殺蟲單和殺蟲雙聯合使用對草魚車輪蟲病的防治效果

董亞萍 孫晶 胡鯤 楊先樂

摘要 [目的]研究殺蟲單和殺蟲雙聯合使用對草魚車輪蟲病的防治效果。[方法]將殺蟲單和殺蟲雙與環烷酸銅、氯化鈉、壬基酚聚氧乙烯醚、聚氧乙烯失水山梨醇單油酸酯、十二烷基硫酸鈉、壬基酚聚氧乙烯醚硫酸鈉、月桂氮酮按不同比例聯合配比，用甲醇和水將其充分混合后制成液體藥物，觀察其對草魚車輪蟲的殺蟲效果。[結果]當殺蟲單和殺蟲雙的含量分別為15.5%和34.0%時，按10 mg/mL的劑量對車輪蟲作用24 h后其殺蟲效果達100%，并且在不同用藥濃度下其混合藥物的殺蟲效果要顯著高于其他組。[結論]將殺蟲單和殺蟲雙2種藥物聯合使用可以達到最佳的殺蟲效果，研究結果可為水產養殖中寄生蟲病的防治提供用藥參考。

關鍵詞 殺蟲單；殺蟲雙；草魚；車輪蟲

中圖分類號 S941.5 文獻標識碼

A 文章編號 0517-6611（2018）13-0088-02

Study on Control Effect of Combined Use of Monosultap and Dimehypo on Trichodiniasis of Grass Carp

DONG Yaping1，2，3，SUN Jing1，2，3，HU Kun1，2，3 et al

（1.National Pathogen Collection Centre for Aquatic Animals，Shanghai Ocean University，Shanghai 201306；2.National Demonstration Center for Experimental Fisheries Science Education，Shanghai Ocean University，Shanghai 201306；3.Shanghai Collaborative Innovation Center for Aquatic Animal Genetics and Breeding，Shanghai Ocean University，Shanghai 201306）

Abstract [Objective] To study the control effects of combined use of monosultap and dimehypo on trichodiniasis of grass carp.[Method] Monosultap and dimehypo were mixed with copper naphthenate，sodium chloride，nonylphenol polyoxyethylene ether，polyoxyethylene sorbitan monooleate，sodium dodecyl sulfate，nonylphenol polyoxyethylene ether sodium sulfate and ldodecylazacycloheptan2one in different mixing proportions to prepare liquid drugs after they were fully mixed with methanol and water.And their insecticidal effect on Trichodina sp.in grass carp was observed.[Result] When the contents of monosultap and dimehypo were 15.5% and 34.0% respectively，the insecticidal effect reached 100% after they were conducted on Trichodina sp.at a dose of 10 mg/mL 24 h.The insecticidal effect of mixed drugs at different concentrations was significantly higher than that in other groups.[Conclusion] The combined use of monosultap and dimehypo could achieve the best insecticidal effect，and the research could provide medication reference for the prevention and control of parasitosis in aquaculture.

Key words Monosultap；Dimehypo；Grass carp；Trichodina sp.

我國是水產養殖大國，水產動物寄生蟲病是影響水產養殖業經濟效益的重要因素之一[1]，而寄生蟲疾病是危害淡水魚類較為嚴重的疾病之一[2]，其中危害較大的水產動物寄生蟲有車輪蟲、指環蟲等。小車輪蟲屬共有11種寄生蟲，其中我國發現5種[3-5]。車輪蟲和指環蟲可寄生在淡水、海水的各種魚類，主要寄生在魚的體表、鰓（絲）上[6]，嚴重時甚至會導致宿主寄生部位發生病變。當車輪蟲或車輪蟲與指環蟲同時在魚體皮膚和鰓絲上大量寄生時，不僅會破壞其組織，而且會嚴重影響魚類的正常呼吸，甚至引起死亡。車輪蟲主要危及魚苗，同時也容易感染越冬時期和繁殖季節的魚體[7]，給水產養殖業造成巨大的經濟損失。

殺蟲單和殺蟲雙對水生動物及人畜均沒有危害，具有殺蟲效果好、價格低廉等優點。其中，殺蟲單要比殺蟲雙的殺蟲效果好[8]。隨著殺蟲單或殺蟲雙在水產養殖中寄生蟲疾病中的大量使用，其單獨使用的殺蟲效果也有所減弱。為增強殺蟲劑的效果，降低藥物殘留，控制耐藥風險，筆者研究了殺蟲單和殺蟲雙聯合使用對草魚車輪蟲病的防治效果，旨在為水產養殖中車輪蟲等原蟲引發的疾病提供用藥參考。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 試驗動物?；加熊囕喯x病的草魚400尾，平均體質量（20±5）g，病魚黑瘦、不攝食，魚的鰓和嘴周圍呈微白色，鰓部黏液較多，鰓絲鏡檢可發現大量車輪蟲寄生（18～25個/尾），蟲體較小。將試驗用魚置于4 L玻璃容器中，24 h增氧，pH 7.0～7.4。在試驗前暫養15 d。每天投喂2次飼料，參考NRC營養標準配制飼料。

1.1.2 試劑。殺蟲單（CAS：29547-00-0）和殺蟲雙（CAS：52207-48-4）購自北京市教科生物技術有限公司；環烷酸銅、氯化鈉、壬基酚聚氧乙烯醚、聚氧乙烯失水山梨醇單油酸酯、十二烷基硫酸鈉、壬基酚聚氧乙烯醚硫酸鈉、月桂氮酮、甲醇均購于國藥化學試劑有限公司。

1.1.3 儀器與耗材。光學顯微鏡、量筒，蒸餾水、玻璃棒、養殖箱等。

1.2 方法 各組殺蟲單、殺蟲雙、環烷酸銅、氯化鈉、壬基酚聚氧乙烯醚、聚氧乙烯失水山梨醇單油酸酯、十二烷基硫酸鈉、壬基酚聚氧乙烯醚硫酸鈉、月桂氮酮、甲醇和水按不同的比例配制（表1），每組20尾草魚，按6、10、12 mg/L的濃度分別潑灑到各組中進行試驗。分別在6、12、24 h和7 d后取活體魚的鰓絲和體表黏液，制成切片，在40～160倍顯微鏡下觀察單個視野中車輪蟲的存活情況。

1.3 數據分析 殺蟲率為20%～30%的藥物濃度為最低有效濃度；在魚未中毒且達到最高殺蟲率時的藥物濃度為最佳殺蟲濃度。按照以下公式計算殺蟲率：殺蟲率=（用藥前車輪蟲的平均存活數量-用藥之后車輪蟲的平均存活數量）/用藥前車輪蟲的平均存活數量×100%。

2 結果與分析

不同比例的藥物在不同濃度下作用6、12、24 h后，使用顯微鏡觀察車輪蟲活體數量。與對照組相比，用藥組在不同藥物濃度下隨著時間的增加，其剩余活體蟲的數量逐漸減少。根據用藥前后的蟲體活體數量，計算出不同藥物在不同時間的殺蟲率。從圖1可以看出，與其他組相比，24 h后，當濃度為10 mg/mL時組④的殺蟲率達100%，且組④在不同藥物濃度的殺蟲率也明顯高于其他組。對照組中車輪蟲蟲體數量隨著時間的增加呈現增長狀態，蟲體在沒有用藥的情況下，蟲體呈正常游動狀態，而各用藥組的蟲體游動異?；蛴蝿泳徛?。由此可見，無用藥組的蟲體是不斷生長和繁殖的。

3 討論與結論

近年來，水產動物寄生蟲病害問題有增無減，幾種病并發的狀況也時有發生[9]，目前對車輪蟲病的防治方法仍然以藥物防治為主[10-11]，生產實踐中運用各種防治寄生蟲病的藥物不僅增加了防治難度，而且藥物使用安全問題也日益突出。 水產養殖中對寄生蟲防治的常用藥物有消毒劑類、抗微生物類、微生態制劑類、抗寄生蟲類、農藥類等9類[12-15]，其中有機磷類農藥在我國農藥產量的占比中高達50%[16-17]。在使用過程中僅有少部分的藥物通過乙酰膽堿酯酶（AChE）等引起神經傳導紊亂[10-11，18]，作用于動物的靶細胞達到殺蟲效果，但大部分會轉至土壤、水環境等。

在水產養殖中過量使用含磷類殺蟲藥物不僅對水生動物有高毒性，而且還會造成水體污染，引起水生生物體內藥物殘留超標或急性危害。汪安泰等[19]研究了硫酸銅、亞甲基藍以及中性紅對車輪蟲的防治效果，結果發現硫酸銅相比于后兩者對原蟲的殺滅作用要強，產生的毒性較高。高莉霞等[20]研究了福爾馬林、硫酸銅及硫酸亞鐵等消毒劑對車輪蟲和斜管蟲的防治作用，結果發現福爾馬林的防治效果顯著高于其他2種，并且安全濃度為2 mg/L，在實際生產中的用量可能會高于此濃度。但藥物的不恰當使用會引起水產動物正常組織損傷，也在不同程度影響其免疫功能[21]，同時也會產生耐藥性。藥物的聯合使用可以最大程度地發揮單種藥物的作用，也可以降低藥物的使用量，較少藥物殘留，降低耐藥風險。

殺蟲單和殺蟲雙均具有很強的觸殺、胃毒以及內吸傳導作用。該試驗中當殺蟲單與殺蟲雙的比例為15.5∶34.0時殺蟲效果最優，并且添加1.2%的環烷酸銅作為滲透和殺菌劑、6.5%的無機鹽氯化鈉，分別添加1.5%和1.0%的壬基酚聚氧乙烯醚和聚氧乙烯失水山梨醇單油酸酯作非離子表明活性劑、十二烷基硫酸鈉和壬基酚聚氧乙烯醚硫酸鈉作為陰離子表面活性劑添加量分別為0.5%和0.2%，月桂氮酮可以促進藥物快速滲透到機體內，其添加量為0.8%?；旌吓渲频臍⑾x藥物溶液不僅具有殺蟲效果，而且可以凈化水質，降低藥物對環境造成污染。研究結果可為水產養殖中車輪蟲病防治提供用藥參考。

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