丹參酮ⅡA磺酸鈉對(duì)神經(jīng)病理痛大鼠痛閾的作用及機(jī)制

郭 莉 吳茂彬 張 帥 潘 強(qiáng)

(萊蕪市人民醫(yī)院 泰山醫(yī)學(xué)院附屬萊蕪醫(yī)院麻醉科，山東 萊蕪 271199)

神經(jīng)病理性疼痛是指由軀體感覺(jué)神經(jīng)系統(tǒng)的損傷或疾病而直接造成的疼痛，它屬于一種慢性疼痛，表現(xiàn)為自發(fā)性疼痛、痛覺(jué)過(guò)敏、異常疼痛和感覺(jué)異常等臨床特征〔1〕。神經(jīng)病理性疼痛是臨床上常見(jiàn)的一類疼痛相關(guān)疾病，但其發(fā)生的確切分子機(jī)制目前仍不十分清楚。近年研究顯示，核因子(NF)-κB信號(hào)通路的異常激活可能與神經(jīng)病理性疼痛的發(fā)生發(fā)展有關(guān)〔2〕。本研究探討丹參酮ⅡA磺酸鈉(SSI)提高神經(jīng)病理痛大鼠痛閾的作用及可能機(jī)制。

1 材料和方法

1.1動(dòng)物分組及模型制備 雄性清潔級(jí)Wistar大鼠27只，購(gòu)自山東大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，體重(240±62)g，6～8周齡，于干燥環(huán)境飼養(yǎng)2 w后進(jìn)行試驗(yàn)。27只Wistar大鼠隨機(jī)分為對(duì)照組，模型組和SSI組，每組9只。參照文獻(xiàn)〔3〕，采用坐骨神經(jīng)慢性壓迫法制備神經(jīng)病理痛模型。常規(guī)麻醉后將大鼠固定在試驗(yàn)臺(tái)上，備皮消毒后切開(kāi)大鼠右后肢股骨中段皮膚，分離肌肉和組織暴露坐骨神經(jīng)，用絲線結(jié)扎4道，松緊適度，以不完全阻斷血管為宜。對(duì)照組備皮消毒后切開(kāi)大鼠右后肢股骨中段皮膚，分離肌肉和組織暴露坐骨神經(jīng)，不結(jié)扎。

1.2試劑與儀器 SSI〔規(guī)格10 mg/支，阿爾貝拉醫(yī)藥控股(通化)有限公司生產(chǎn)〕；CX3C超化因子受體(CX3CR)1和NF-κB引物華大基因公司合成；RNA提取試劑盒；cDNA反轉(zhuǎn)錄試劑盒，(日本Takara公司)；實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀(9700型)(美國(guó)ABI公司)。

1.3動(dòng)物給藥 SSI組術(shù)后開(kāi)始腹腔注射SSI 25 mg/kg，1次/d；連續(xù)7 d；對(duì)照組和模型組注射生理鹽水25 mg/kg，1次/d，連續(xù)7 d。

1.4觀察指標(biāo) 3組大鼠分別于術(shù)前及術(shù)后第3、6和12天測(cè)定機(jī)械痛和熱痛閾值，術(shù)后14 d處死各組大鼠，采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法檢測(cè)各組大鼠腰椎脊髓CX3CR1和NF-κB mRNA表達(dá)水平。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS17.0軟件進(jìn)行方差分析。

2 結(jié) 果

SSI組機(jī)械和熱痛閾顯著低于對(duì)照組而顯著高于模型組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見(jiàn)表1。處理12 d后，SSI組脊髓CX3CR1和NF-κB mRNA表達(dá)水平顯著高于對(duì)照組而顯著低于模型組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見(jiàn)表2。

表1 各組各時(shí)間點(diǎn)機(jī)械痛閾及熱痛閾比較

與對(duì)照組比較：1)P<0.05;與模型組比較：2)P<0.05，下表同

表2 各組脊髓CX3CR1和NF-κB mRNA表達(dá)水平比較

3 討 論

神經(jīng)病理性疼痛發(fā)生的確切分子機(jī)制仍不十分清楚〔4,5〕。流行病學(xué)研究顯示〔6,7〕，全世界范圍內(nèi)約有1/6的人口存在不同程度的神經(jīng)病理性疼痛，嚴(yán)重影響患者生活質(zhì)量。由于神經(jīng)病理性疼痛的病因多種多樣，其發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，目前尚無(wú)一種藥物對(duì)所有疾病的疼痛過(guò)程都有效。目前研究認(rèn)為〔8〕，神經(jīng)病理性疼痛與物理性的機(jī)械損傷、代謝或營(yíng)養(yǎng)性神經(jīng)改變、病毒感染、藥物或放療的神經(jīng)毒性、缺血性神經(jīng)損害、神經(jīng)遞質(zhì)功能障礙等有關(guān)，其發(fā)生的病理生理基礎(chǔ)認(rèn)為〔9〕，各種原因?qū)е律窠?jīng)細(xì)胞膜Na+通道和電壓門(mén)控Ca+通道的表達(dá)增高，并釋放一些介質(zhì)，使神經(jīng)元的正常生理活動(dòng)發(fā)生改變，導(dǎo)致對(duì)非傷害性或微小傷害的外周刺激反應(yīng)加劇。大量自發(fā)放電，不停地向脊髓神經(jīng)元發(fā)放異位沖動(dòng)，增加脊髓神經(jīng)元的敏感性和突觸與突觸之間神經(jīng)遞質(zhì)的傳遞，從而引起脊髓水平的興奮性增高和感覺(jué)功能異常。同時(shí)也研究顯示〔10〕，神經(jīng)病理性疼痛動(dòng)物模型中CX3C趨化因子表達(dá)上調(diào)，進(jìn)一步激活NF-κB信號(hào)通路，促進(jìn)各種炎性細(xì)胞因子的釋放，最終導(dǎo)致脊髓膠質(zhì)細(xì)胞活化和痛覺(jué)過(guò)敏。SSI為唇形科植物丹參中分離的二萜醌類化合物丹參酮ⅡA，經(jīng)磺化而得到的水溶性物質(zhì)。藥理學(xué)研究顯示〔11〕，其具有穩(wěn)定細(xì)胞離子通道，抑制炎癥及疼痛介質(zhì)釋放的生物學(xué)功能。嚴(yán)琳等〔12〕研究顯示SSI能夠顯著提高試驗(yàn)組大鼠機(jī)械痛和熱痛閾值，結(jié)果說(shuō)明其具有抑制大鼠疼痛的作用，但其作用機(jī)制尚不明確。本研究顯示SSI抑制神經(jīng)病理性疼痛大鼠疼痛的機(jī)制可能與其抑制NF-κB信號(hào)通路提高神經(jīng)病理性疼痛大鼠痛閾值有關(guān)，但其下游調(diào)控的信號(hào)通路分子機(jī)制仍不十分清楚。

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