卷丹百合提取物對4 ℃有氧冷藏草魚肉片中優(yōu)勢腐敗菌的抑菌效果

李樹紅，鐘海霞，李松，楊娟，蔣光陽，林靈，白稚子，吳睿，李美良

1(四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 食品學(xué)院，四川 雅安，625014)2(達(dá)州市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院，四川 達(dá)州，635000)

草魚(Ctenopharyngodonidellus)作為我國主要淡水經(jīng)濟(jì)魚類，年養(yǎng)殖量達(dá)507萬t，同時(shí)因其肉質(zhì)鮮美、營養(yǎng)豐富，產(chǎn)量和消費(fèi)量都位居我國淡水魚首位[1]。淡水魚小包裝生鮮制品食用方便，需求量大，深受廣大消費(fèi)者的喜愛，顯示出巨大的市場潛力，加工前景廣闊。然而影響淡水魚初級加工生鮮制品品質(zhì)的因素，除原料的新鮮度外，主要還包括加工方式、貯藏條件及銷售方式等。由于魚具有明顯的易腐性，淡水魚生鮮制品的貯藏條件就顯得尤為重要。GENNARI[2]等研究表明在高于凍結(jié)溫度的條件下，魚肉隨著細(xì)菌的生長繁殖易于腐敗變質(zhì)。根據(jù)相關(guān)研究結(jié)果，在特定條件下，魚體所含微生物只有部分參與腐敗過程，這些適宜生存且大量繁殖并產(chǎn)生異味代謝產(chǎn)物的微生物，被稱作特定腐敗菌(specific spoilage organisms, SSO)[3-4]。而魚肉片在有氧低溫貯藏時(shí)，同樣是有利于少數(shù)特定優(yōu)勢菌群生存繁殖并產(chǎn)生腐敗相關(guān)代謝產(chǎn)物。研究表明有氧低溫貯藏(1～15 ℃)條件下淡水魚原料魚肉的特定腐敗菌主要有假單胞菌(Pseudomonasspp.)、腐敗希瓦氏菌(Shewanellaspp.)、氣單胞菌屬(Aeromonas)和乳酸菌(Lactobacillus)等[5-8]。王發(fā)祥等[9]通過BIOLOG微生物鑒定系統(tǒng)，初步鑒定出未去皮草魚肉塊，4 ℃冷藏過程中的優(yōu)勢腐敗菌主要為：鄉(xiāng)間不丘氏菌(Buttiauxellagaviniae)、草莓假單胞菌(Pseudomonasfragi)、熱殺索絲菌(Brochothrixthermosphacta)等。魚類生鮮初級加工制品，其處理方式有多種。在對魚片進(jìn)行分割冷藏時(shí)，分不去皮和去皮魚片。目前對草魚有氧冷藏優(yōu)勢腐敗菌的研究報(bào)道，集中在原料魚和不去皮魚片方面。對去皮魚片有氧冷藏條件下的優(yōu)勢腐敗菌的研究尚未見報(bào)道。而魚類皮膚表面通常攜帶大量來自于水體環(huán)境的微生物，因此去皮魚片有氧冷藏下的優(yōu)勢腐敗菌可能與原料魚和不去皮魚片存在一定的差異為了進(jìn)一步分析4 ℃有氧冷藏去皮草魚肉片中腐敗菌的種群特征，本研究將傳統(tǒng)的生理生化鑒定方法與16S rDNA分子鑒定方法相結(jié)合，對4 ℃有氧冷藏去皮草魚肉片貨架期終點(diǎn)的優(yōu)勢腐敗菌進(jìn)行了分離及鑒定，并通過回接實(shí)驗(yàn)，分析比較各腐敗菌的致腐能力。

另一方面，卷丹百合(LiliumlancifoliumThunb.)在長江流域廣為栽培，是一種藥食兩用的百合科百合屬類植物[10-11]。目前對卷丹百合的利用，主要是食用其球莖部分，而花葉、花蕾等均成為廢棄物。此外，李紅娟等[12]研究發(fā)現(xiàn)，卷丹百合丙酮提取液對大腸桿菌、金黃色葡萄球菌及枯草芽孢桿菌具有抑菌活性，但還未發(fā)現(xiàn)針對卷丹百合花葉、花蕾的體外抑菌活性方面的報(bào)道。為此，本實(shí)驗(yàn)在分離純化、鑒定4 ℃有氧冷藏去皮草魚肉片的特定優(yōu)勢腐敗菌基礎(chǔ)上，研究了卷丹百合花葉、花蕾提物對優(yōu)勢腐敗菌的抑菌情況。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)一步明確了4 ℃有氧冷藏過程中去皮草魚肉片的優(yōu)勢腐敗菌，可為靶向抑制草魚腐敗相關(guān)微生物，確定目標(biāo)。而研究卷丹百合廢棄組織提取物對腐敗菌的抑制作用，可以為有效利用卷丹百合資源、開發(fā)天然新型抑菌保鮮劑，延長4 ℃有氧冷藏下分割草魚生鮮去皮肉片的保鮮期，奠定實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 原料與試劑

新鮮活草魚，購于四川省雅安市鑫禧水產(chǎn)市場，每尾約(1.5±0.15)kg；卷丹百合花葉、花蕾洗凈后真空冷凍干燥，粉碎過篩，備用。

TaqDNA聚合酶、DNA Marker III、Taq buffer、dNTP、細(xì)菌基因組DNA提取試劑盒-離心柱型，天根生化科技北京有限公司；營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基、鐵瓊脂培養(yǎng)基，上海中科昆蟲生物技術(shù)開發(fā)有限公司；CFC培養(yǎng)基、AMB培養(yǎng)基，青島海博生物科技有限公司；過氧化氫、鹽酸四甲基對苯二胺、氯化鈉，成都市科龍化工試劑廠；酵母浸粉，英國Oxoid；16S rDNA細(xì)菌通用引物，上海英駿生物技術(shù)有限公司。

其中，16S rDNA細(xì)菌通用引物序列如下：正向引物27F: 5′-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3′，反向引物1492R: 5′-GGTTACCTTGTTACGACTT-3′。

1.2 主要儀器與設(shè)備

MyCyclerTM Thermal Cycler PCR儀、水平電泳槽及電泳電源、Dio-Gel-2000凝膠成像系統(tǒng)，美國Bio-Rad；CX21FS1顯微鏡，日本Olympus；手提式壓力蒸汽滅菌鍋，上海申安醫(yī)療器械廠；THZ-98AB恒溫振蕩培養(yǎng)箱，上海一恒儀器有限公司；真空冷凍干燥機(jī)，Labconco公司；中草藥打粉機(jī)，天津市泰斯特儀器有限公司

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 草魚去皮肉片生鮮制品的加工及有氧冷藏

用4 ℃清水將鮮活草魚洗凈，擊暈后去鱗、去頭、剖腹去內(nèi)臟等，4℃清水洗凈血污。沿脊骨剖片后將魚肉片去皮。去皮魚片切成60～70 g/塊，再進(jìn)行挑刺、修補(bǔ)、整型。加工完成的魚肉塊，置于PP一次性冷鮮肉塑料托盤，然后用食品級保鮮膜封口包裝，置于4 ℃冷藏。

1.3.2 草魚去皮魚肉片貨架期終點(diǎn)優(yōu)勢腐敗菌的分離純化

待草魚去皮肉片到達(dá)貨架期終點(diǎn)，從腐敗魚肉片中分離純化優(yōu)勢腐敗菌。取樣參照GB/T 4789.20—2003：食品微生物學(xué)檢驗(yàn)水產(chǎn)品檢驗(yàn)方法[13]。

在無污染的環(huán)境中用高溫滅菌冷卻后的手術(shù)刀剪取腐敗草魚魚肉25 g，放入已滅菌的研缽內(nèi)用無菌剪刀剪碎，加入無菌玻璃砂后研磨，再放入盛有225 mL無菌生理鹽水的錐形瓶中，振蕩搖勻，梯度稀釋后，通過平板傾注法制成計(jì)數(shù)平板且每個(gè)梯度2個(gè)平行，用無菌生理鹽水做空白對照，每個(gè)實(shí)驗(yàn)3個(gè)重復(fù)。在冰箱(4±1)℃條件下培養(yǎng)7 d。選取菌落總數(shù)在30～100 CFU(Colony-Forming Units)且無蔓延菌落生長的平板，計(jì)菌落總數(shù)。通過鏡檢及形態(tài)特征分離所選平板上的菌株，挑取其中數(shù)量比例較大的優(yōu)勢菌株，對優(yōu)勢菌株進(jìn)行純化(3次平板劃線)。將目的菌株分別進(jìn)行純化，將得到的純化菌株用40%甘油保存，于-80 ℃冰箱中保存?zhèn)溆谩?/p>

1.3.3 腐敗菌的鑒定

(1)形態(tài)特征鑒定：革蘭氏染色后觀察記錄細(xì)菌形態(tài)，顏色質(zhì)地及有無芽孢等。

(2)理化特征鑒定：參照《伯杰細(xì)菌鑒定手冊》[14]和《常見細(xì)菌系統(tǒng)鑒定手冊》[15]對分離純化的細(xì)菌進(jìn)行理化實(shí)驗(yàn)。

(3)腐敗菌分子生物學(xué)鑒定：將分離純化的菌株活化2次，30 ℃ 180 r/min振蕩培養(yǎng)16 h，參照說明書方法采用細(xì)菌基因組DNA提取試劑盒提取模板DNA。以通用引物27F：5′-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3′和1492R：5′-GGTTACCTTGTTACGACTT-3′進(jìn)行擴(kuò)增。

PCR擴(kuò)增反應(yīng)體系包括：2 μL DNA模板，引物27F 0.5 μL，引物1492R 0.5 μL，TaqDNA Polymerase 0.4 μL，ddH2O 12.6 μL，Super Pure dNTP 4 μL，TaqBuffer(10×)5 μL。

PCR擴(kuò)增程序?yàn)椋?5 ℃變性5 min，接著30個(gè)循環(huán)(94 ℃變性45 s、56 ℃退火45 s、72 ℃延伸1.5 min)。最終72 ℃延伸10 min，取適量PCR擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳，而后將擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行測序，將PCR擴(kuò)增產(chǎn)物送至上海立菲生物技術(shù)有限公司進(jìn)行測序，將測得的16S rDNA序列在 NCBI數(shù)據(jù)庫中進(jìn)行在線BLAST同源性匹配，以相似度最高的種作為內(nèi)群，而后選取同屬細(xì)菌作為外群。對比后用MEGA 6.06軟件，構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹，進(jìn)行Bootstrap 1000檢驗(yàn)。

1.3.4 腐敗菌致腐能力的確定

1.3.4.1 TVB-N值的測定

用無菌水將分離純化的優(yōu)勢菌株分別制成菌懸液，菌體濃度105CFU/mL。根據(jù)HERBER等的方法[16]，制備無菌魚塊。按肉片與菌懸液1∶0.1(g∶mL)在魚塊表面回接菌懸液。在4 ℃冰箱貯藏，并進(jìn)行揮發(fā)性鹽基氮(TVB-N)的測定。揮發(fā)性鹽基氮(TVB-N)的測定參照SC/T 3032—2007：水產(chǎn)品中揮發(fā)性氮值的測定[17]。

1.3.4.2 菌落總數(shù)的測定

氣單胞菌：采用AMB培養(yǎng)基30 ℃有氧培養(yǎng)48 h；假單胞菌：采用CFC培養(yǎng)基25 ℃有氧培養(yǎng)48 h；腐敗希瓦氏菌：采用鐵瓊脂培養(yǎng)基25 ℃有氧培養(yǎng)48 h。

參照GB/T 4789.2—2010《食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)菌落總數(shù)測定》進(jìn)行[18]。

1.3.4.3 感官評價(jià)

由6名經(jīng)過訓(xùn)練的專業(yè)人員組成感官評定小組，對去皮草魚肉片進(jìn)行感官評分。以魚肉的色澤、氣味、指壓后魚肉彈性為主要評分指標(biāo)。采用3分法進(jìn)行評分[19]，0為具有新鮮魚肉特有的氣味、色澤和彈性，品質(zhì)最佳，1為固有鮮味減弱，彈性降低，0-1為高品質(zhì)期，2為出現(xiàn)色澤暗淡、帶有明顯異味和臭味、無彈性，即為可接受的界限。當(dāng)半數(shù)或過半的評價(jià)人員評價(jià)2時(shí)，為該產(chǎn)品貨架期終點(diǎn)。

1.3.5 卷丹百合花葉、花蕾提取物的制備

水提取物的制備：稱取百合花葉、花蕾干粉各20 g，分別加入200 mL超純水，采用超聲波法(功率200 W)40 ℃提取4 h。離心取上清，用微濾除菌器過濾除菌，并分裝成2mL/瓶，隨后進(jìn)行真空冷凍干燥。使用前用無菌水200 μL/瓶復(fù)溶。

醇提物的制備：稱取百合花葉、花蕾干粉各20 g，分別加入200 mL 60%乙醇，采用超聲波法(功率200 W)40 ℃提取1h。用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀蒸成膏狀。根據(jù)干粉重/g：60%乙醇/mL為1∶1的比例，最終將膏狀物溶解于20 mL的60%乙醇中，用微濾除菌器過濾除菌，分裝成2 mL/瓶于-80 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.3.6 抑菌活性的檢測

采用濾紙片法測定百合花葉、花蕾提取物對優(yōu)勢腐敗菌的抑菌活性。將篩選的3種優(yōu)勢腐敗菌置入無菌水中制成菌懸液，濃度為105CFU/mL。取0.1 mL菌懸液均勻涂布于營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基上[11]，將濾紙片(直徑6 mm)放置于上述已涂布細(xì)菌的平板上，在濾紙片上分別滴加經(jīng)無菌處理的5、10、15、20 μL/片的卷丹百合花葉、花蕾提取物。于37 ℃培養(yǎng)24 h，觀察抑菌效果。

2 結(jié)果與分析

2.1 優(yōu)勢腐敗菌的分離和鑒定

通過鏡檢及菌落形態(tài)特征一致性，將從貨架期終點(diǎn)分離純化的106株菌分成3組。每組菌分別命名為JZ-C、JC-L、JZ-BB。每組的菌落特征見表1。并根據(jù)《伯杰細(xì)菌鑒定手冊》[14]和《常見細(xì)菌系統(tǒng)鑒定手冊》[15]相關(guān)方法對上述各組中每株菌進(jìn)行生理生化鑒定，如表2初步確定為3個(gè)屬。

表1 JZ-C, JZ-L與JZ-BB的細(xì)菌菌落特征分析Table 1 Feature analysis of JZ-CB, JZ-L and JZ-BB

表2 優(yōu)勢腐敗菌的生理生化鑒定結(jié)果Table 2 Biochemical identification results ofdominant spoilage bacteria

注：“+”表示反應(yīng)為陽性，“—”表示反應(yīng)為陰性。

2.2 腐敗菌的分子生物學(xué)鑒定

分離篩選出的3株優(yōu)勢腐敗菌經(jīng)引物27F，1492R16SrDNA細(xì)菌通用引物PCR擴(kuò)增后，在瓊脂糖電泳膠上呈現(xiàn)與預(yù)期分子量大小相符的條帶(1 500 bp)。

2.3 系統(tǒng)發(fā)育樹的建立構(gòu)建

根據(jù)構(gòu)建的系統(tǒng)發(fā)育樹，可見JZ-C與腐敗希瓦氏菌(Shewanellaputrefaciens)聚集在同一分支，相似度在99%以上(圖3)；JZ-BB和草莓假單胞菌(Pseudomonasfragi)屬于同一類群(圖4)；JZ-L與中間氣單胞菌(Aeromonasmedia)屬于相同類群(圖5)。因此進(jìn)一步可結(jié)合形態(tài)學(xué)及理化實(shí)驗(yàn)結(jié)果，確定分離純化得到的3類菌分別為腐敗希瓦氏菌(Shewanellaputrefaciens)，草莓假單胞菌(Pseudomonasfragi)，中間氣單胞菌(Aeromonasmedia)。

王發(fā)祥[9]等初步鑒定未去皮草魚分割肉塊4 ℃有氧冷藏過程中的優(yōu)勢腐敗菌主要為鄉(xiāng)間不丘氏菌(Buttiauxellagaviniae)、草莓假單孢菌(Pseudomonasfragi)、熱殺索絲菌(Brochothrixthermosphacta)等。而本研究在貨架期終點(diǎn)的4 ℃有氧冷藏去皮草魚肉片中分離的優(yōu)勢腐敗菌也包括了草莓假單胞菌(Pseudomonasfragi)，該結(jié)果與上述研究一致，同時(shí)還鑒定出了腐敗希瓦氏菌(Shewanellaputrefaciens)，這與候溫甫[20]等通過草魚肉片4 ℃貯藏期間微生物生長曲線的變化趨勢而初步推斷的優(yōu)勢腐敗菌結(jié)果相似。中間氣單胞菌(Aeromonasmedia)與WANG等[21]人報(bào)道的氣單胞菌是4 ℃冷藏草魚肉片的主要腐敗菌結(jié)論相符。此外，本實(shí)驗(yàn)的研究結(jié)果，4 ℃有氧冷藏草魚去皮肉片貨架期終點(diǎn)優(yōu)勢腐敗菌為腐敗希瓦氏菌、草莓假單胞菌、中間氣單胞菌與WANG等[21]人報(bào)道的4 ℃有氧冷藏草魚未去皮肉片貨架期終點(diǎn)的優(yōu)勢腐敗菌為假單胞菌和氣單胞菌存在差異，這可能是與去皮和不去皮有關(guān)。

圖3 菌株JZ-C系統(tǒng)發(fā)育樹Fig.3 Phylogenetic tree of JZ-C

圖4 JZ-BB系統(tǒng)發(fā)育樹Fig.4 Phylogenetic tree of JZ-BB

圖5 JZ-L系統(tǒng)發(fā)育樹Fig.5 Phylogenetic tree of JZ-L

2.4 腐敗菌致腐能力的初步分析

根據(jù)圖6可知，4 ℃冷藏過程中3組回接優(yōu)勢菌的草魚去皮肉片，TVB-N值一直呈明顯的上升趨勢，在冷藏2 d內(nèi)3組的TVB-N值均小于15 mg/100g，魚片處于一級鮮度。在第5天時(shí)接有腐敗希瓦氏菌的魚肉片TVB-N值已經(jīng)達(dá)到27.19 mg/100g，說明接有該菌的魚肉開始出現(xiàn)進(jìn)入腐??；而接有草莓假單胞菌和中間氣單胞菌的組第6天時(shí)TVB-N值分別為25.12 mg/100g和25.07 mg/100g，開始出現(xiàn)腐敗現(xiàn)象。由此可知，3種優(yōu)勢菌均不同程度加快了魚肉片的腐敗速度，且接有腐敗希瓦氏菌的組腐敗速度明顯快于其他兩組。

同時(shí)結(jié)合回接實(shí)驗(yàn)的感官評分，3組接菌草魚去皮肉片，接有腐敗希瓦氏菌的去皮草魚魚肉片在第5天色澤暗淡，產(chǎn)生異味，彈性損失嚴(yán)重，5位評價(jià)人員評分為2，而接有草莓假單胞菌和中間氣單胞菌的組直到第6天，其去皮草魚魚肉片才產(chǎn)生異味，色澤暗淡，失去彈性，4人評分達(dá)到2。其評定結(jié)果與TVB-N值的變化結(jié)果一致。

由圖7可見，3組回接優(yōu)勢菌的草魚去皮肉片在冷藏0～7d內(nèi)菌落總數(shù)一直呈上升趨勢，但腐敗希瓦氏菌生長變化明顯比草莓假單胞菌和中間氣單胞菌快。

綜上，說明腐敗希瓦氏菌的致腐力最強(qiáng)，可以明確判斷腐敗希瓦氏菌為4 ℃有氧冷藏條件下去皮草魚魚肉片貨架期終點(diǎn)的最優(yōu)勢腐敗菌。張璟晶[22]等證實(shí)了在冰鮮鯧魚的腐敗變質(zhì)過程中，熒光假單胞菌(pseudomonasfluorescens)的致腐能力是最強(qiáng)的。許振偉[23-24]等研究發(fā)現(xiàn)大黃魚在有氧低溫貯藏條件下腐敗希瓦氏菌的致腐能力最強(qiáng)，對冷藏鯉魚和羅非魚研究時(shí)發(fā)現(xiàn)，假單胞菌的致腐能力最強(qiáng)。本實(shí)驗(yàn)表明草魚魚肉在4 ℃有氧條件下冷藏腐敗希瓦氏菌(Shewanellaputrefaciens)的致腐能力最強(qiáng)，結(jié)果上的差異可能與魚種、養(yǎng)殖環(huán)境及魚片加工操作的環(huán)境等有一定關(guān)系。

圖6 回接各種腐敗菌對TVB-N值的影響Fig.6 Effect of putrefying bacteric on TVB-N value

圖7 回接各腐敗菌魚肉片菌數(shù)的變化Fig.7 The changes of bacteria in fish fillets after putrefying bactericinoculated back

2.5 抑菌活性的測定

A：空白對照(無菌水)20 μL B：花葉水提物20 μL圖8 卷丹百合花葉水提液對腐敗希瓦氏的抑菌效果Fig.8 Inhibitory effect from Lily extracts to Shewanella putrefaciens

A:空白對照(60%乙醇)20 μL；B:花蕾提取液5 μL；C:花蕾提取液10 μL；D:花蕾提取液15 μL；E:花蕾提取液20μL圖9 卷丹百合花蕾醇提液對草莓假單孢的抑菌效果Fig.9 Inhibitory effect from Lily extracts to Pseudomonas fragi

A-空白對照(60%乙醇)10 μL；B-花蕾提取液5 μL；C-花蕾提取液10 μL；D-花蕾提取液15 μL；E-花蕾提取液20 μL圖10 卷丹百合花蕾醇提液對中間氣單孢的抑菌效果Fig.10 Inhibitory effect from Lily extracts to Aeromonas media

抑菌實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，百合花葉水提物對腐敗希瓦氏菌有明顯的抑菌效果，當(dāng)加量為20 μL，其抑菌圈直徑為32 mm(如圖8)。而百合花蕾60%乙醇提取物對草莓假單胞菌和中間氣單胞菌體現(xiàn)了明顯抑菌效果，當(dāng)加量為20 μL時(shí)，其抑菌圈直徑分別為10 mm(如圖9)和26 mm(如圖10)。勒磊等[25]證實(shí)了野百合鱗莖的甲醇提取物對枯草芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌、蠟狀芽孢桿菌、沙門氏菌、大腸桿菌、產(chǎn)氣桿菌有一定的抑制作用。周英等[11]研究發(fā)現(xiàn)卷丹百合的水、乙醇、乙酸乙酯提取物對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、藤黃微球菌、綠膿桿菌、黃霉菌以及糞腸球菌都具有一定程度的抑制效果。牛立新等[26]研究表明百合鱗莖甲醇提物對金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌、大腸桿菌、沙門氏菌均具有明顯的抑菌活性。本研究發(fā)現(xiàn)卷丹百合花葉的水提物對腐敗希瓦氏菌具有抑菌活性，卷丹百合花蕾60%乙醇提取物對草莓假單胞菌和中間氣單胞菌具有抑菌活性。

3 結(jié)論

對4 ℃有氧冷藏草魚去皮肉片貨架期終點(diǎn)的腐敗微生物進(jìn)行了分離鑒定，并且研究了卷丹百合花葉、花蕾提取物對貨架期終點(diǎn)的優(yōu)勢腐敗菌的抑制作用。確定了去皮草魚肉片中主要的腐敗菌有3種，分別為腐敗希瓦氏菌(Shewanellaputrefaciens)、草莓假單胞菌(Pseudomonasfragi)和中間氣單胞菌(Aeromonasmedia)且腐敗希瓦氏菌(Shewanellaputrefaciens)的致腐能力最強(qiáng)。該結(jié)果可為靶向抑制草魚腐敗菌，確定目標(biāo)。抑菌研究證實(shí)了卷丹百合花葉、花蕾提取物對上述3種優(yōu)勢腐敗菌有明顯的抑制作用，該結(jié)果可以為有效利用卷丹百合資源、開發(fā)天然新型抑菌保鮮劑，延長有氧4 ℃冷藏下分割草魚生鮮去皮肉片的保鮮期，提供參考。

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