簡便的術前評估乳腺癌患者腋窩淋巴結狀態(tài)的方式，然而如上所述其診斷的敏感性、特異性和準確度并不理想。超聲造影利用注射造影劑后散射回聲增強的特性，能夠動態(tài)清晰顯示病灶內(nèi)直徑<100 μm微血管的灌注循環(huán)情況，提高診斷的分辨力、敏感性和特異性。文獻報道超聲造影檢查可以很好地補充常規(guī)超聲檢查的不足，明顯提高超聲檢查鑒別乳腺癌良惡性腋窩淋巴結的效能[15]，同時超聲造影技術還被報道可以有效地檢測前哨淋巴通道和前哨淋巴結提高SLNB成功率[16]。Rautiainen等[17]報道超聲造影引導下穿刺活檢診斷乳腺癌患者腋窩淋巴結狀態(tài)的敏感性66.7%，特異性100%，陽性預測值100%，陰性預測值93.8%，總準確率94.4%。本文研究結果，單個免疫組化標記物抗體Galectin-3、CK19、BRAF、HBME-1、TPO與聯(lián)合標記在甲狀腺癌診斷中的敏感性、準確性、特異性均較高；但與聯(lián)合標記對比差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）；細胞學檢查聯(lián)合免疫組化對診斷甲狀腺結節(jié)的敏感性、準確性、特異性均顯著高于細胞學檢查（P<0.05）；本文研究結果表明，各個免疫組化標記抗體診斷甲狀腺癌的敏感性、特異性及準確性均較高，但與聯(lián)合標記對比表達特性均無差異[18，19]。而細胞學檢查結合免疫組化染色的敏感性、特異性、準確性均較單純細胞學檢查高，說明兩種方法聯(lián)合使用在甲狀腺結節(jié)鑒別診斷中的價值較高[20，21]。

綜上所述，細針穿刺細胞學檢查聯(lián)合免疫組化能夠有效提高甲狀腺癌診斷準確性，可有效減少甲狀腺癌的誤診與漏診，有利于臨床治療與預后。

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（收稿日期：2017-07-31）