穿山龍現代研究概況

王寶慶,李學彬,田志發,孫凱云,邢桂菊,高文遠

(1.天津大學藥物科學與技術學院,天津 300072;2.牡丹江市藥品檢驗所,黑龍江 牡丹江 157011)

穿山龍為薯蕷科植物穿龍薯蕷(Dioscorea nipponica Makino.)的干燥根莖。味甘苦溫,具有祛風濕,止痛,舒筋活血,止咳平喘祛痰功效。主治風濕性關節炎,筋骨麻木,大骨節病,跌撲損傷,慢性支氣管炎、咳嗽氣喘。民間多用其浸酒或煎服,為東北地區常用草藥。穿山龍中含有薯蕷皂苷元,也是較好的合成甾體激素藥的原料之一[1],現已成為醫藥工業原料。本文從7個方面綜述現代研究進展。

1 生藥學研究

穿山龍在歷代本草著作中無此藥名,《植物名實圖考》所載穿山龍非薯蕷科植物。今考證《圖經本草》中所指的成德軍萆薢很可能就是這一種,因《名醫別錄》載“生真定山谷”,即今河北正定縣;再從薯蕷科植物在我國的分布來看,我國黃河以北,除山藥(Dioscorea opposita Thunb.)外,只有穿龍薯蕷(D.nipponica Miq.)一種。

2 化學成分

根莖主要含薯蕷皂苷(Dioscin)、薯蕷皂苷元(Diosgenin)、25-△-螺旋甾-3,5-二烯(25-△-Spirosta-3,5-diene)、纖細薯蕷皂苷(Gracillin)、穗菝葜甾苷(Asperin)、25-D-螺甾-3,5-二烯(25-D-Spirosta-3,5-diene)及對羥基芐基酒石酸(Piscidic acid)[2-4]。總皂苷水解產生薯蕷皂苷元(Diosgenin)。薯蕷皂苷元的平均含量為0.93%～2.26%[5]。

3 成分分析

3.1 鑒別

3.1.1 檢查皂苷。取本品粉末約2g,加入水30m L,水浴上加熱10min,濾過。取水提液2m L,置于具塞試管中,振搖1min,產生大量蜂窩狀泡沫,放置10min,泡沫沒有明顯的消失。

3.1.2 檢查皂苷。取上述水提取液2m L,加入2%紅血球混懸液5～10滴,放置數min,血液逐漸被溶解使得提取液呈紅色透明液。

3.1.3 檢查皂苷。取本品粉末2g,加80%乙醇加熱浸提,過濾,濾液蒸去乙醇,放冷,殘渣溶于少量醋酸中,加醋酐和濃硫酸數滴,應呈紫紅色。

3.1.4 薄層色譜。樣品制備:取本品粉末5g,加2mol/L鹽酸約60m L,水浴上加熱水解3.5h,放冷濾過,殘渣用水洗至中性,烘干(80～100℃),加石油醚(60～90℃)回流提取4h,提取液蒸干后,殘渣用氯仿溶解至l0m L。吸附劑;1%CMC硅膠板。展開劑∶氯仿-丙酮(93∶7)。顯色劑:3%磷鉬酸溶液,加熱后顯藍色。結果有與薯蕷皂苷元和25-D-螺甾-3,5-雙烯相對應的斑點[6]。

3.2 含量測定

3.2.1 重量法。將新鮮樣品100成薄片,加等量水高速攪拌5min,加3.5mol/L鹽酸溶液115m L回流水解3h,室溫冷卻后,用布氏漏斗過濾,殘渣用水50m L洗8～10次后干燥。將此干燥的殘渣置沙氏提取器中用石油醚(30～60℃)提取8h,將提取液濃縮至10m L,在室溫放置2h,此時有薯蕷皂苷元的白色結晶析出,垂熔漏斗過濾,結晶用溶劑洗2次,在室溫放置30min,105℃干燥30min后稱重,計算薯蕷皂苷元的含量。

3.2.2 比色法。薯蕷皂苷元可與下列試劑顯色;甲醛-硫酸、改良的Liebermann試劑、硫酸、濃硫酸-甲醇、三氯化銻的硝基苯溶液、高氯酸-70%高氯酸-24%五氯化銻的70%高氯酸溶液以及茴香醛乙醇溶液-磷酸,可利用這些顏色反應進行比色測定。有濃硫酸-甲醇法、改良的Liebermam試劑法、三氯化銻法。

3.2.3 薄層掃描法。取樣品提取液點在硅膠G薄層板上,以羊毛甾醇為內標物,濃度為 6.67μg/10μL,以已烷-丙酮(4∶1)為展開劑,展開后在空氣中干燥10min,噴飽和的三氯化銻氯仿溶液。在 100℃加熱8min,40min后在470nm測定斑點面積。

3.2.4 高效液相色譜法。穿龍薯蕷中薯蕷皂苷元的含量測定 。

3.2.4.1 色譜條件。Shim-pacd CLC-Sil色譜柱(150mm×6.0mm),流動相:石油醚-異丙醇(98∶2),檢測波長:206nm,流速:l.2m L/min,靈敏度0.08AUFS,柱溫:室溫。

3.2.4.2 色譜條件[7]。以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;流動相∶乙腈-水(55∶45);檢測波長:203nm。

3.2.5 毛細管氣相色譜法。穿龍薯蕷總皂苷中薯蕷皂苷元的含量測定[8]。

色譜條件與系統適應性試驗。色譜柱為HP-1(Methylsiloxane)30.0m ×320μL×0.25μm 不銹鋼毛細管柱,柱溫 2700C,柱頭壓23.7kPa,汽化室溫度330℃,檢測器溫度310℃,載氣(N2)流速2.0m L/min,分流比40∶1,進樣量2μL。在本色譜條件下,對照品峰與雜質峰沒有重疊,分離效果好(分離度為11.21),分析速度快(tR約為6.40min),理論塔板數按薯蕷皂苷元計算為28756(n=3,RSD=l.6%)。

4 制劑

其制劑有穿山龍片、穿山龍注射液、穿山龍冠心靈等。

5 藥理研究

5.1 免疫調節

穿山龍對細胞免疫及體液免疫均有抑制作用。給小鼠連續7日皮下注射15g/kg煎劑,出現小鼠胸腺萎縮,淋巴細胞數減少,井抑制二硝基氯苯誘導皮膚遲發型超敏反應細胞免疫和溶血素的形成(體液免疫)。穿山龍不但對特異性免疫功能有抑制作用,還對非特異性免疫功能有增強作用,使小鼠腹腔巨噬功能及血清溶菌酶水平升高。

5.2 抗動脈粥樣硬化

給正常貓及實驗性動脈粥樣化兔灌服或靜脈注射薯蕷總皂苷5g/kg后,可使血漿膽固醇下降,減輕主動脈脂質浸潤[9]。

5.3 其他藥理作用

5.3.1 毒性。小鼠靜注總皂苷 LD50為750mg/kg,小鼠灌服總苷60～180mg/kg共7周,對血漿、肝功及主要臟器無影響[9]。

5.3.2 止咳祛痰、平喘。復方注射液可用于老年慢性氣管炎[9]。

5.3.3 強心。提取物及總皂苷可使離體和在體蛙心收縮加強,使血管擴張[9]。

5.3.4 抗菌抗病毒。水煎劑對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、卡他球菌、腦膜炎雙球菌,甲鏈球菌及流感病毒等有明顯抑制作用[10]。

6 臨床研究

6.1 治療類風濕性關節炎

穿山龍注射液(1g/m L,2m L)肌注治療類風濕性關節炎45例,顯效率40%,好轉率43.3%,總有效率83.3%,無明顯副作用,近期療效較好[11]。民間用本品泡酒煎服,治療筋骨麻木,風濕痹痛。

6.2 治療冠心病心絞痛

穿山龍根莖以水及乙醇為溶劑提取,經乙醚沉淀制得穿龍冠心寧。經臨床證明,對冠心病心絞痛有顯著療效,有效率為90.68%;對心悸、氣短、胸悶等癥狀有較好療效,有效率為77.30%,能改善冠狀動脈供血不足;對冠心病合并高血壓有一定降壓作用,對高甘油三酯血癥有較好療效[12]。四川生物研究所用復方穿山龍冠心靈治療冠心病、心絞痛等也有較好療效。

6.3 治療慢性支氣管炎

穿山龍飲片水煎劑治療37例,總有效率為86%;穿山龍片治療142例者,有效73例,占61%,顯效以上47例,占33%。從分型來看,對單純型和虛阻型療效較高,有效率分別為86%和82%。對咳、喘、痰均效果良好,對反復感染的痰阻型效果很差。其作用特點是起效較慢,但持續時間長。此外,還可使患者食欲增加,握力增加。對感冒引起的急性發作,合并呼吸道感染咯黃痰者,單用穿山龍效果不夠明顯,加服黃芩水煎液則療效顯著[13]。

6.4 治療慢性布魯菌病

許友璋報道了用穿山龍、秦艽、黃芪制成復方穿山龍注射液治療布魯菌病68例,治愈率75%[14]。

6.5 治療脂肪瘤

用穿山龍250g,在2000m L 60度的白酒中浸泡半月,治療一肩周炎患者,結果對肩周炎療效不大,但患者臀部20余年的雞蛋大的脂肪瘤竟意外地變軟、縮小,連服3個月,瘤體全部消失,在此期間患者未服其他藥物[15]。

7 小結和討論

綜上所述,20世紀80年代以前對穿山龍的研究側重于其有效成分、藥理和臨床應用方面,取得了許多有價值的成果,但多是單味藥的研究。有必要運用現代分析手段,加強其復方配伍的研究。由于甾體激素類藥物的臨床療效獨特,穿山龍中薯蕷皂苷元又是合成甾體激素的主要原料之一,薯蕷皂苷元的發現和利用為獲得資源豐富和經濟的天然甾體原料開辟了途徑。因此,人們逐漸開始重視穿山龍的資源開發,從穿山龍有性繁殖的研究、生物學特性、野生變家種的試驗等探討其馴化為人工栽培的可能性和必要性;同時,不斷地探索薯蕷皂苷元和薯蕷皂苷的提取工藝,提高其產率。如果能利用現代制劑技術,研制出高效的穿山龍新制劑,提高對這些疾病的遠期療效,將有著重要的科學價值和社會意義。

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