家兔延髓迷走神經連合核的形態及細胞構筑研究

潘玲玲

摘 要 本實驗用石蠟切片和尼氏體染色的方法，對家兔延髓中迷走神經連合核的形態結構及核內細胞的數量、大小做了精確測量分析，測得迷走神經聯合核全長2.1mm，位于中央管上方，由中央管兩側的迷走神經背核過渡而來。俯視觀察呈“Y” 字型，側視觀察前端高度小，后端高度大，而后經過對部分家兔迷走神經連合核細胞面積的測定，最后得出家兔迷走神經連合核細胞大多為小型細胞，極少數為大型及中型細胞，這些結果為神經生物學奠定了一些形態學和解剖學的基礎。

關鍵詞 家兔 延髓 神經核 迷走神經連合核

中圖分類號：S826.1 文獻標識碼：A

延髓位于腦干的最后端，是上下行神經傳導的必由之路，具有許多復雜的結構和極其重要的生理功能。迷走神經連合核是延髓內的重要核團。位置在延髓尾段，中央管背外方，背正中隔近旁， 是副交感一般內臟運動核，發出迷走神經節前纖維，控制大部分胸腹腔臟器的活動，在器官內和旁節交換神經元。節后纖維管理胸腹腔內臟平滑肌、心肌、胃肌、腺體的運動和分泌。隨著神經解剖學和神經生理學研究方法的不斷發展，人們對其的認識也不斷深入。然而，迄今關于家兔腦迷走神經連合核的實驗研究國內很少有報道，僅見于國外六十年代以前的一些資料，其中Monnier等和H.Sawyer等人作的兔腦定位圖譜雖較為系統，但仍有腦干包括不全和室位粗略之不足。這種狀況遠不能適應現代醫學科研的要求。本課題擬對“家兔”的迷走神經連合核做細致的測量研究，從而為醫學科研領域提供可靠詳盡的神經解剖學依據。

1材料與方法

1.1兔腦石蠟切片的制作

1.1.1灌流固定、取材和水洗

家兔頸總動脈放血后，由該動脈向頭端灌流10%福爾馬林（4%甲醛）溶液700ml，進行固定。5日后取下兔腦用骨鉗剝去頭骨，取出腦組織，流水沖洗48小時以盡量洗去甲醛固定液。

1.1.2脫水與透明

水洗后的兔腦標本入50%乙醇24小時→70%乙醇24小時→95%乙醇24小時→正丁醇Ⅰ24小時→正丁醇Ⅱ24小時。

1.1.3透蠟和石蠟包埋

透明后的材料入1/2正丁醇+1/2石蠟24小時→石蠟Ⅰ24小時→石蠟Ⅱ24小時→石蠟包埋。

1.1.4連續切片

腦組織脫水、透明、浸蠟、包埋后做成一套20 m厚的腦切片，隔4張取1張，溫水展片后各貼于0.5%鉻礬明膠處理過的載玻片上，37oC24小時以上烘干。

1.2染色液的制備

1.2.1 Unna氏多色性美藍染液配方

美藍（Methylene blue）1g，碳酸鉀1g，蒸餾水100ml，無水乙醇20ml。

1.2.2染液的制備

將配方內各成分混合后緩慢加熱、攪拌使之溶解，然后室溫下放置2-3日，染色時用蒸餾水稀釋5-10倍。

1.3尼氏體染色

染色程序兔腦石蠟切片入二甲苯Ⅰ 10分鐘→二甲苯Ⅱ 10分鐘→1/2二甲苯+1/2無水乙醇2分鐘→無水乙醇Ⅰ2分鐘→無水乙醇Ⅱ2分鐘→95%乙醇2分鐘→70%乙醇2分鐘→蒸餾水2分鐘→Unna氏多色性美蘭染液6分鐘→乙二醇2分鐘→自來水2分鐘→50%乙醇2分鐘→70%乙醇2分鐘→95%乙醇2分鐘→無水乙醇Ⅰ2分鐘→無水乙醇Ⅱ2分鐘→二甲苯Ⅰ2分鐘→二甲苯Ⅱ2分鐘→中性樹膠封片。

1.4觀察與統計計算

切片經過染色封片后，于室溫下晾干。使用光學顯微鏡（日本Olympus公司）觀察，并用microview MVC3000 數碼顯微照相機在光學顯微鏡（日本Olympus公司）和解剖鏡（日本Nikon公司）下進行拍照。數碼相片經過Adobe Photoshop處理，并用數據分析軟件Scion Image（Version beta 4.0.2，美國Scion公司）進行圖像中細胞的數據測量分析，Microsoft Excel XP進行生物統計處理。確定核團：根據前人對禽類和哺乳動物腦干延髓中神經核團的認識，結合光鏡下對家兔腦干延髓中核團形態、位置以及組成核團細胞胞體形態，大小等特征的觀察辨認核團。核團命名依據國際哺乳動物解剖學名詞。

計算延髓內核團的吻尾徑長度：根據該核團在冠狀切面上出現的切片數乘以切片的厚度即為核團長度。

通過觀察描述核團的形態、大小和位置。對細胞的觀察主要通過4倍物鏡下的肉眼觀看，此時效果最佳。

觀察和研究核團的細胞構筑：觀察描述細胞的形態，測量細胞胞體直徑，在高倍顯微鏡下，對可辨認出核仁的細胞胞體，過胞體中心測量該細胞的最長徑和與該最長徑垂直的徑。用兩者之和除以2的數據作為胞體的直徑。

2結果

迷走神經聯合核的染色結果、長度、位置、形態和大小

尼氏體和核仁呈天藍色，背景色很淺或無色。細胞核的核質染色亦淺。迷走神經連合核全長2.1mm，在解剖鏡下觀察，位于中央管上方，由中央管兩側的迷走神經背核過渡而來。后端位于閂的前部，薄束核下方，前端位于延髓頂部，兩側薄束核之間，第四腦室后端消失。俯視觀察呈“Y” 字型，側視觀察前端高度小，后端高度大，部分斷面面積如表一所示。

迷走神經連合核尼氏體的形狀小而圓，密度大，核為圓形居中，位置在延髓尾段，中央管背外方，背正中隔近旁。分尼氏體長徑、短徑及面積如表一所示。饒志仁等（1985）對鼠、楊振鐸等 （1985）對狗的研究中，認為胞體直徑在20 m以下為小型細胞，20-35 m為中型細胞，35 m以上為大細胞。據此可以看出，家兔迷走神經連合核細胞大多為小型細胞，極少數為大型及中型細胞。