復方冰甲乳膏急性毒性試驗研究*

邱 洪，王 慧，張天鑒

（中國人民解放軍第44醫院，貴州 貴陽 550009）

復方冰甲乳膏來源于臨床經驗方，該方通過驗方配比及工藝篩選出，由冰片、硫磺、硼砂、甲硝唑、制霉菌素等按最佳比例組成[1－2]，療效明顯，具有清熱燥濕、收斂生肌之功效，主要用于真菌感染引起的手足癬等。為了保證臨床用藥的安全性，以及為進一步的作用機制研究提供客觀依據，本研究中對此方進行了急性毒性試驗研究，現報道如下。

1 材料與方法

1．1 儀器與試藥

ALC－210．3型電子天平（上海良平儀器儀表有限公司）；Olympus BH －2型顯微鏡（日本）；SC－970型全自動血細胞分析儀（瑞士貝肯公司）；日立7170A型全自動生化分析儀（美國柯達公司）；HPIAS－1000型高清晰度彩色圖文病理分析系統、光鏡。復方冰甲乳膏（貴陽中醫學院中藥制劑研究中心，批號為20150126）；血細胞分析試劑（邁瑞南京生物技術有限公司）；生化實驗試劑盒（北京利德曼生化股份有限公司）。

1．2 動物

取健康的10～16周齡日本大耳白色家兔，清潔級，體質量（2．5 ± 0．5）kg，20 只，雌雄各半，健康合格，由貴陽醫學院實驗動物中心提供，合格證號為SCXK（黔）2012－001。所有動物均在恒溫、恒濕的動物室飼養，且按性別分籠飼養，自由飲水、進食1周后，選擇狀態良好、行為活動無異常的動物進行實驗。

1．3 方法[3－12]

動物分組：取健康合格家兔，用硫化鋇脫毛劑給家兔兩側背部脫毛，每側脫毛區域大小為8 cm×8 cm。脫毛后第2天，選取脫毛未損傷皮膚的家兔隨機分為試驗組和空白對照組，每組10只家兔，雌雄各半。

給藥方法：本試驗擬訂臨床成人日用復方冰甲乳膏劑量為3 g，成人平均體質量按60 kg計，則臨床擬訂成人日用量為0．05 g／kg。復方冰甲乳膏含藥量為51．51%（含45．00%中藥和6．51%西藥）。試驗組家兔皮膚涂抹給予復方冰甲乳膏2 g／kg(按每1 kg體質量含藥量為1．030 2 g／kg計)。給藥方法為用棉簽均勻涂抹家兔兩側背部脫毛區域。空白對照組同法皮膚涂抹給予家兔等劑量的賦形劑。給藥1次，連續觀察14 d。

觀察指標：記錄動物有無毒性反應及實驗前后體質量變化等。第15天將所有家兔心臟取血（取血前12 h禁食），先用10%水合氯醛以800 mg／kg腹腔注射麻醉家兔，然后快速打開胸腔暴露心臟，持10 mL注射器經左心室插入抽取5～8 mL血液標本），測定并分析血常規、血生化指標，包括紅細胞（RBC）、白細胞（WBC）、血小板（PLT）、血紅蛋白（Hb）、單核細胞百分比（M）、淋巴細胞百分比（L）、中性粒細胞百分比（N）；天門冬酸氨基轉移酶（AST）、丙氨酸氨基轉移酶（ALT）、總蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、球蛋白（GLO）、總膽紅素（TBIL）、空腹血糖（FBG）、血清肌酸激酶 (CK)、尿素氮（BUN）、肌酐（Cr）、堿性磷酸酶（AKP）、三酰甘油（TG）、膽固醇（TC）、K＋、Na＋、Cl－。

1．4 統計學處理

2 結果

皮膚涂抹給藥后，動物發育健康，肌肉豐滿，被毛濃密而有光澤、無脫毛，眼睛明亮而靈活，口鼻、肛門無異常分泌物，肛周潔凈，攝食正常，四肢健壯，自發活動正常，體質量逐漸增加。期間未見動物死亡及毒副反應。14 d后處死全部存活家兔，經解剖和尸檢未發現內臟器官異常。兩組動物體質量增加無明顯差異（P＞0．05），詳見表1。心臟取血，比較兩組家兔血常規、血生化指標，無顯著性差異（P ＞0．05），詳見表 2和表 3。

表1 兩組家兔體質量比較（，kg，n＝10）

表1 兩組家兔體質量比較（，kg，n＝10）

組別空白對照組劑量（g ／kg） 性別試驗組2 2 2 2雌雄雌雄給藥前2．38 ± 0．19 2．49 ± 0．16 2．46 ± 0．25 2．47 ± 0．19給藥后7 d 2．41 ± 0．21 2．57 ± 0．08 2．50 ± 0．24 2．58 ± 0．12給藥后14 d 2．51 ± 0．14 2．64 ± 0．07 2．61 ± 0．23 2．64 ± 0．13

表2 兩組家兔血常規指標比較(，n＝10)

表2 兩組家兔血常規指標比較(，n＝10)

項目WBC(109／L)RBC(1012／L)Hb(g／L)PLT(109／L)N(%)L(%)M(%)空白對照組2．85 ± 0．50 5．83 ± 0．41 143．1 ± 7．30 466．7 ± 80．1 35．6 ± 7．00 51．89 ± 9．82 13．99 ± 5．72試驗組2．10 ± 0．60 6．16 ± 0．43 153．2 ± 10．9 456．0 ± 74．72 37．8 ± 9．03 58．50 ± 5．82 9．23 ± 7．52

表3 兩組家兔血生化指標比較(，n＝10)

表3 兩組家兔血生化指標比較(，n＝10)

項目ALT(IU／L)TP(g／L)AST(IU／L)ALB(g／L)GLO(g／L)TBIL(μmol／L)BUN(mmol／L)Cr(μmol／L)AKP(U／L)K＋(mmol／L)Na＋(mmol／L)Cl－1(mmol／L)TC(mmol／L)TG(mmol／L)FBG(mmol／L)CK(U／L)空白對照組87．30 ± 58．13 45．89 ± 3．18 349．52 ± 89．59 27．18 ± 3．21 21．10 ± 2．45 0．45 ± 0．25 7．89 ± 0．74 19．98 ± 2．17 340．5 ± 76．24 7．22 ± 0．38 137．23 ± 2．98 98．68 ± 1．66 0．82 ± 0．18 0．66 ± 4．68 12．88 ± 1．80 3 429．3 ± 1 956．3試驗組85．52 ± 15．32 47．90 ± 1．75 160．25 ± 61．35 28．1 ± 2．82 22．52 ± 2．46 0．81 ± 0．33 7．71 ± 0．47 20．13 ± 1．50 274．48 ± 79．11 6．65 ± 0．83 136．15 ± 1．56 96．40 ± 1．59 0．91 ± 0．15 0．45 ± 8．27 13．96 ± 1．52 1190．72 ± 462．4

3 討論

足癬是常見的傳染性皮膚病，容易復發。國內足癬復發率為50% ～80%[13]，尤其部隊官兵多為集體生活，加上長期在野外訓練，更易引發真菌感染，造成手足癬的相互傳染。

復方冰甲乳膏為中西藥結合的復方制劑，主要用于真菌感染引起的手足癬等，前期臨床試驗已表明其臨床療效與益康倍松乳膏相當[14]。前期皮膚刺激性試驗[15]及其急性毒性試驗研究均顯示，復方冰甲乳膏具有良好的安全性。本試驗結果表明，復方冰甲乳膏對家兔一般狀況無明顯影響。用藥后動物均存活，家兔外觀、行為、呼吸狀態、體位及姿勢、對刺激的反應、大體剖檢均未見明顯異常，復方冰甲乳膏對家兔的體質量無明顯影響。在短期內對家兔血液成分及肝功能、腎功能、電解質、血糖、血脂、心肌酶無明顯影響，即無明顯急性毒性。

綜上所述，復方冰甲乳膏家兔皮膚給藥急性毒性試驗中，家兔每日最大給藥量為2 g／kg，相當于臨床擬訂成人日用量的120倍，未見明顯毒性反應。因此，復方冰甲乳膏是一種安全性較高的外用制劑，值得臨床推廣。

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