◎ 林祥群,劉文玉,顏雪琴,魏長慶
(1.新疆石河子職業技術學院,新疆 石河子 832000;2.石河子大學,新疆 石河子 832000)
紅棗在新疆的種植較廣,新疆石河子市150團地處沙漠腹地,太陽輻射十分豐富,晝夜溫差大,該處生產的紅棗具有含糖量高、營養豐富、色澤好等優點。本研究以150團紅棗為主要原料,用課題組篩選的醋酸菌H2為發酵菌種,進行紅棗果醋飲料工藝研究,以期為市場化生產紅棗果醋飲料提供技術參數。
菌種:酒精發酵菌種,安琪酵母;醋酸發酵菌種,H2菌,由本課題組自行篩選得到。
主要原料:紅棗,購買自石河子市150團紅棗種植區。
其他輔料和試劑:白砂糖、氫氧化鈉、超純水。
主要儀器設備:PHS-3C酸度計,紫外分光光度計UV1240,電子天平普利賽斯XB3200C,發酵罐15 L,島津LC-2010型高效液相色譜儀,RE52-05型旋轉蒸發儀,UV-754 c型紫外可見分光光度計,德國EPPENDORF 5417R高速冷凍離心機,手持糖度計WZ108型,美國SONICA VCS500超聲波破碎儀,恒溫培養箱ZXSD-1160,粉碎機HD-500。
紅棗→清洗→去核→破碎→過濾→調整濾液糖度→酒精發酵→醋酸發酵→澄清→調配→殺菌→包裝。
(1)原料處理:挑選無腐爛的紅棗,清洗干凈后去核,初步粉碎,添加超純水浸提,再次粉碎使溶出物盡可能溶出,紗布過濾取得濾液備用,調整濾液糖度。
(2)將濾液滅菌后降溫30 ℃,加入5%活化好的安琪酵母菌,攪拌均勻,28 ℃發酵。含糖量為0.4%以下時結束發酵,將發酵液過濾,所得濾液為酒精發酵液。
(3)加入8%的醋酸菌液到酒精發酵液中,在28 ℃進行醋酸發酵,發酵過程中檢測酸度、糖度、含酯量等,直到醋酸含量不再上升。
(4)醋酸發酵過程中各因素的影響。①醋酸發酵方法。將活化好的10%的醋酸菌接入酒精發酵液中,28 ℃恒溫培養,定期檢測酸度、酒度、含酯量等,直到醋酸含量不再上升為止。②發酵溫度對液態發酵的影響。取酒精發酵液200 mL,裝入500 mL的三角瓶中,調節酒精濃度為5%(V/V),滅菌,待冷卻后加入10%醋酸菌培養液,分別放置在24、27、30、33、36 ℃的培養箱中,15 d后測定產酸和含酯量,確定最適的發酵溫度。③酒精濃度對液態發酵的影響。取酒精發酵液200 mL,裝入500 mL的三角瓶中,調節酒精濃度分別4%、6%、8%、10%、12%滅菌,待冷卻后加入10%經二次擴大培養的醋酸菌培養液,分別放置在28 ℃的培養箱中,15 d后分別測定產酸和含酯量,確定最適的發酵酒精濃度。④搖床轉速對液態發酵的影響。取酒精發酵液200 mL,裝入500 mL的三角瓶中,調節酒精濃度為6%,滅菌,待冷卻后加入10%經二次擴大培養的醋酸菌培養液,放置在28 ℃,轉速分別為0、100、150、200、250 r/min的搖床中培養,14 d后測產酸和含酯量,確定最適搖床轉速。
(1)紅棗保健果醋研制工藝流程。紅棗煮制→榨汁→離心→過濾→紅棗汁→調配(白砂糖)→混勻→精濾→灌裝→殺菌→成品。
(2)主要配料的選擇。果醋的主要成分是乙酸,乙酸具有極強的刺激性氣味,即使用水稀釋后也很難飲用,所以在本試驗中添加紅棗果汁,使之有紅棗果香味;添加少量的蔗糖,以改善口味。
(3)紅棗果汁用量范圍的確定。將紅棗汁配成3%、4%、5%、6%、7%的水溶液,以口感和嗅覺對它們進行感官評價,確定紅棗汁的用量。
(4)發酵果醋用量的確定。紅棗果醋的添加量對果醋的風味有很重要的影響,取不同量的發酵果醋配制成3%、4%、5%、6%、7%的水溶液,然后進行感官評價。
(5)蔗糖用量范圍的確定試驗。取不同量的蔗糖配制成4%、6%、8%、10%、12%的水溶液,進行感官評價。
(6)紅棗果醋飲料的精濾。對調配好的紅棗果醋飲料用0.45 μm孔徑的膜過濾。
(7)產品質量指標測定方法。①感官指標評定方法,見表1。②理化指標測定方法。酒度:酒精蒸餾法;可溶性固形物:手持糖度儀測定;還原糖:直接滴定法;總酸:酸度計法;總糖:直接滴定法。③微生物指標測定方法。細菌總酸:平板菌落計數法(GB4789.2-2008);大腸菌群:平板菌落計數法;致病菌:平板菌落計數法。

表1 感官評定標準表
3.1.1 酒精發酵結果
酒精發酵5 d后,連續3 d測定其糖度均在4°Bx保持不變,初步判斷酒精發酵結束。取其粗濾液,測酒精濃度為8.23%,酒精發酵結束。
3.1.2 酒精發酵過程中還原糖、酒精濃度、總酸的變化
酒精發酵過程中每天取樣測其還原糖、酒精濃度、總酸,如圖1、2、3所示。

圖1 酒精發酵過程中還原糖的變化圖

圖2 酒精發酵過程中酒度的變化圖

圖3 酒精發酵過程中酸度的變化圖
由圖1、2、3可看出,在酒精發酵前期,還原糖不斷降低,而對應的酒度上升。這是因為糖分不斷被分解,產生酒精。而在酒精發酵后期,還原糖和酒度變化幅度都不大,因為發酵后期糖分基本轉化完全,而高酒度又抑制酵母菌的生長。在整個酒精發酵過程中總酸變化不大,稍微有上升。酒精發酵過程結束時酒度達8.23%。
3.1.3 不同溫度對液態發酵的影響
將酒精發酵液分別放置在24、27、30、33、36 ℃的恒溫培養箱中,15 d后測定產酸量和含酯量,其試驗結果見表2和圖4。

表2 不同發酵溫度對產酸和產酯的影響表

圖4 不同發酵溫度對產酸量和產酯量的影響圖
超過30 ℃,總酸含量減少,產酯量下降,分析原因可能是溫度越高,醇和酯的揮發速度加快,造成酸和酯含量下降。
3.1.4 酒精濃度對液態發酵的影響
將酒精發酵液調節酒精濃度分別4%、6%、8%、10%、12%后分別放置27 ℃的電熱恒溫培養箱中培養,15 d后分別測定各自的產酸量和含酯量,其試驗結果見表3和圖5。

表3 不同酒精濃度對產酸量和產酯量的影響表

圖5 不同酒精度對產酸和產酯的影響圖
由表3和圖5可知,產酸量在6%時達到最大,但產酯量在8%時達到最大。超過8%時,總酸、揮發酯含量顯著減少,總酸和總酯在酒度為4%~8%時變化不大,所以醋酸發酵過程的最適酒精濃度為4%~8%。
3.1.5 不同搖床轉速對深層液態發酵的影響
將酒精發酵液分別置于轉速0、100、150、200、250 r/min的搖床中培養,15 d后分別測定各自的產酸量和含酯量,其試驗結果見表4和圖6。

表4 搖床轉速對產酸和產酯的影響表

圖6 搖床轉速對產酸量和產酯量的影響圖
由表4和圖6顯示的結果可以得出,轉速對產酸量和產酯量的影響都不大,最高產酸量為64.56 g/L,最低產酸量為62.28 g/L,相差2 g/L多;最高產酯量為0.978 g/L,最低產酯量為0.924 g/L相差不到0.5 g/L。分析原因可能是由于各處理均在恒溫搖床中培養,三角瓶中裝入發酵液的量均相同,瓶內均有大量的氧氣,適合菌體生長,因此搖床培養的意義不大,如圖6所示。
3.2.1 紅棗汁用量范圍的確定試驗
紅棗汁能夠賦予果醋飲料特有的紅棗香味,也能緩和乙酸的刺激性氣味,因此紅棗汁的用量直接影響紅棗果醋飲料的品質,其試驗的結果見表5。

表5 紅棗果汁在水溶液中添加量與呈味的關系表
由表5可知,紅棗汁用量范圍選4~6 mL比較合適,過少不能賦予果醋飲料的果香味;過多,提高了產品的成本。
3.2.2 果醋用量范圍的確定試驗
果醋是調配果醋飲料的基礎,果醋本身的品質如酸度、色澤、氣味都影響果醋飲料的品質。本試驗采用實驗室自制的紅棗果醋液進行調配,其試驗結果見表6。

表6 紅棗果醋在水溶液中添加量與呈味的關系表
由表6可知,每100 mL溶液中加入4~6 mL發酵紅棗果醋,水溶液的口感和風味比較合適。紅棗果醋添加量過少無明顯醋香味,過多帶有刺激性氣味。
3.2.3 白砂糖用量范圍的確定
添加少量的白砂糖,以緩和乙酸的刺激性氣味,改善果醋飲料的口感。其試驗結果見表7。

表7 白砂糖在水溶液中添加量與呈味的關系表
由表7可知,白砂糖添加量在8~10 g/100 mL較合適,風味和口感比較好。白砂糖添加量過低,甜味不明顯,添加量過高,甜味太強。
3.2.4 紅棗果醋飲料的精濾
對調配好的紅棗果醋飲料用0.45 nm孔徑的膜過濾,過濾出的果醋飲料澄清度高。
3.2.5 產品質量指標
①紅棗果醋飲料感官指標。澄清度,清澈透明;色澤,淡紅色,光亮;香氣,清香醇郁,具有和諧的果醋特有香味;口味,酸甜適口,柔和清爽,口感潤滑。②紅棗果醋飲料理化指標。可溶性固形物≥8.0 g/100 mL;總酸≥0.5 g/100 mL;總糖為5~7 g/100 mL。③紅棗果醋飲料微生物指標。微生物指標,細菌總數≤60 CFU/mL;大腸菌群≤8 MPN/100 mL;致病菌未檢出。
本試驗確定在醋酸發酵階段的最適發酵溫度為24~30 ℃,最適酒精濃度為4%~8%,搖床轉速對醋酸發酵影響不大。經實驗室自行發酵的紅棗果醋為原料進行調配果醋飲料,最佳調配工藝為:果醋添加量為6 mL/100 mL,紅棗汁添加量為5 mL/100 mL,白砂糖添加量為8 g/100 mL。調配好的紅棗果醋飲料經巴氏殺菌后符合果蔬汁飲料衛生標準。