醫(yī)院制劑補(bǔ)骨脂酊的質(zhì)量考察

牟致平，梁瑩瑩，張淑君，馬秉智，劉 曉，赫 軍

（中日友好醫(yī)院 藥學(xué)部，北京 100029）

補(bǔ)骨脂酊為中日友好醫(yī)院院內(nèi)制劑，是由補(bǔ)骨脂加工制成的酊劑，主要指標(biāo)成分為補(bǔ)骨脂素和異補(bǔ)骨脂素。外用補(bǔ)骨脂酊可增加皮膚對紫外線的敏感性，促進(jìn)黑色素的生化合成和轉(zhuǎn)運(yùn)，對白癜風(fēng)治療效果明顯[1，2]。同時補(bǔ)骨脂酊可活血化瘀，促進(jìn)局部血液循環(huán)，營養(yǎng)毛發(fā)，治療斑禿、牛皮癬等疾病[3]。我院補(bǔ)骨脂酊在臨床上使用多年，療效顯著，臨床醫(yī)師與患者對其評價良好。本著保障醫(yī)院制劑質(zhì)量的原則，根據(jù)《醫(yī)療機(jī)構(gòu)制劑注冊管理辦法》相關(guān)要求，本研究參照《北京市醫(yī)療機(jī)構(gòu)劑制規(guī)程》2014年（征求意見版）等質(zhì)量控制方法[4～6]，對留樣觀察的3批樣品進(jìn)行定性鑒別和指標(biāo)成分的含量測定考察，為我院補(bǔ)骨脂酊生產(chǎn)及臨床用藥提供參考。

1 儀器與試劑

Agilent 1260 series型高效液相色譜儀，CPA225D電子天平（德國賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司），KQ-300DE型數(shù)控超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）。硅膠G薄層板（青島海洋化工廠）。補(bǔ)骨脂酊為中日友好醫(yī)院中藥制劑室自制，規(guī)格為 100ml/瓶，批號分別為：20170214、20170628、20170801；補(bǔ)骨脂素、異補(bǔ)骨脂素為對照藥材，均購自中國藥品生物制品檢定所，批號分別為：110739-201617、110738-201614。試驗(yàn)中所用甲醇為色譜純，水為超純水，其他試劑均為分析純。

圖1 薄層色譜圖

2 方法與結(jié)果

2.1 定性鑒別[4]

取補(bǔ)骨脂素、異補(bǔ)骨脂素對照品，加乙酸乙酯制成每1ml各含2mg的混合溶液，作為對照品溶液，另取本品作為供試品溶液。照薄層色譜法實(shí)驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以正乙烷-乙酸乙酯（4：1）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%氫氧化鉀甲醇溶液，置紫外燈（365nm）下檢視。供試品色譜在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)，見圖1。

2.2 含量測定[6]

2.2.1 色譜條件色譜柱

為 Symmetry C18 （4.6×250mm）； 流動相為甲醇-水（50：50，V/V），流速為 1.0ml/min，檢測波長為 246nm，帶寬為 4nm，柱溫為 40℃，進(jìn)樣量為 10μl。

2.2.2 溶液的制備

（1）對照品溶液的制備。精密稱取補(bǔ)骨脂素、異補(bǔ)骨脂素對照品適量，加甲醇溶解，得濃度分別為0.1100mg/ml、0.1176mg/ml的補(bǔ)骨脂素、異補(bǔ)骨脂素對照品儲備液。分別從上述對照品儲備液精密量取10ml置50ml容量瓶中，加甲醇至刻度即得濃度為 22.0000μg/ml、23.5200μg/ml的補(bǔ)骨脂素、異補(bǔ)骨脂素對照品溶液。（2）供試品溶液的制備。取供試品5ml，置于100ml容量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。

2.2.3 系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)

取“2.2.2”項(xiàng)下對照品溶液、供試品溶液各 10μl，按照“2.2.1”項(xiàng)下方法進(jìn)樣測定。在相應(yīng)保留時間上，供試品色譜與對照品色譜有相同的色譜峰。理論板數(shù)以補(bǔ)骨脂峰計(jì)應(yīng)不少于3000，且補(bǔ)骨脂素、異補(bǔ)骨脂素分離度＞1.5，見圖2。

2.2.4 含量測定

按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算含量，3個批次補(bǔ)骨脂酊中補(bǔ)骨脂素和異補(bǔ)骨脂素的總含量見表1。

表1 樣品含量測定結(jié)果（mg/ml，n=3）

圖2 高效液相色譜圖

3 討論

目前我院補(bǔ)骨脂酊質(zhì)控執(zhí)行的是《北京市醫(yī)療機(jī)構(gòu)制劑規(guī)程》1984年版的規(guī)定，距今已有30余年，該標(biāo)準(zhǔn)中沒有含量測定檢查項(xiàng)，然而其唯一的原料藥補(bǔ)骨脂的指標(biāo)成分明確，補(bǔ)骨脂素和異補(bǔ)骨脂素的含量直接影響制劑的有效性[7]，因此本文采用HPLC方法對3批樣品進(jìn)行含量測定。文獻(xiàn)中對該成分的規(guī)定為每1ml補(bǔ)骨脂酊中含補(bǔ)骨脂素和異補(bǔ)骨脂素的總量須≥1.2mg[5，6]，結(jié)合中國藥典中對補(bǔ)骨脂的含量限度要求及3批樣品的測定結(jié)果[8]，暫定我院自制制劑補(bǔ)骨脂酊含量檢測限度要求為每1ml補(bǔ)骨脂酊含補(bǔ)骨脂素和異補(bǔ)骨脂素總量≥1.2mg。

通過本次質(zhì)量考察可以得出，我院補(bǔ)骨脂酊符合現(xiàn)行相關(guān)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，且通過本次研究制定出高于現(xiàn)行質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的內(nèi)部控制標(biāo)準(zhǔn)，為生產(chǎn)穩(wěn)定有效的醫(yī)院制劑提供了依據(jù)，以保證自制制劑的有效性。

[1]朱小蘭，盛國榮，楊永美.補(bǔ)骨脂酊對實(shí)驗(yàn)性白癜風(fēng)模型的影響[J].中藥藥理與臨床，2014，30（6）：115-117.

[2]王曉燕，呂月桂，張麗.外用補(bǔ)骨脂酊聯(lián)合窄譜中波紫外線治療白癜風(fēng)的臨床觀察及護(hù)理干預(yù)[J].中國醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2016，13（14）：146-149.

[3]李恒，程孝頂，劉蘭.綜合治療法治療斑禿39例臨床觀察[J].中醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2013，2：74-75.

[4]北京市食品藥品監(jiān)督管理局.北京市醫(yī)療機(jī)構(gòu)制劑規(guī)程（征求意見版）[M].北京：中國商業(yè)出版社，2014.9-10.

[5]解放軍總后勤部衛(wèi)生部.中國人民解放軍醫(yī)療機(jī)構(gòu)制劑規(guī)范[M].北京：人民軍醫(yī)出版社，2002.279-280.

[6]徐蘭，陶曉璇，王丹輝.補(bǔ)骨脂酊質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的建立[J].中國藥師，2015，2：329-331.

[7]曹金一，劉京晶，黃文華.補(bǔ)骨脂藥理作用與臨床應(yīng)用研究進(jìn)展 [J].中藥藥理與臨床，2008，24（6）：89-92.

[8]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典：一部[S].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2015.305.