孫泉云,夏爐明,鞠厚斌,楊德全,朱九超
(上海市動物疫病預防控制中心,上海 長寧 201103)
豬細小病毒(Porcine parvovirus,PPV)是引起豬繁殖障礙的重要病原之一,妊娠母豬感染PPV后發生流產,并產出死胎、木乃伊胎及病弱仔豬。本病主要通過消化道和呼吸道途徑傳播(口鼻接觸),也可以通過生殖道傳播(配種、人工授精等),并可經母豬胎盤垂直傳播給胎兒。自1966年發現第一例豬細小病毒病病例以來,該病廣泛存在于世界各地并在大多數規模豬場呈散發或地方性流行,嚴重影響著養豬業的發展。為了解上海地區規模豬場和生豬屠宰場豬群的細小病毒感染情況,我們于2015—2017年進行了針對性的PPV檢測。
1.1.1 樣品 來自 2015—2017年上海市 12個規模豬場1 259份種豬扁桃體樣品,以及3個生豬屠宰場1 879份上市肉豬的頜下淋巴結、扁桃體樣品。
1.1.2 試劑來源 豬細小病毒(PPV)熒光 PCR 檢測試劑盒購自廣州維伯鑫生物有限公司,核酸抽提試劑購自德國MN公司。
將待檢組織樣品剪碎、研磨,PBS勻漿,5 400 r/min離心5 min,取上清液進行核酸提取,按試劑盒說明書進行熒光PCR試驗。
病原學檢測結果顯示,2015—2017年規模豬場1 259份種豬扁桃體樣品中檢出PPV陽性110份,陽性率 8.74%,陽性率范圍 2.97%~19.27%,以 2017年檢出率為最高;2015—2017年生豬屠宰場1 879份上市肉豬頜下淋巴結、扁桃體樣品中檢出PPV陽性671份,陽性率35.71%,陽性率范圍21.11%~61.71%,以2017年檢出率為最高,具體結果見表1、表2。

表1 規模豬場樣品PPV檢測結果匯總

表2 屠宰場樣品PPV檢測結果匯總
(1)豬細小病毒主要感染初產母豬,引起流產、產死胎等繁殖障礙,但母豬本身無明顯臨診癥狀,因而本病常被豬場所忽視。經對上海規模豬場種豬和生豬屠宰場上市肉豬的PPV檢測發現,存在較高的陽性率,說明感染帶毒的普遍性,值得關注和警惕。孫泉云等[1]采用PCR和RT-PCR技術,對上海及其周邊地區的30個豬場和人工授精站的生產公豬精液樣品355份進行了豬細小病毒(PPV)的檢測,結果檢出75份PPV陽性,陽性率為21.1%。國外也有相似的報道,Attila等[2]為了證實新鑒定的豬細小病毒在匈牙利的發生與流行情況,從匈牙利不同類型的豬場采集糞便、血清、器官組織、流產胎兒和精液等樣品,采用PCR試驗進行豬細小病毒病的病原學檢測,結果表明匈牙利存在多型豬細小病毒,其中PPV1陽性率為0.5%,PPV2陽性率為 6.4%,PPV3 陽性率為 9.7%,PPV4 陽性率為 6.4%。
(2)細小病毒可通過嚙齒類動物機械性傳播,蚊子是否可作為傳播媒介尚未確認,但已經證實PPV在不同年齡段豬群中可循環傳播,導致帶毒率較高,雖然未進行基因測序,但因為目前豬場普遍使用PPV滅活疫苗免疫,不存在疫苗散毒問題,因此豬群感染的應是流行毒株。吳海超等[3]也發現了不同年齡段豬群的PPV感染問題,從一早、中期生產狀況差的肥育豬場收集豬血清214份,采用PCR檢測豬PPV,選取1份陽性血清接種豬睪丸細胞(ST)進行PPV分離、部分生物學特性研究。結果表明在15、16、17、18、22 周齡豬血清中均檢測到 PPV,檢測陽性率分別為10%、40%、20%、15.4%、9%,而從 2~14及24周齡的豬血清中沒有檢測到PPV。從血清中分離的PPV在ST細胞上傳到第5代能夠出現較穩定的細胞病變(CPE),病毒血凝效價為28,說明PPV在采樣豬場的保育后期和肥育前、中期豬血清中具有較高的陽性率。
(3)豬細小病毒病的預防以免疫接種為主要手段,建議1~3胎母豬實施一年兩次跟胎免疫滅活疫苗,確保生產母豬在一個生產周期內維持堅挺的抗體水平,抵抗野毒侵襲。
(4)根據多年的采樣經驗和不同組織器官的病毒檢出率,種豬活體采樣選擇扁桃體,生豬屠宰場豬組織樣品優先選擇扁桃體和頜下淋巴結,適宜于檢測PPV,說明上述樣品是PPV侵入、寄居和復制的場所。
[1]孫泉云,周錦萍,張維誼,等.種公豬精液中與繁殖障礙有關的 6 種病毒的檢測[J].動物醫學進展,2007,28(11):30-33.
[2]Attila Csagola,Marta Lorincz,Daniel Cadar,et al.Detection,prevalence and analysis of emerging porcine parvovirus infections[J].Archives of Virology,2012,157(6):1003-1010.
[3]吳海超,胡呈才,劉崇靈,等.育肥豬血清中豬細小病毒16WS株的分離與鑒定 [J].湖南農業大學學報(自然科學版),2014,40(5):525-529.