瓜蔞皮注射液去熱原工藝改進和質量控制

周建華 吳阿萍 劉怡婷

摘 要 目的：降低瓜蔞皮注射液在生產過程中出現細菌內毒素二次污染的風險。方法：使用鈦合金過濾器替代板框過濾器，對去熱原過程中的脫炭步驟進行工藝優化。結果：工藝優化后所得藥液中細菌內毒素的含量較工藝優化前下降超過80%，且其它各項質量指標均符合規定。結論：使用鈦合金過濾器代替板框過濾器可以顯著降低在脫炭過程中造成細菌內毒素二次污染的風險，且對產品質量不存在負面影響。

關鍵詞 瓜蔞皮注射液 板框過濾 鈦合金過濾器 去熱原 二次污染

中圖分類號：R927.12； TQ460.64 文獻標志碼：A 文章編號：1006-1533（2018）09-0070-03

Improvement of the process for the depyrogenation of Gualoupi injection and its quality control

ZHOU Jianhua*， WU Aping， LIU Yiting

（SPH No.1 Biochemical & Pharmaceutical Co.， Ltd.， Shanghai 200240， China）

ABSTRACT Objective： To reduce the risk of secondary contamination of endotoxin in the manufacturing process for Gualoupi injection. Methods： The process at the decarbonization step for depyrogenation was optimized by using a titanium filter instead of a plate and frame filter used in the original process. Results： The content of endotoxin was reduced by more than 80% and all other quality indicators were in compliance after process optimization. Conclusion： Substitution of a titanium filter for a plate and frame filter can significantly reduce the risk of a secondary contamination of endotoxin at the decarbonization step and there is no negative effect on the quality of Gualoupi injection.

KEy WORDS Gualoupi injection； plate and frame filter； titanium filter； depyrogenation； secondary contamination

瓜蔞皮注射液是由瓜蔞皮作為藥材，經過濃縮、提取等多步工藝所制成的中藥注射劑。其可有效控制心絞痛、冠心病的發作，改善心肌缺血[1]。在藥理機制上的研究表明該注射劑具有多種保護心肌缺血的活性成分，其保護作用呈多途徑多靶點[2]。近年來在臨床上的應用日益廣泛，對心、腦、肺等多臟器的多種疾病的治療都有顯著療效[3]。

瓜蔞皮注射液以中藥材瓜蔞皮作為原料，經過多次的煎煮、乙醇沉淀、樹脂交換、濃縮制成濃縮液，再經過熱處理和過濾制成提取液，最后通過制劑工藝制成最終成品[4]。

由于瓜蔞皮注射液的原材料為瓜蔞皮中藥材，生產工藝步驟繁雜，因此熱原是其最重要的質量控制指標之一，在生產過程中，必須考慮熱原的有效去除，以保證最終產品質量[5]。

在所注冊的瓜蔞皮注射液生產工藝中，采用中藥注射劑中常用的活性炭吸附法去除熱原[6]，在加入活性炭并進行熱處理后，使用板框過濾進行脫炭，脫炭前后藥液中的細菌內毒素含量采用定量法測定。我們發現脫炭后細菌內毒素含量有升高的趨勢，雖仍處于質量標準范圍之內，但存在二次污染的可能。為了進一步提高產品質量，降低二次污染的風險，本研究對脫炭步驟進行了工藝優化。

1 資料和方法

1.1 樣品與試劑

瓜蔞皮濃縮液（中間體，批號：20170842、20170843、20170844）由本公司生產；活性炭（藥用輔料，批號：1751202）購自上海活性炭廠有限公司；其他試劑均為市售商品。

1.2 儀器與設備

CXAS176-200板框過濾器（上海合懋環保設備有限公司）；1 mm鈦合金過濾器（上海格氏流體設備科技有限公司）；WRY-2015微機熱原測溫儀（上海遼卓科貿有限公司）；BET-48G細菌內毒素定量測定儀（天津市天大天發科技有限公司）；Seven Compact S210 pH計（梅特勒托利多儀器上海有限公司）；UV-2700紫外可見光分光光度計（島津蘇州儀器有限公司）；1200高效液相色譜儀（安捷倫科技有限公司）。

1.3 方法

1.3.1 脫炭工藝優化

原工藝在加入活性炭并完成熱處理后，采用由澄清板組成的板框過濾器進行脫炭，但由于澄清板無法進行高溫滅菌，且沒有相關方法對澄清板進行質量控制，使用該方法有可能引入二次污染。優化后的工藝采用鈦合金過濾器進行脫炭（圖1），由于鈦合金過濾器可在121 ℃、30 min的條件下進行濕熱滅菌，可有效控制二次污染的風險。

1.3.2 熱原、細菌內毒素、色澤、pH、總固體及含量測定

在《中國藥典》（2015年版）中，對于熱原的檢驗方法是使用家兔法[7]，完成單次檢驗的時間需要至少2 h，且無法提供定量的結果。因此，本研究還采用細菌內毒素濁度法定量測定熱原物質[8]。采用兩種方法測定可為制劑的整體質量控制和風險降低提供更好的參考依據。

由于使用活性炭去除熱原，可能導致主藥含量的下降[9]。因此，需對工藝優化前后瓜蔞皮提取液的色澤、pH、總固體及含量等內容進行分析和比較[10]。

1.3.3 指紋圖譜測定

使用高效液相色譜法，對瓜蔞皮提取液在工藝優化前后的指紋圖譜及其相似度進行考察[11]。

2 結果

2.1 各檢測指標比較

工藝優化前后各3批瓜蔞皮提取液中的熱原、細菌內毒素、色澤、pH、總固體及含量的比較見表1。

結果表明，工藝優化前后各批樣品的熱原均合格，但工藝優化后3批瓜蔞皮提取液中細菌內毒素的含量明顯下降，說明使用由澄清板組成的板框過濾會帶入少量的細菌內毒素，產生二次污染，而使用鈦合金過濾器能夠有效避免引入二次污染。

工藝優化前后各3批瓜蔞皮提取液的色澤、pH、總固體和含量指標無明顯差異。

2.2 瓜蔞皮提取液指紋圖譜

工藝優化前后各3批瓜蔞皮提取液的指紋圖譜見圖2。工藝優化前3批樣品的相似度分別為0.92、0.94、0.94；工藝優化后分別為0.94、0.95、0.95，均符合要求，表明工藝優化不會對產品的成分造成影響，也不會引入新的雜質。

3 討論

此次工藝優化使用鈦合金過濾器代替原工藝中使用的由澄清板組成的板框過濾器，降低了由于澄清板無法滅菌所帶來的二次污染風險。通過驗證表明，工藝優化前的板框過濾的確會引入少量的細菌內毒素而導致二次污染；優化后的鈦合金過濾器則由于可進行高溫滅菌，并且在一定條件下能夠將細菌內毒素滅活[12]，因此能有效避免細菌內毒素的二次污染。

通過對工藝優化前后的瓜蔞皮提取液進行檢驗，結果表明總固體和含量均能保持在同一水平。且相比于板框過濾器，在保證過濾效果的同時，還能略微減少主藥含量的損失。

工藝優化前，過濾每100 kg藥液所需的時間約為20 min，工藝優化后約為10 min。因此，在過濾效果不降低的前提下，能夠使過濾效率提升一倍。

工藝優化前的板框過濾所使用的澄清板均為一次性耗材，優化后所使用的鈦合金過濾器則可以多次重復使用，從而能夠降低生產成本，且更環保。

此外，板框過濾器主要由木漿、棉漿和硅藻土等制成，其在工藝過程中除了有細菌內毒素引入之外，可能還會引入其他雜質。因此，其對產品質量的影響還需進一步深入研究。

參考文獻

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