精子優選方法對人工授精治療結局的影響

楊祖偉　涂文瑞　趙振東

【摘要】 目的：探討精子優選方法對人工授精治療結局的影響。方法：采取方便抽樣法抽取100例于2016年4月-2017年4月來筆者所在醫院實施人工授精的不孕癥夫妻152對（共732個周期），按照其采取的精子優選方法進行分組，其中上游法66對夫妻（共314個周期）作為A組，其中密度梯度離心法86對夫妻（共418個周期）作為B組。比較兩組周期妊娠率、流產率及出生嬰兒的性別。結果：A組周期妊娠率和流產率均高于B組，但差異無統計學意義（字2=1.173、0.904，P>0.05）。兩組人工授精出生的嬰兒性別比例比較，差異無統計學意義（字2=0.034，P>0.05）。結論：上游法和密度梯度離心法提取精子在人工授精應用中，其妊娠率、流產率及對子代的性別影響相似，因此，在臨床實際操作過程中可根據患者的具體情況選擇以上任一種精子優選方法來提取精子。

【關鍵詞】 精子優選方法； 人工授精； 治療結局

doi：10.14033/j.cnki.cfmr.2018.4.071 文獻標識碼 B 文章編號 1674-6805（2018）04-0142-02

人工授精是臨床上常用的一種不孕癥治療的輔助手段，在人工授精過程中，最重要的也是最基礎的一個環節就是從精液中提取精子[1]。精子提取方法是否科學會對精子的質量產生直接的影響，從而影響到最終的人工授精治療結局。因此，積極探索有效的精子優選方法是非常重要的[2]。目前臨床上常用的體外精液優選處理方法主要有上游法和密度梯度離心法[3]。筆者為了探討最佳的精子提取方法，對上游法和密度梯度離心法提取精子對人工授精治療結局的影響進行了研究。

1 資料與方法

1.1 一般資料

采取方便抽樣法抽取于2016年4月-2017年4月來筆者所在醫院實施人工授精的不孕癥夫妻152對，共732個周期，納入標準：（1）女方至少有一側輸卵管通暢，無子宮畸形、子宮腺肌癥、子宮肌瘤及內分泌疾??；（2）女方肝腎功能均正常；（3）無妊娠合并癥。排除標準：（1）女方人工授精術前6個月內使用過激素類藥物；（2）男方合并弱精子癥或死精子癥。按照其采取的精子優選方法進行分組，采用上游法66對夫妻（共314個周期）作為A組，夫婦平均年齡（31.33±3.68）歲；不孕病程（4.23±2.03）年；其中自然周期210個，促排卵周期104個。采用密度梯度離心法86對夫妻（共418個周期）作為B組，夫婦平均年齡（31.21±4.02）歲；不孕病程（4.45±2.14）年；自然周期278個，促排卵周期140個。兩組研究對象的一般資料比較，差異無統計學意義（P>0.05），有可比性。

1.2 方法

兩組中的男性均禁欲3～7 d，采用手淫法取精液，并將取出的精液放置在專用取精杯中，置于37 ℃恒溫箱中保存。待精液液化后，分別使用上游法和密度梯度離心法處理提取精子。然后使用提取出的精子實施宮腔內人工授精，女方在完成人工授精之后，需平臥0.5～1 h[4]。自然周期從月經第7～8天開始監測卵泡，卵泡成熟且出現尿促黃體生成激素峰時行人工授精。促排卵周期參照文獻[5]，于月經第10～11天開始監測卵泡，卵泡直徑達18～20 mm時注射絨毛膜促性腺激素5 000～10 000 U，注射后24～32 h行人工授精，排卵后予以黃體功能支持治療[6]。

1.3 觀察指標

觀察比較兩組人工授精治療結局及出生嬰兒性別比例。

1.4 統計學處理

本研究數據采用SPSS 13.0統計學軟件進行分析和處理，計量資料以（x±s）表示，采用t檢驗，計數資料以率（%）表示，采用字2檢驗，α=0.05為檢驗水平，P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 不同精子優選方法對人工授精治療結局的影響比較

A組提取精子的周期妊娠率和流產率均高于B組，但差異無統計學意義（P>0.05），見表1。

2.2 兩組出生嬰兒性別比較

A組人工授精出生嬰兒共6例，B組共7例，兩組嬰兒性別比例比較，差異無統計學意義（P>0.05），見表2。

3 討論

人工授精是不孕癥患者輔助治療過程中的一項重要手段，而提取的精子質量則會對其人工授精結局產生最直接的影響[7]。因此，合理選擇精子優選方法，提取最優質的精子，對于患者順利妊娠具有重要的意義[8]。目前臨床上常用的精子提取方法主要有上游法和密度梯度離心法，這兩種方法均屬于體外精子優選技術，其主要的目的也一致，即獲得沒有精漿、細胞碎片及病原微生物污染的精子懸液，回收足夠數量具有正常形態和功能的精子[9]。文獻[10]臨床實踐表明，上游法和梯度密度離心法均能夠顯著提高活動精子與前向運動精子的百分率，其中又以上游法具有明顯優勢，而梯度密度離心法則能夠顯著提高精子回收率，這一點明顯優于上游法。人工授精通過將提取后的精子懸液直接注入女性的子宮腔內，這種方式縮短了精子在生殖道內游動的距離，從而顯著提高了妊娠概率[11]。

本次研究中，患者經過上游法和梯度密度離心法提取精子后實施人工授精，盡管上游法的妊娠率和流產率均稍高于梯度密度離心法，但兩者比較，差異無統計學意義（P>0.05），這一研究結果與文獻[12]報道相符，其臨床實踐和研究中還發現，上游法主要適用于精液質量較好、相對正常的精液樣本的精子優選，而對于黏稠度不高或液化的精液、少弱精子癥的精液樣本的精子優選則更加適合使用密度梯度離心法，且在必要時增加梯度離心管數，才能夠盡可能多地收集到全部精液中的可利用精子，從而提高妊娠率[12]。而精子優選方法對人工授精出生的嬰兒性別是否有影響，目前臨床上尚無太多的研究報道。本次研究結果顯示，上游法和密度梯度離心法提取的精子對人工授精出生的嬰兒性別比例相似。但本次研究畢竟樣本量有限，且未進行多次重復證實，因此，對于這一方面的研究尚需大樣本，多次臨床研究來進一步證實。

綜上所述，上游法和密度梯度離心法提取精子在人工授精應用中，其妊娠率、流產率及對子代的性別影響相似，因此，在臨床實際操作過程中可根據患者的具體情況選擇以上任一種精子優選方法來提取精子。

參考文獻

[1]李立梅.不同類型的培養液對第一代試管嬰兒成功率的影響[J].中國性科學，2012，21（11）：46-47.

[2] World Health Organization.WHO laboratory manual forthe examination and processing of human semen[J].5th ed.Geneva：World Health Organization，2010：102-106.

[3]鄶艷榮，賀占舉，王晟，等.不同來源精子行卵胞漿內單精子注射臨床結局分析[J].中國性科學，2012，21（10）：9-12.

[4]王蕾，蔣海玲，段金良.影響供精人工授精妊娠率的多種因素分析[J].中國性科學，2012，21（8）：31-33.

[5] Basak A，Shervani NJ，Mbikay M，et al.Recombinantproprotein convertase 4（PC4） from Leishmania tarentolaeexpression system：purification，biochemical study and inhibitor design[J].Protein Expr Purif，2008，60（2）：117-126.

[6] Guven S，Gunalp GS，Tekin Y.Factors influencing pregnancy rates in intrauterine insemination cycles[J].J Reprod Med，2008，53（4）：257-265.

[7] Badawy A，Elnashar A，Eltotongy M.Effect of sperm morphology and number on success of intrauterine insemination[J].Fertil Steril，2009，91（3）：777-781.

[8]趙芳，孫瑩璞，蘇迎春，等.影響宮腔內人工授精臨床妊娠率的相關因素分析[J].生殖與避孕，2009，29（1）：21-25.

[9]李立梅，王靜力，曹陽.精液處理方法在人工授精中的選擇[J].中國性科學，2009，18（5）：25-26.

[10]徐巧敏，夏舟嵐，吳美君.兩種精液處理方法對宮腔內人工授精妊娠率影響的比較[J].實用醫學雜志，2006，22（4）：456-457.

[11] Van Weert JM，Repping S，Van Voorhis BJ，et al.Performance of the postwash total motile sperm count as a predictor of pregnancy at the time of intrauterine insemination：a meta-analysis[J].Fertil Steril，2004，82（3）：612-620.

[12]顏軍昊，陳子江，胡京美，等.熒光原位雜交檢測精子上游時間對XY精子比例的影響[J].實用婦產科雜志，2006，22（11）：670-672.

（收稿日期：2017-07-18）